全 文 ：·898· 中单菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第6期2006年6月
灯盏细辛注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤后梗死面积比和波谱的影响
刘 华1，廖娃靖2，周 华3，魏黎4
(1．苏州卫生职业技术学院康复医学教研室．江苏苏州 215002；2．武汉大学中南医院康复医学科，湖北武汉430071
3．苏州大学附属第一医院急诊外科，江苏苏卅I 21500fi；4．中国科学院武汉物理与数学研究所，湖北武汉430071)
摘要：目的研究大鼠脑缺血再灌注后梗死而积比的变化、T：加权像(nwI)以及渡谱变化，探讨灯盏细辛注射
液在啮缺血再灌注损伤中的作用，方法采用线栓法制作大鼠脑缺血再灌注不同时间点模型，观察灯盏细辛注射
液对脑缺血1．5h再灌注24、48、96h的TzwI和局域质子谱显示的一些代谢分子Ⅳ一己酰天门冬氨酸(NAA)、肌
酐(Cr)、胆碱(chc))的影响，取出脑组织进行红苯氨唑(TTC)染色测定脑梗死向积比。结果模型组缺血侧再灌
注84h显示出高信号强度区，与体外取出大脑进行的TTC染色相比，缺血位置大致相同。波谱检测显示在2,t11
NAA／Cr减小，Cho／Cr增大，96h这种趋势继续增大。灯盏细辛注射液治疗组NAA／Cr、Cho／Cr值与同时间点模
型组相比，均有所改善：TTC染色显示灯盏细辛治疗后减小了脑梗死面积比。结论灯盏细辛注射渡能对脑物质
代谢产生影响，减轻脑梗死，从而对脑缺血再灌注损伤起到·定程度的改善作用。
关键词：灯盏细辛注射液；缺血再灌注损伤；核磁共振；波谱
中图分粪号：R285．5 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2006)06—0898—01
EffectsofDengzhanXixinI jectiononchangesofbrainfarctionarearatio
andNMRspectraaftercerebralischemia—reperfusioninjury
LIUHual．LIAoWei—jin92，ZHOUHua3．WEILil
(1．DepartmentofR habilitationMed cine，SuzhouHealthTechnicalCol ege．Suzhou215002．Clfina；8．Department
ofRehabililationMed cine，SouthCenterHospital，WuhanUniversity，Wuhan430071．China；3．Department
ofEmergencySurgery，FirstAffiliatedHospitalofSuzhouUniversity，Suzhou215008，China；4．Wuhan
InstituteofPhysicsandMathmatics，ChineseAcad myofScience，Wuhan430071，China)
Keywords：DengzhanXixinInjection；ischemiareperfusionnjury；nuclearmagneticresonance
(NMR)；spectrum
缺血性脑损伤的病理生理机制是血液循环障
碍，造成细胞能量代谢衰竭，使细胞膜释放大量的谷
氨酸，启动损伤级联反应口]。核磁共振技术是非侵入
性的检查手段，可界定梗死部位、范围和水肿情况。
核磁共振成像对梗死区水分的变化非常敏感，可较
早确定梗死病灶⋯。灯盏细辛(灯盏花)是菊科植物
短葶飞蓬Erigeronbreviscapus(Vant．)Hand．一
Mazz．，主要成分为黄酮、灯盏甲素、灯盏乙素、挥发
油、氨基酸等。黄酮类药物已被证明能扩张脑微细动
脉，降低血黏度，改善微循环，防止脑缺血再灌注损
伤。近年来．很多学者在灯盏细辛对脯缺血再灌注后
细胞凋亡、水肿等的影响方面做了较多的研究o。。，
但灯盏细辛对脑缺血再灌注后梗死面积及波谱的影
响报道较少，动态检查灯盏细辛对代谢物水平的影
响，对了解病理过程具有重要意义。本实验通过波谱
技术初步探讨灯盏细辛注射液对大鼠脑缺血再灌注
损伤后物质代谢的影响，为进一步探讨灯盏细辛的
