全 文 ：中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第5期2005年5月·705·
HPLC—ELSD法测定穿心莲片中穿心莲内酯
韩光1’2，许笑笑1，杨松松2
(1．河南大学药学院，河南开封475001；2．辽宁中医学院，辽宁沈阳110032)
穿心莲片是穿心莲提取浸膏制得薄膜衣片，具
有清热解毒、凉血消肿之功效，临床用于感冒发热、
咽喉肿痛、口舌生疮等。其活性成分主要是以穿心莲
内酯为代表的二萜内酯类化合物及其葡萄糖衍生
物n’2]。穿心莲内酯的测定方法有分光光度法、薄层
扫描法、HPLC—UV法[3~5]等。本实验采用HPLC—
ELSD法测定穿心莲片中穿心莲内酯，结果表明该
法简便、精确，是一种检测穿心莲制剂中穿心莲内酯
的有效方法。
1仪器与试药
日本岛津LC--2010高效液相色谱仪、SEDEX
蒸发光散射检测器、CLASS—VP色谱工作站。
甲醇为色谱纯，水为二次蒸馏水，穿心莲内酯对
照品(中国药品生物制品检定所)，穿心莲片(广西嘉
进药业有限公司)。
2方法与结果
2．1色谱条件与系统适用性试验：色谱柱：Aglient
ZorbaxExtent—C18柱(250mmx4．6mm，5pm)；流。
动相：甲醇一水(60：40)；体积流量：1．0mL／min；柱
温：室温。理论塔板数以穿心莲内酯计不低于6000。
在此色谱条件下，色谱图见图1。
嗣
2 4 6 8 lO2 4 6 8 10
t／rrm
*一穿心莲内酯
*一andrographolide
图1 穿心莲内酯对照品(A)和穿心莲片(B)的HPLC图
Fig．1HPLCchromatogramsfandrograph0Iide
referencesubstance(A)andChuanxinlian
Tablet(B)
2．2对照品溶液的制备：精密称取穿心莲内酯对照
品10．75mg，置25mL量瓶中，加甲醇适量，超声使
溶解，加至刻度，即得。
收稿日期：2004—1卜09
2．3供试品溶液的制备：取穿心莲片20片，除去薄
膜衣，精密称定，研成细粉，精密称取0．309g，置于
50mL量瓶中，加甲醇适量，超声提取30min，并加
甲醇至刻度，摇匀，用0．22肛m微孔滤膜滤过，即得。
2．4标准曲线的建立：取穿心莲内酯对照品溶液，
分别进样8、10、12、14、16、18_“L。以峰面积自然对
数为横坐标，进样量的自然对数为纵坐标作标准曲
线，得回归方程Y一0．7023X一9．502，r一
0．9996。结果表明：穿心莲内酯在3．34～7．74pg
线性关系良好。
2．5稳定性试验：取穿心莲片供试品溶液，分别于
0、1、2、4、8、12、24h进样10肛L，测定，结果峰面积
的RSD为1．1％，表明溶液在24h内稳定。
2．6 精密度试验：取穿心莲内酯对照品溶液10
肚L，连续进样6次，记录峰面积，计算得其RSD为
0．9％。
2．7重现性试验：取同一批穿心莲片样品0．3g，5
份，制备供试品溶液，分别进样10pL，记录峰面积，
计算穿心莲内酯的质量分数，结果其RSD为
1．1％。
2．8 回收率试验：取含穿心莲内酯19．83mg／片的
穿心莲片(片重0．3g)细粉，精密称取约0．15g，分
别置于50mL量瓶中，各加人穿心莲内酯对照品10
mg，制备供试品溶液，进样10肛L，计算得平均回收
率为99．21％，RSD为1．1％(咒一3)。
2．9 样品测定：取样品，制备供试品溶液，进样10
tLL，记录色谱图峰面积，按回归方程计算，结果见表1。
表1穿心莲片中穿心莲内酯的测定结果(n一3)
Table1 AndrographolideinChuanxinlianTablet(一一3)
3讨论
ELSD检测器为质量型通用检测器，可用于检
测任何挥发性低于流动相的化合物，且化合物的响
(下转第796页)
万方数据
·796· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第5期2005年5月
雄黄、砒霜可抑制癌细胞核酸代谢，干扰DNA、RNA合成，
抑制蛋白质合成，阻止细胞的有丝分裂，从而使癌细胞的形
态和功能发生变化，杀伤癌细胞。另外，生半夏、生天南星、长
春花、蓖麻子、大戟、泽漆、全蝎、蜈蚣等也有明显的抑杀癌细
胞的作用。
3．2诱导凋亡：诱导肿瘤凋亡是近年来肿瘤治疗研究的一
个热点，也是治疗肿瘤的重要途径。去甲斑螯素对K。。：细胞
有较强的增殖抑制作用，24h后达到凋亡高峰。各浓度去甲
斑螯素作用24h后，G，期细胞百分数均减少，S期与G。+M
期细胞百分数增加，呈现G：+M期阻滞现象，且有明显的时
