全 文 ：中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第11期2008年11月· 709·
率[1叫。红景天口服液对大鼠高原性肺水肿有预防作
用n¨，红景天有效成分红景天苷可抑制缺氧状态下
鼠肺动脉平滑肌细胞的增殖和DNA合成，从而降
低肺循环阻力，起到保护肺的作用[1引。尽管红景天
对各种原因引起的肺损伤可能具有一定的保护作用，
但其作用机制尚未清楚。目前，口服红景天制剂用于
临床，在用药周期和剂量上受到诸多因素的限制。
红景天注射液属七类中药新药[13‘，具有活血化
瘀，改善心肌缺血，保护受损心肌的功效，对冠心病
心绞痛病人有确切的疗效。有研究提示，红景天有效
成分能够提高体内谷胱甘肽过氧化物酶和超氧化物
歧化酶的活性，减少组织中羟自由基的量，对组织蛋
白质和细胞膜起到保护作用[1“15]，而氧化应激是油
酸诱导急性肺损伤的重要发病机制之一。本次研究
结果显示，在注入油酸15min之前给予红景天注射
液，有效抑制油酸引起的P(o。)的降低、减轻肺水
肿、降低肺毛细血管膜通透性和肺病理损伤程度，提
高肺组织中SOD活性、降低MDA量。综上所述，
红景天注射液预先给药，可有效减轻油酸诱导的家
兔ALI，可能通过清除和防止自由基的形成，进一
步降低肺泡毛细血管膜通透性而达到保护作用。
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锦灯笼水提物对大鼠胸主动脉的舒张作用及机制
刘晓丹，潘振伟，庄须国，李国玉，牛慧莉，吕延杰’，杨宝峰
(哈尔滨医科大学药学院药理教研室，省部共建生物医药国家重点实验室，黑龙江哈尔滨150086)
摘要：目的观察锦灯笼水提物对大鼠离体胸主动脉环的舒血管作用并探讨其作用机制。方法采用大鼠胸主
动脉环张力测定法。结果在内皮完整及去内皮血管上。锦灯笼水提物均浓度(o．5～64g／L)依赖性地降低苯肾
上腺素(1．0×10-5tool／L)及氯化钾(6．0X101tool／L)预收缩血管的张力；一氧化氮合酶抑制剂左旋硝基精氨
酸甲酯(L—NAME)对锦灯笼水提物的舒血管作用无明显影响(P>0．05)；钾通道阻断剂TEA、4-氨基吡啶(4一
AP)、格列苯脲对锦竹笼水提物的舒血管作用无明显影响(尸>0．05)；但在无钙环境下。锦灯笼水提物对苯肾上腺
素预收缩血管的舒张作用明显减弱，与有钙液相比，差异显著(P<0．01)。此外，锦灯笼水提物对PDBu预收缩的
血管有明显的舒张作用(尸有与其抑制外钙内流，以及抑制PKC信号传导通路有关。
关键词：锦灯笼水提物l胸主动脉环；舒张}外钙内流
中围分类号：R284．2；R285．5，R965．2文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2008)11—1709—04
收稿日期：2008一04一03
基金项目：黑龙江省青年科学基金(QC07C69)；黑龙江省科学技术攻关重点项目(2006G2215一oo)
作者简介：刘晓丹(1981一)，女．黑龙江省七台河市人．硕士研究生，研究方向为心血管药理学。Telt(0451)86671354
E—mail：Ixdpopo@sina．com
*通讯作者吕延杰Tel：(0451)86671354Fax：(0451)86699644E—mail：cwf76928@163．corn
万方数据
·1710· 中草焉ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第11期2008年11月
锦灯笼为茄科植物酸浆PhysalisalkekengiL．
var．franchetii(Mast。)Makino的干燥宿萼或带
果实的蓿萼。其气微，宿萼味苦，果实味甘、微酸；生
长于路旁及田野草丛中，全国大部分地区均有分
布[1]。本品具有清热解毒、利咽、化痰、利尿作用‘纠，
用于咽痛音哑，痰热咳嗽，小便不利；外治天疱疮，湿
疹。虽然锦灯笼的l临床应用广泛，但目前未见其舒血
管作用机制的报道。本研究利用离体大鼠胸主动脉