药动学、有效成分提供依据。
1材料
1．1药品及剂最确定：灯盏细辛注射液，云南生物
谷灯盏花药业有限公司生产，批号20021115，含总
黄酮4．5mg／mI．。章小兵等”1报道灯盏花素滴九40
mg／kg能明显减轻线栓法所致的局灶性脑缺血再
灌注损伤大鼠的神经功能障碍。I|{{i床上治疗短暂性
脑缺血发作、偏瘫患者，一般采用20mL灯盏细辛
注射液(用250n、I．生理盐水稀释)，静脉点滴。本实
验借用经验剂量，将20ml。灯盏细辛注射液用生理
盐水稀释到225ml。，含总黄酮0．4mg／mL，治疗大
鼠剂量为45mg／kg。
1．2实验动物：成年健康雄性Wistar大鼠，体霞
200～250g，购自武汉同济医学院实验动物中心。
2方法
收稿日期：2005—0928
基盘项目：删家自然科学基金项日(39970935和3027167I)；中国科学院武救物理。』数学研究所波谱’j原丁分丁物理国家重点实验富
开放项H资助(115221o)
作者简介：刘垡(1978)，戈，湖北武穴市人．项h2004午毕业r武救大学．发表文章10篇，主要研究^向为腑m管燕病的康复。
万方数据
中革鹊ChineseTraditionalandtlerbalDrt gs第37卷第6期2006年6月-899·
2．1 动物造模：参照ZeaLongaoo的线栓造模方
法，并进行部分改良_”]。各组动物术前进行浅度麻
醉。分离迷走神经，在距右颈总动脉(CCA)分叉处
近端结扎右颈总动脉。将尼龙线栓送入卉大脑中动
脉(MCA)起始部，遇阻力时停止，插入深度
(1．7±0．2)cm，造成右大脑中动脉血供(McAO)
阻断。缺血1．5h后，将线栓拔至CCA。造模时动物
的舡温维持在(37±0．5)C。假手术组线栓插入深
度为1cm，】．5h后拔至CCA。
2．2动物分组与处理方式：35只大鼠随机分为假
手术组、模型组和治疗组。假手术组5只动物，其他
每组再随机分为缺血再灌注24、48、96h3个时间
点进行观察，各个时间点5只动物。假手术组不做
任何处理。模型组(”一15)以生理盐水45mg／kg
ip给药。治疗组(”一15)ip灯盏细辛注射液45
mg／kg，后用相同剂量每天进行治疗。各组于术后
24、48、96h分批处死动物。
z．3 T：加权像(1’。w1)检测：T。wI检测方法见廖
维靖“”报道方法。动物深度麻醉后，头部固定．俯卧
在检查凹槽内。用黏胶带嗣定身体。所有测试均在
BrukerBiospec4．7／30核磁共振成像仪上完成。成
像方法采用多片多回波自旋回波脉冲序列．1次完
成7片成像，视场范围FOV为3CInx3cIn。片厚
0．8inm，2片之间的中心距离为1，6nlm。tR一2500
ms，tF一90，120ms。Xwin—NMRl．0版处理软件。
2．4 1H磁共振波谱(1H—MRS)检查：1HMRS检
测方法见廖维靖“。报道方法。扫描前自动匀场、压水
峰。序列选取点分辨自旋回波波谱(PRESS)采集波
谱．fR一1000nls．tE一136ms。采集的波谱对代谢物
如Ⅳ乙酰天门冬氨酸(Nacetylaspartate，
NAA)、肌酐(creatine．Cr)、胆碱(choline，Cho)
进行基线校正，将NAA峰定标在2．02×10_。。。计算
出各峰的积分面积。以cr峰作为标准．将各峰下面
积的积分值与之比较，得到NAA／Cr、Cho／Cr值。
2．5梗死面积比：采用红苯氮唑(TTC)染色。每
模型组
组大鼠去除嗅球、小脑、脑干和软脑膜，自前额极起
沿标尺切出5张冠状切片．每片厚约2．5mIil，取第
2片做常规HE染色，其余置2％TTC溶液‘pfl_
7．4)，37t、避光孵育30min．甲酵固定。
2．6统计方法：资料采用SAS8．1软件进行统计学
处理，所有数据以r±s表示，采用￡检验。
3结果
3．1 T。w1检测：假手术组大腩双侧对称，无结构
改变。缺血再灌注24h可见右脯顶叶、颞叶和外侧
尾壳核出现高信号强度区，与周围正常组织对比明
显，提示存在缺血损伤病灶。48、96h后大脑结构明
显不对称，右脑肿胀，可见梗死灶。(图1)
3．2 1H—MRS检查：NAA、Cr和Cho的化学位移
分别是202、3．0和3．2，呈正向峰。对照正常右大
脑，假于术组差异无旺著性。缺JI『L再灌注后2d、48、
96hNAA／Cr分别与假手术组比较，差异碌蔷
