全 文 ：中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第6期2005年6月·927·
最高的4个产地依次为桦甸市、吉林市、齐齐哈尔市
和黑龙江省依兰县，且均高于3mg／g，这4个产地
的龙胆样品属于道地药材，且均来源于主产地。
3．3 38批龙胆样品中当药苷质量分数差异很大。
25批样品中检出当药苷，13批样品中未测出当药苷
或其量极低。黑龙江省依兰县所产的龙胆中当药苷
质量分数最高(5．41rag／g)，其余产地的样品中当
药苷均低于0．8mg／g。
Reference：
[1]c仇P(中国药典)Cs3．VolI．2000．
HPLC法测定九节菖蒲中5一羟基4一氧代戊酸
谭文界，游菲，黄敏
(湖北中医学院，湖北武汉430061)
九节菖蒲为毛茛科植物阿尔泰银莲花
AnemonealtaicaFiseh．exC．A．Mey．的根茎，具
有开窍、豁痰、祛风、宣湿、醒脾、解毒等功效。本课题
组从九节菖蒲中分离得多个化合物，其中质量分数
较高、具生物活性(镇静)且在其他中药中尚未发现
的成分是5一羟基4一氧代戊酸。本实验采用HPLC法
对该有机酸进行了分析，分离效果、线性、重现性等
良好，回收率符合要求，可作为该药材质量控制的有
效手段之一。
1仪器与试药
Dionex高效液相色谱仪，UVD一170u检测
器、Chromeleon色谱工作站、PHS一25型pH计。九
节菖蒲A．altaicaFisch．exC．A．Mey．(经本院
陈科力教授鉴定)，5-羟基4一氧代戊酸对照品(自
制，经熔点、IR、13C—NMR、1H—NMR谱确认其结
构)。
2方法与结果
2．1 薄层色谱鉴别：取九节菖蒲药材粉末(过20
目筛)1g，加水10mL提取30rain，滤过，滤液用
醋酸乙酯萃取，醋酸乙酯液浓缩作为对照药材溶液。
另取少量5一羟基4一氧代戊酸用醋酸乙酯溶解作为
对照品溶液。
吸取上述两种溶液各约5ttL分别点于同一羧
甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶薄层板上，以甲苯一醋
酸乙酯一甲酸(4：5：1．5)为展开剂、展开、取出、晾
干，待甲酸挥尽时，喷以溴甲酚兰显色剂，对照品、对
照药材在相同Rf值处显黄色斑点。
2．2色谱条件：色谱柱为AlhimaC，。反相色谱柱
(250mm×4．6ITlm，5肛m)；流动相：5g／L
(NH。)。HPO。缓冲液；体积流量：1mL／min；柱温：
收稿日期：2004—0901
25℃；检测波长：214nm。色谱图见图1。
1．Peakl．8656
A B
88 100 63 75 88
f／mln
图1 对照品(A)和样品(B)的HPLC色谱图
Fig．1HPLCchromatogramsfreference
substance(A)andsample(B)
2．3对照品溶液的制备：分别精密称取5一羟基4一
氧代戊酸对照品2．1、4．2、6．3、8．4、10．5mg，分别
置于10mL量瓶内，加流动相溶解，至刻度，得相应
质量浓度的对照品溶液。
2．4供试品溶液的制备：精密称取九节菖蒲药材粉
末(过20目筛)1．003g，加蒸馏水lomL水浴温
浸40min，滤过，滤液用醋酸乙酯萃取3次(每次各
10mL)回收醋酸乙酯液，残余物用流动相溶解，移
至10mL量瓶内并加至刻度。
2．5标准曲线的制备：按上述色谱条件，分别对5
种不同质量浓度的对照品溶液进样20肚L，测定。以
峰面积积分值(y)对质量浓度(x)进行回归分
析，得回归方程：Y一5．8960X+0．0003，r一
0．999，结果表明：5一羟基4一氧代戊酸在0．21～
1．05mg／mL与峰面积线性良好。
2．6精密度试验：取同一供试品溶液，在选定的色
谱条件下，依法测定，重复进样5次。计算5一羟基4一
氧代戊酸峰面积的RSD为1．19％。
2．7稳定性试验：取同一供试品溶液，分别在放置
万方数据
·928· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第6期2005年6月
0、1、2、4、6、8h依法操作，进样量20弘L，测定峰面
积。结果5一羟基4一氧代戊酸峰面积的RSD为
2．67％，表明供试品溶液在8h内稳定性较好。
2．8重现性试验：精密称取同一批的药材的样品5
份，制备供试品溶液，结果5一羟基4一氧代戊酸质量
分数的RSD为2．29％。
2．9加样回收率试验：精密称取已测知5一羟基4一
氧代戊酸质量分数的样品约0．5g，再分别精密加
入约0．24mg5-羟基4一氧代戊酸对照品，按样品测
定项下操作依法测定，计算得平均回收率为
100．46％，RSD为2．51％(行一5)。
2．10样品测定：按上述测定方法测定不同批次的
九节菖蒲药材中5一羟基4一氧代戊酸的质量分数。结
果见表1。
表1样品测定结果(n一3)
Table1 Determinationresultsofsamples(H一3)
5一羟基4一氧代戊酸／％
0．512
0．496
0．475
3讨论
3．1 5一羟基4一氧代戊酸紫外最大吸峰波长位于
210nm处，由于处于末端吸收，易受药材中其他成
分干扰，故将检测波长移至214nm。
3．2供试品溶液制备曾采用直接用水超声提取，但
出峰多干扰大，分离度差，故采用水提后，醋酸乙酯
萃取制备供试品溶液，以除去极性大的杂质。
HPLC法测定沪地龙中次黄嘌呤
胡 馨，王倩
(上海市中药研究所，上海 200127)
沪地龙是钜蚓科通俗环毛蚓Pheretimavul—
garisChen、威廉环毛蚓P．guillelmiMichaelsen
或栉盲环毛蚓P．pectiniferaMich elsen的干燥
体。夏季捕捉，及时剖开腹部，除去内脏及泥砂，洗
净，晒干或低温干燥。地龙具有清热定惊、通络、平
喘、利尿的功能，用于高热神昏、惊痫抽搐、关节痹
痛、肢体麻木、半身不遂、肺热喘咳、尿少水肿及高血
压[1]。地龙分为广地龙与沪地龙，过去主要使用广地
龙，而近年来上海也养殖地龙，但对沪地龙的研究较
少，据报道次黄嘌呤是地龙扩张支气管成分，从地龙
中分离出的次黄嘌呤有抗组胺、降血压等作用[1]。笔
者曾经用紫外分光光度法测定沪地龙中次黄嘌
呤[2]，本实验在此基础上采用RP—HPLC法测定了
上海地区沪地龙中的次黄嘌呤，方法简便可靠。
1仪器与材料
Agilent1100高效液相色谱仪。甲醇、四氢呋喃
为色谱纯，水为超纯水。次黄嘌呤对照品由Sigma
公司提供，沪地龙为上海德华药业有限公司提供。
2方法与结果
2．1 色谱条件：色谱柱用十八烷基键合相硅胶为填
充剂；水一甲醇一四氢呋喃(100：0．12：0．04)为流
动相；检测波长为254nm。理论塔板数按次黄嘌呤
峰计应不低于2000。
2．2对照品溶液的制备：精密称取次黄嘌呤对照品
适量，加水制成30p．g／mL的溶液，即得储备液。
2．3供试品溶液的制备：取沪地龙粉末(过60目
筛)0．2g，精密称定，置100mL量瓶中，加入80
mL水，超声提取30min，放冷，加水至刻度，摇匀，
静置，上清液用微孔滤膜(o．45肛m)滤过，即得。
2．4标准曲线的制备：分别精密吸取次黄嘌呤储备
液0．25、0．5、1、2、3、4和5mL置于50mL量瓶
中，加水至刻度，精密吸取10肛L，注入液相色谱仪，
测定，以质量浓度(C)为横坐标，峰面积(A)为纵
坐标，绘制标准曲线，得方程：A一35．956C一
0．1702，r一0．999。结果表明次黄嘌呤在0．15～
3．0／29／mL与峰面积具有良好的线性关系。
2．5精密度试验：同一次黄嘌呤对照品溶液，以相
同进样量重复进样5次，测定，结果峰面积RSD为
0．83％(孢一5)。
2．6重现性试验：取同一批号的样品6份，制备供
试品溶液，进样，测定，计算得次黄嘌呤的质量分数，
结果RSD为0．16％(卵一6)。
收稿日期：2004—07—19
作者简介：胡馨(1963一)，女，满族人，高工，上海市中药研究所分析测试中心主任，研究方向为中药及天然药物分析研究，新药质量标
准研究。Tel：(021)58810853310E—mail：huxin736@126．com
万方数据
HPLC法测定九节菖蒲中5-羟基4-氧代戊酸
作者： 谭文界， 游菲， 黄敏
作者单位： 湖北中医学院,湖北,武汉,430061
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(6)
被引用次数： 1次