环模型，观察锦灯笼水提物的舒张血管作用及相关
机制。
1材料
1．1 动物：Wistar大鼠，雌雄兼用，体质量250-
300g，由哈尔滨医科大学实验动物中心提供。
1．2 药品：锦灯笼水提物(aqueousextractof
C口bz$euFr ctusPhysalis，AECFP)，将锦灯笼用
85％乙醇回流提取，得到的粗提液进行减压浓缩，
得粗浸膏，加适量蒸馏水，使其成为水混悬浊液，用
等体积的石油醚萃取3次，将石油醚层弃去，水层通
过D101大孔树脂柱，用水洗脱得水部分，用95％
乙醇洗脱得醇部分，将醇部弃去，实验中使用的为锦
灯笼水提取物(含生药量5g／mL)。
1．3 试剂：左旋硝基精氨酸甲酯(Ⅳ”一nitro—L—argi—
nine—methyl-ester，三一NAME)，4-氨基吡啶(4一
aminopyrimide，4一AP)，tetrathylamonium(TEA)，
苯肾上腺素(phenylephrine，PE)，卡巴胆碱
(Carbacholine，CCH)，格列苯脲(glybenclamide)，
12，13一二丁基佛波酯(phorbol12，13一dibutyrate，
PDBu)及EGTA为Sigma公司产品，其他试剂为
国产分析纯。
1．4 仪器：HV一4血管环灌流系统(成都泰盟科
技有限公司)、BL一420生物机能实验系统(成都泰
盟科技有限公司、JH一2肌张力换能器(北京航天
医学工程研究所)。
2方法
2．1血管环的制备E3J：将Wistar大鼠用10％的水
合氧醛麻醉后，迅速取出胸主动脉，置于预先冷冻
(4℃)的Krebs—Henseleit(K—H)(NaCI118
mmol／L，KCI4．7mmol／L，CaCl22．5mmol／L，
KHzPO‘1．2mmol／L，MgSO‘1．2mmol／L，
NaHC0325．0mmol／L，Glucose11．1mmol／L，pH
7．20--,7．40)中，持续通混合气体(95％O：和5％
CO：)。去除血管壁周围的结缔组织，将血管剪成3～
4mm的血管环。将血管环移至盛有10mLK—H
液，恒温37℃，持续通混合气体的浴槽中，用两支L
钩穿过血管环，一支固定在浴槽内的挂钩上，另一支
与肌力传感器相连，用BL--420E生物机能系统记
录血管环的张力。实验前，血管环预先给基础张力
0．5g，平衡40min，然后将张力调节至1．5g，再平
衡40min，在平衡期间不断调整张力，使之维持1．5
g，并每隔20min更换营养液一次[．】。在制备破坏内
皮的血管环时，先用表面粗糙的棉棒插入主动脉内，
轻轻地向同一方向旋转数圈，再将血管剪成血管环。
以CCH(4．5pmol／L)检查血管内皮是否完整。
2．2锦灯笼水提物对血管的舒张作用：取内皮完整
(Endo+)、去内皮(Endo一)和用一氧化氮合酶抑
制剂L—NAME孵育的血管环，加PE或KCI使终
浓度分别为1．0X10咱和0．06mol／L，达收缩平台
后，采用累计加药法加入锦灯笼水提物，PE预收缩
时 水提物的累计加药浓度为2,．-,64g／L，KCI
预收缩时锦灯笼水提物的累计加药浓度为0．5～64
g／L。加药间隔为15min，记录血管张力变化曲线。
2．3 K+通道阻断剂对锦灯笼水提物舒血管作用的
影响：按需要取有或无内皮血管，分别与L—NAME
(3．0×10—3mol／L)、4一AP(0．5mol／L)、TEA(1
mol／L)、glybenclamide(1．0×10-3mol／L)于
37℃孵育10min，按上法测定锦灯笼水提物对PE
预收缩血管张力的影响，然后对加入阻断剂与未加
阻断剂的血管环收缩率进行比较，记录两种情况下
血管张力的变化曲线。
2．4钙离子对锦灯笼水提物舒血管作用的影响：去
内皮血管用无钙液孵育30min，每隔10min换无
钙液一次，加PE使浓度为1．0×10一rnol／L，达到
收缩平台后，一次性加入32g／L锦灯笼水提物，观
察在无钙环境下锦灯笼水提物对PE收缩血管张力
的影响，并与有钙液组(K—H液)进行比较。