间和剂量效应[4]。砒霜可促进急性早幼粒细胞白血病(APC)
细胞株NB。细胞凋亡，表现为核碎裂，出现凋亡小体。雷公
藤红素可有效地诱导人肥大细胞白血病细胞素HMU一1细
胞凋亡，主要发生在细胞S期。细胞凋亡的发生与药物上调
促凋亡基因bax、c—MYC和下调抑凋亡基因bcI一2的表达有
关[5]。雄黄对HL一60、NB。、K562／ADM细胞均有促凋亡作用。
且作用的早期主要以细胞凋亡为主，临床用雄黄治疗慢性粒
细胞性白血病效果明显“’7]。
3．3诱导分化：是诱导癌细胞向正常细胞逆转的重要方法。
砒石能明显诱导HL一60细胞向粒细胞系统分化，使G。期细
胞比例明显增加，并通过诱导分化达到缓解白血病的目
的[8]。另外，巴豆、雄黄等也都有类似作用。
4合理应用
4．1炮制减毒：对毒性成分本身就是有效成分的中药，可根
据其所含成分的性质，选择适当炮制减毒方法。如马钱子所
含士的宁小剂量有兴奋脊髓作用，但毒性极大，成人口服
5～10mg就会中毒，炮制时用砂烫或油炸，破坏其中部分毒
性成分；巴豆是剧烈的泻下药，其巴豆油口服20滴可致人死
亡，炮制时通过压榨去油制霜，除去大量油质，以降低毒性、
缓和峻泻作用。对毒性成分与药效成分无关的中毒，应尽量
降低或除去毒性成分。如生川乌所含的乌头碱是毒性极强的
双酯型生物碱，经加热水解的炮制处理，生成了几乎无毒性
的生物碱乌头胺；附子的炮制是用卤水或矾水长时间泡漂，
使有毒成分乌头碱溶于水除去。
4．2配伍减毒：临床应用有毒药物时，可通过适当配伍减轻
或消除其毒性或副作用。如张仲景在运用附子时，多与于姜、
甘草、生姜等配伍。现代研究证明，干姜、甘草均可影响附子
生物碱而大大降低其毒性。有学者对乌头配甘草的水煎液进
行了定量、定性分析，结果显示，乌头配甘草同煎较乌头单
煎，其乌头碱的溶出率降低22％，初步说明甘草解乌头毒，
可能是由于降低了乌头中乌头碱的溶出率。临床研究证实，
复方马钱子汤中对马钱子起减毒作用的主要成分是甘草；全
蝎配玄明粉内服，可促进全蝎毒素的排出，以降低毒性。另
外，严格控制有毒中药的用药剂量、疗程，也是合理应用有毒
中药的重要措施。一般应用有毒中药应从小剂量开始，在仔
细观察中逐渐增加剂量，不要超过极量；疗程应中病即止，以
免造成累积性中毒。
5结语
有毒中药既能致毒也能抗癌。只要能合理应用，就能趋
利避害，使有毒中药在癌症的治疗中发挥重要作用。
References：
[1]LiXG，NanXY，DangJG，eta1．Experimentres archof
theffectsofBruceafruitoilintravenousmulsiononkidney
cancer[J]．JClinUrol(临床泌尿外科杂志)，1998，13(2)：
82．
[2]LiuxD，SuiZY．Influencesofcrotonalkaloidoncancerc ll
plasmamembranefluidnessandcytoplasmicmatrixstructure
made[J]．JShandongC ilTraditChin』Vled(山东中医学院
学报)，1995，19(3)：192．
[3]XuJY，YangJ，LiLz，eta1．Experimentres archonanti
turneractivityofTriperygiumwilfordiiLJJ．ChinJI ter—
gratedTraditChinWestMed(中国中西医结合杂志)，1992，
12(3)：161．
r4]ChenJX，LinXL，LiuY，eta1．Influenceofnorcantharidin
onapoptosisfK562[J]．ChinaJTraditChinMedPharm
(中国医药学报)，2000，15(2)：21．
[5]BaoYX，YuRQ，ZhangDH，eta1．Invitrostudyoncellu—
larandmolecularmechanismoftripterinetreatingleukemic
mastcells[J]．ChinJHaematol(中华血液学杂志)，1999，
20(3．)：146148．
[6]ZhangC，HuangSL，LuBF，eta1．Realgarinducesapopto—
sisinK56zcells[J]．ChinBasicMedTraditChinMed(中国
中医基础医学杂志)，1999，165(3)：30—31．
[7]ZhangC，HuangSL，ZouLJ，eta1．Realgarinducesapop—
tosisofK56z／ADMcells[J]．JDalianMedUniv(大连医科