(P
模型组相比，差异盟著(P<0．05’；治疗组问比较无
明显改变，与假手术纽牛【1比只在96h时显示有差异。
Cho／Cr值在脑缺血再灌注后各叫问点与假手术组相
比，均有差异，其中在96h时差异更加显著，比值较
假予本纽有增加，模剞组之闯比较也无差异。灯盏细
辛治疗后，与模型组丰H比有差异(表1和图2)。
3．3 HE染色．：缺血坏死区域颜色苍白、组织疏松、
细胞密度明佩减少，灯盏细辛治疗后，组织水肿减
轻，间隙变窄。
3．4梗死面积比：TT(、染色后，来缺血侧被染成均
匀自勺红色，而缺血侧部分组织呈苍白色．与局围未缺
血区域界限清楚，其中坏死组织颜色更浅。本实验泱
m区域主要在大脑皮层。用眼科镊分离白色区和红
色区．分别称取质量，计算梗死面积比L梗死面积
比一白色区质量／(白色区质量+红色区匝量)]缺
血再灌注后24h即可见明品的梗死灶，48、96h后
这种趋势进一步扩大，与Z4h相比有差异，但48与
泊疗蛆
图I大鼠再灌注后24hT：WI像
Fig．1T2WIImageafter24hreperfusionofrats
慷手术组
万方数据
·900· 中革菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37器第6期2006年6月
0．892土0．213
1 350±0．341+
0．944士0．261“
0 892土0213
1．470土o362。
0．987士02786
与假手术组比较：’P
模型组 泊疗坦 假手术组
图2丈鼠再灌注后24h1H—MRS披谮
Fig2 1H—MRSSpectraafter24hreperfuslonofrats
96h比较无明显的差异。灯盏细辛治疗后发现梗死 水肿的程度。MRS检测是通过分析代谢物质的波谱
面积比明显减少，24h与模型组同时问点相比差异 的改变，了解神经组织代谢物质的量，以判断神经元
显著(P<0．05)；48与96h和模型组相比，差异非 的存活状况和功能。因此，MRI和MRS成为评价
常显著(P
面积比的变化“±s，n-5) 进行对比，发现梗死区域大致相似，但T：WI更加敏
Table2 ChangesofbrainfarctionarearatioafterDeng
zhanXixintreatmentincerebralischemia—
reperfusionrats(，±s，”一5)
与模型组24h比较：一P
’’P
at24h
4讨论
动态评价脑损伤程度的准确性是NMR技术最
显著的优点，其他仪器无法比拟。T。wI反映移动状
态的水，町敏感显示脑梗死o]。缺m后病灶脑组织水
肿，短时间内有大量的自由水聚集，使组织的弛豫时
间T。增加，在T。wI上呈现高信号强度区。缺血早
期膜离子泵功能障碍，钠离子和水分子移入细胞内。
进入细胞内的水，由于细胞膜和细胞器的限制，其分
子弥散活动受到限制，加上细胞间隙的游离水减少．
导致T。wI出现明显的高信号。高信号反映了细胞
感。从而可以通过T。wI的早期检查确定脑损伤的
程度，以免贻误病情。1HMRS对判断神经元的功能
很有帮助。1HMRS可以检测的物质约为20min，
每种物质的波谱都有特定的峰，根据其峰值大小可
判断该物质在体内的水平。NAA、Cho和Cr是最容
易检测的物质。NAA仅存在于神经组织，是神经元
代谢的标志物，其强度或积分值(水平)可灵敏地
反映神经元死亡和功能受损的状况，可视为神经町
塑性的标志物。cr是能量代谢分子，其值的大小反
映细胞的能量平衡。Cho是细胞膜脂的组成成分，反
映细胞膜的合成与髓鞘的降解。脑组织出现乳酸，提
示缺血、缺氧，有氧呼吸受到限制，能量代谢紊乱，无
氧酵解增加。
从TTC的染色结果和T。wI的图像显示灯盏
细辛注射液能减轻脑梗死面积比，提示灯盏细辛能
在脑缺血再灌注损伤过程中起一定的作用。很多学
者对灯盏细辛抗脑缺血和对脑缺血再灌注保护作用
做了相关研究。研究表明灯盏花注射液能明显延长
小鼠缺氧生存时间，明显延长小鼠因结扎迷走神经
的两侧颈总动脉造成急性脑缺血的生存时间，能减
轻大鼠实验性血栓的湿质量和干质量，显著降低大
_△i!i；+士士雌触∞i
0
l
0△；0iii上土+晏{记％i}．△i；11。^o士_I二：2；1；}，△阻*引i。。。土土士i勰∞}
忙
手型疗假模治
万方数据