2．5 锦灯笼水提物对PDBu缩血管作用的影响：
去内皮血管加入蛋白激酶C激动剂PDBu(1．0×
10～mol／L)，达到收缩平台后，加入32g／L锦灯笼
水提物，观察锦灯笼水提物对PDBu缩血管作用的
影响。
2．6数据处理：数据均以2±5表示，采用Student—
t检验和方差分析做统计学分析。
3结果
3．1锦灯笼水提物的舒血管作用：锦灯笼水提物可
以显著舒张由PE引起的血管收缩，但在内皮完整、
去内皮及加入一氧化氮合酶抑制剂L—NAME后，
均不能减弱或阻断锦灯笼水提物对PE预收缩血管
的舒张作用，但其舒张程度差异不显著(P>o．05)。
万方数据
中草喃 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第11期2008年11月· 711·
见图1。
锦灯笼水提物能够浓度依赖性地舒张由KCI
引起的血管收缩，但在内皮完整、去内皮及加入L—
NAME后的血管上差异不显著(P>O．05)。见图2。
120
100
80
蒋60
篓40
20
0．5 l 2 4 8 1632 64
AECFP／(g·L1)
围2铞灯笼水提物对KCl引起的血冒收缩的
舒张作用(；士s，库=10)
Fig．2RelaxationofAECFPonKC!一Induced
contraction(；士s，万一10)
3．2 K+通道抑制剂对锦灯笼水提物舒血管作用的
影响：各种K+通道抑制剂对锦灯笼水提物舒张PE
预收缩血管的影响见图3。由图可知，Ca2+激活的钾
离子通道抑制剂TEA，KA丁P非特异性抑制剂格列苯
脲以及电压敏感型K+通道抑制剂4-AP，对锦灯笼
水提物引起的PE预收缩血管的舒张作用无明显影
响(P>O．05)。
3．3钙离子对锦灯笼水提物的舒血管作用的影响：
无钙环境中，当PE预收缩达到平台，加入32g／L
锦灯笼水提物，锦灯笼水提物的舒血管作用，与有钙
液组相比差异有显著性(P3．4 PDBu对锦灯笼水提物舒血管作用的影响：锦
灯笼水提物对PDBu预收缩血管的作用见图5。如图
可知，在去内皮的血管中，加入PDBu后，血管显著
收缩，达到平台后，加入32g／L锦灯笼水提物，血管
120
100
80
《
哥 60
嫖
擎40
20
圈3
Fig．3
2 4 8 16 3264
AECFP／(g·L4)
TEA、4-AP、glybenclamide对锦灯笼水提物
引起的去内皮血管的舒张作用(j士$，开=10)
EffectofTEA，4·AP·andglybenclamideon
AECFP—inducedrelaxationinendothelium—
denudedaorticrings(工±j，撑=10)
100
如
芝60
需
器40
20
0
含C矿无C矿
与有钙液组比较：一P’。P圈4 Ca2+对锦灯笼水提物舒血管作用的影响
(J±，，席一10)
Fig．4EffectofCa”onAECFP—inducedrelaxationin
endothelium—denudedaorticrings(x士3，辟=10)
3．0
2．5
∞2．0
絮15
斗茜
1，O
0，5
0，0
PDBuPDBu+AECFP
与加入锦灯笼水提物前相比t—P<0．01
。’P图5锦灯笼水提物对PDBu收缩血管张力值的影响
(；士g，疗=10)
Fig．5EffectofAECFPon DBucontraction
ofaorticrings(工士s，开=10)
呈现明显的舒张作用，与加入锦灯笼水提物前相比，
差异显著(P<0．01)。
4讨论
本研究显示，锦灯笼水提物可以浓度依赖性地
∞
∞
∞
∞
∞
加
0
《哥好擎
万方数据
·1712· 中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第11期2008年11月
舒张PE及KCI引起的血管收缩，且在内皮完整及
去内皮血管上差异不显著。在内皮完整血管上，一氧
化氮合酶抑制剂L—NAME不能削弱锦灯笼水提物
对PE和KCl预收缩血管的舒张作用。上述结果提
示，锦灯笼水提物的舒血管作用不依赖于血管内皮，