大学学报)，1999，21(1)：11—12．
[8]TaoRF，ZengHL，KongAN，eta1．Clinicalobservation
ofthetreatmentbyusingarsenictrioxidencuringonrecur—
reneeacutepromyelocyticleukemia[J]．diangsuMedPharm
J(江苏医药)，1998，24(4)：234．
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(上接第705页)
应值接近，因而峰面积比和各组分的质量比极其接
近，同时灵敏度和稳定性亦能符合测定的要求，是一
应用广泛的新型检测器。
本实验以HPLC—ELSD法用于测定穿心莲片
中穿心莲内酯，准确、可靠，为穿心莲药材及制剂中
穿心莲内酯的测定提供了参考方法。
References：
[1]JiangsuNewMedicalCo lege．DictionaryofChi eseMateria
Medica(中药大辞典)[M]．Shanghai：ShanghaiScientific
andTechniealPub ishers，1986．
E2]MadarS，TripathiH，TandanC，ela1．Antipyreticandantial—
cerogeniceffectsofandrographolide[J]．IndianJPharmSci，
1995，57(3)：121—125．
[3]WangH，ZhangxD，GuoXF．Studiesonqualitys anderdof
AndrographispaniculataherbsandChuanxinlianTa bets[J]．
NorthwestPharmJ(西北药学杂志)，2002，17(2)：63—64．
[4]WuFH，LiGX，LiangHM，eta1．Determinationofandr —
grapholidean14一deoxy—11．12一didehydroan—drogra—pholide
inCompoundChuanxinlianTabletsbyHPLC口]．Northwest
PharmJ(华西药学杂志)，2004，19(2)：133—135．
[5]DongHR，LuJ．Determinationof ndrographolldesinAndr俨
graphispaniculataherbsndXiaoyanlidanTablets口]．Chin
TraditPatMed(中成药)，1999，21(1)：11—13．
万方数据
HPLC-ELSD法测定穿心莲片中穿心莲内酯
作者： 韩光， 许笑笑， 杨松松
作者单位： 韩光(河南大学药学院,河南,开封,475001;辽宁中医学院,辽宁,沈阳,110032)， 许笑笑(河
南大学药学院,河南,开封,475001)， 杨松松(辽宁中医学院,辽宁,沈阳,110032)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(5)
被引用次数： 4次

参考文献(5条)
1.Jiangsu New Medical College 中药大辞典 1986
2.Madar S;Tripathi H;Tandan C Antipyretic and antialcerogenic effects of andrographolide 1995(03)
3.Wang H;Zhang X D;Guo X F Studies on quality standerd of Andrographis paniculata herbs and
Chuanxinlian Talbets[期刊论文]-西北药学杂志 2002(02)
4.Wu F H;Li G X;Liang H M Determination of andrographolide and 14-deoxy-11,12-didehydroan- drogra-
pholide in Compound Chuanxinlian Tablets by HPLC[期刊论文]-华西药学杂志 2004(02)
5.Dong H R;LuJ Determination of andrographolides in Andrographis paniculata herbs and Xiaoyanlidan
Tablets 1999(01)

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