本文读者也读过(10条)
1. 李婷婷.路芳.杨秀东.吕刚.刘大有 九节菖蒲研究进展[期刊论文]-长春中医药大学学报2006,22(3)
2. 林双峰.魏刚 不同产地九节菖蒲挥发油成分分析[期刊论文]-中药材2002,25(4)
3. 杨晓津.陈鸿英 HPLC法测定阿尔泰银莲花中齐墩果酸和熊果酸的含量[期刊论文]-天津药学2008,20(6)
4. 徐敬东.秦晓民.鲁彦.高宇勤 九节菖蒲对大鼠胃电活动的抑制作用及机制探讨[期刊论文]-时珍国医国药
2002,13(7)
5. 邹忠杰.杨峻山.ZOU Zhong-jie.YANG Jun-shan 九节菖蒲的化学成分[期刊论文]-华西药学杂志2008,23(3)
6. 邹忠杰.杨峻山.Zou Zhongjie.Yang Junshan 九节菖蒲的化学成分[期刊论文]-中国现代中药2008,10(9)
7. 张帆.王兴明.彭树林.丁立生.ZHANG Fan.WANG Xing-ming.PENG Shu-lin.DING Li-sheng 伏毛铁棒锤根部二萜
生物碱的研究[期刊论文]-中国药学杂志2006,41(24)
8. 刘大有.王晓颖.夏忠庭.王旭 两头尖化学成分研究[期刊论文]-长春中医学院学报2003,19(3)
9. 许志.牟欣.高秀芝.田景奎.刘安 竹节香附的化学及药理研究进展[期刊论文]-基层中药杂志2001,15(6)
10. 刘大有.李勇.赵博.周鸿立.刘淑华.高妃 两头尖地上部分化学成分及其含量测定分析[期刊论文]-长春中医学
院学报2005,21(1)

引证文献(1条)
1.李敏.杨滢.杨滢.王喆之.李翠芹 HPLC法测定九节菖蒲中琥珀酸含量[期刊论文]-现代生物医学进展 2011(23)


本文链接：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200506051.aspx