而是直接作用于血管平滑肌上。
K+通道在调节血管平滑肌收缩及血管张力中
具有重要作用。激活血管平滑肌上的K十通道，往往
引起细胞膜超极化，从而抑制细胞外钙内流，引起血
管舒张[5]。血管平滑肌上主要存在4种K+通道：
ATP敏感K+通道(KATP)，Ca2+激活的K+通道
(Kca)，电压敏感型K+通道(Kv)及内向整流型
K+通道(Km)，glybenclami为KATP非特异性抑制
剂，TEA和4一AP分别是Kca和Kv抑制剂L6]。本
研究显示，TEA、4-AP和glybenclamide对锦灯笼
水提物的血管舒张作用无明显影响，提示锦灯笼水
提物的血管舒张作用与K+通道无关。
PE诱导的血管收缩是由a、一肾上腺素受体的激
活造成的，主要是通过激活磷脂酶C，产生甘油二酯
(diglyceride，DG)和三磷酸肌醇(1，4，5-inositol
triphosphate，IP3)，DG可以激活蛋白激酶C
(proteink aseC，PKC)，使血管平滑肌细胞
(VSMC)内钙调蛋白等细肌丝磷酸化、肌球蛋白
ATP酶激活、细胞内[-Ca2+]；上升，导致肌球蛋白牵
动肌动蛋白引起平滑肌的收缩[7]。而IP3则可以诱导
肌浆网内的钙离子释放[8~1叫。因此PE是通过胞内肌
浆网中Ca2+释放及胞外Ca2+内流而引发血管收缩
的。在本实验中，锦灯笼水提物抑制PE引起的血管
收缩，说明其作用可能是抑制肌浆网中Ca2+释放或
抑制外钙内流。由于用无钙液孵育，细胞外液无Ca2+
存在，PE只能通过胞内Ca2+释放而实现收缩。而锦
灯笼水提物使PE收缩血管作用明显减弱，提示锦灯
笼水提物的舒血管作用可能与抑制外钙内流有关。
Ca2+非依赖性机制或Ca2+敏感化机制一般包
括3条信号传导通路：PKC、Rho激酶和p44／42丝
裂原活化蛋白激酶(p44／42MAPK)传导通路。血
管活性物质与平滑肌细胞膜结合后除升高[Ca2+]i
外，还激活PKC、Rho激酶和p44／42MAPK。前两
者最终抑制肌球蛋白轻链磷酸酶(MLCPh)，减少
磷酸化的肌球蛋白轻链的脱磷酸化，从而增加磷酸
化的肌球蛋白轻链的量，这种调节机制增加血管平
滑肌收缩，同时并不增加[Ca2+]i，所以被称为Ca2+
非依赖性机制或Ca2+敏感化机制。在实验中，锦灯
笼水提物使PKC激动剂PDBu预收缩的血管舒
张，说明锦灯笼水提物抑制PKC信号传导途径，从
而实现对血管的舒张作用。
本研究结果表明，锦灯笼水提物对大鼠胸主动
脉产生非内皮依赖性的血管舒张作用，其作用机制
可能与抑制外钙内流及抑制PKC信号传导通路有
关。锦灯笼水提物的血管舒张作用可能是其降血压
作用的主要机制。其对离子通道作用的直接依据正
在进一步研究中。
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《中国新药杂志))2009年征订启事
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前研究和临床试验的创新性研究成果，辟有全球新药快报、新药策略、综述、实验研究、制剂与质控、临床研
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网址：http：／／www．newdrug．cn电子信箱：xyzz711@sohu．com·cndj@newdrug·cn
万方数据
锦灯笼水提物对大鼠胸主动脉的舒张作用及机制
作者： 刘晓丹， 潘振伟， 庄须国， 李国玉， 牛慧莉， 吕延杰， 杨宝峰
作者单位： 哈尔滨医科大学药学院,药理教研室,省部共建生物医药国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨
,150086
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2008,39(11)

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