中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第6期2006年6月·901·
鼠急性不完全性脑缺血脑组织含水量n]。研究还表
明灯盏花总黄酮和灯盏花醇提取物-g给药能明显
降低动物的卒中指数，减轻脑缺血再灌注损伤引起
的脑水肿和脑缺血所致的脑电图改变，促进再灌注
后脑电图电位幅度的恢复，减轻大脑皮质组织钙累
积及降低脑组织脂质水平。显示灯盏花总黄酮和灯
盏花醇提取物对脑缺血再灌注损伤均具有保护作
用“]。本实验结果表明灯盏细辛注射液治疗后脑组
织的代谢得到明显改善，治疗前后同时间点相比，差
异有显著性。其中缺血再灌注后显示NAA／Cr有减
小趋势，灯盏花治疗后对这种下降趋势有抑制作用；
Cho／Cr在脑缺血再灌注后逐渐增加，但组间并没
有差异，与假手术组比较有差异；灯盏细辛治疗组与
模型组比较有差异，提示灯盏细辛能改善脑代谢，作
用机制可能与灯盏细辛能抑制蛋白激酶C，从而减
少细胞钙离子内流“3；能抑制脂质过氧化“]；能减轻
脑缺血再灌注后的炎症反应”1等有关。
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葛根素对糖尿病小鼠胰岛素抵抗的影响
曹 莉2，顾振纶。3，茅彩萍3
(1．苏州大学医学院药理学教研室。江苏苏州215007；2．苏州大学药学院，江苏苏州215007
3．苏州中药研究所．江苏苏州215007)
摘要：目的观察葛根索对糖尿病小鼠胰岛素抵抗的作用。方法以链脲菌素(STZ)诱导糖尿病小鼠及以氢化
可的松琥珀酸钠(Hcss)诱导胰岛素抵抗小鼠模型．观察葛根素对正常、糖屎病及胰岛素抵抗模型小鼠血糖及血
清胰岛素水平的影响。结果葛根索对正常小鼠空腹血糖元明显影响。可明显降低STZ诱导的糖尿病小鼠的血糖
和衄清胰岛素水平，使胰岛素敏感性指数显著升高，对HCSS诱导的小鼠胰岛素抵抗也有明显的改善，且均呈一定
的剂量依赖性趋势。结论葛根素可显著改善实验性糖尿病小鼠的胰岛索抵抗。
关键词：葛根素；糖尿病；胰岛索抵抗
中圈分类号：R285．5 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2006)0609 104
EffectofpuerarinOil sulinresistanceindiabeticm e
CAnLi2，GUZhenlunl⋯，MAnCai—ping3
(1．DepartmentofPharmacology，MedicalCollegeofSuzhouUniversity，Suzhou215007·China；2．CollegeofPharmaceu
tiealSciences，MedicalCollegeofSuzhouUniversity，Suzhou215007·China；3SuzhouInstituteofChinese
MateriaMedica，MedicalCollegeofSuzhouUniversity，Suzhou2l5007，China)
鉴銎品首：馨譬景餐嚣会研究项目(HK2。02。819)；汀苏省中医药管理局谋题(H舱8)
作者简介：丧l：耄蠹嚣?磊{磊；茅。甏鼎全苎盘；罂老；蠹荸鉴烹中药药理学教学、研究5新药开发
万方数据
灯盏细辛注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤后梗死面积比和波
谱的影响
作者： 刘华， 廖维靖， 周华， 魏黎， LIU Hua， LIAO Wei-jing， ZHOU Hua， WEI Li
作者单位： 刘华,LIU Hua(苏州卫生职业技术学院,康复医学教研室,江苏,苏州,215002)， 廖维靖,LIAO
Wei-jing(武汉大学中南医院,康复医学科,湖北,武汉,430071)， 周华,ZHOU Hua(苏州大学
附属第一医院,急诊外科,江苏,苏州,215006)， 魏黎,WEI Li(中国科学院武汉物理与数学研
究所,湖北,武汉,430071)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2006,37(6)
被引用次数： 4次
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