全 文 ：·386· 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第3期2007年3月
高效液相色谱一蒸发光散射测定积雪苷霜软膏中
羟基积雪草苷和积雪草苷
张锐，彭杨锐
(江西省药物研究所，江西南昌 330029)
积雪草为伞形科积雪草Centellaasi tica(L．)
Urban的全草，含有积雪草苷、羟基积雪草苷等多种三
萜类化合物，具有清热利湿、解毒消肿之功效。积雪苷
霜软膏其主药为积雪草总苷，具有促进创面愈合的作
用。现行标准中仅有理化及薄层鉴别，没有建立定量测
定的方法。文献报道采用液相色谱一紫外检测法口]、毛
细管区带电泳技术[23和柱前衍生技术一紫外检测法啪分
析羟基积雪草苷和积雪草苷。蒸发光散射检测器
(evaporativelightsatteringdetector，ELSD)作为
新一代的通用型检测器，具有灵敏度高、不受溶剂紫外
吸收的影响等优点。因此本研究采用HPLC—ELSD法
测定了积雪苷霜软膏中羟基积雪草苷和积雪草苷，建
立了积雪苷霜软膏的定量测定方法。
1仪器与试药
’日本岛津LC一10AT高压泵，AlltechELSD
500蒸发光散射检测器，色谱工作软件为Sepu
3000，MellterM3型百万分之一电子天平，Mellter
AE100型万分之一电子天平。
羟基积雪草苷对照品和积雪草苷对照品(自制，
按面积归一化法测定其质量分数大于98％)；甲醇
为色谱纯，水为自制高纯水，其他试剂均为分析纯；
积雪苷霜软膏(上海现代浦东药厂有限公司)、阴性
样品(缺积雪草总苷的软膏基质)(自制)。
2方法与结果 ．
2．1 HPLC—ELSD分析条件：色谱柱为Kromasil
柱(250mm×4．6mm，5pm)，流动相为甲醇一水
(65l 35)，体积流量为1mL／min，ELSD检测器漂
移管温度为87℃，气体体积流量为2．2SLPM。在
此条件下，样品中的羟基积雪草苷和积雪草苷可达
到良好的分离，色谱图见图1。
C
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t／113in
图1 羟基积置草苷对照品(A)、积冒草苷对照晶(B)，阴性样品(C)和积譬苷霜软膏供试品(D)的HPLC图谱
Fig．1HPLCChromatogramsfhydroxyasiaticosidereferencesubstances(A)。asiaticoside
referencesubstances(B)，negativesample(C)，andJlx eganShuangCream(D)
2．2对照品溶液的制备：分别精密称取羟基积雪草 供试品溶液的制备方法同法制备。
苷对照品1．335mg和积雪草苷对照品1．082mg 2．5标准曲线的制备：分别精密量取羟基积雪草苷
置1mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀， 和积雪草苷对照品溶液1．0、2．5、5．0，7．5、10．0、
即得。 15．0弘L注人液相色谱仪中，记录峰面积。以进样量
2．3供试品溶液的制备：取积雪苷霜软膏0．1g，精
密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇10mL，密
塞，称定质量，置水浴中加热，小心振摇使溶解，冷却
至室温，再称定质量，用甲醇补足减失的质量，摇匀，
经0．45弘m微孔滤膜滤过，即得。
2．4阴性供试品溶液的制备：取阴性样品0．1g，按
对数值为横坐标，峰面积的对数值为纵坐标，进行线
性回归分析，得羟基积雪草苷的回归方程为Y=
0．9718X+5．228，r=0．9997；积雪草苷的回归方
程为Y=0．9817X+5．221，r=0．9999。表明羟基积
雪草苷进样量在1．335--一20．03Yg线性关系良好。积
雪草苷进样量在1．082--一16．23弘g线性关系良好。
收稿日期：2006—06-01
作者简介：张锐(1976一)，男，江西进贤人，助理研究员，硕士，研究方向为中药化学成分及质量评价．
Tell(0791)8102554E—mail：work037@sohu．corn
纛2
万方数据
中草焉ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第3期2007年3月·387·
2．6精密度试验：取积雪苷霜软膏供试品溶液10
弘L，连续进样6次，测定各峰面积，计算得羟基积雪
草苷和积雪草苷的RSD分别为1．1％和1．7％。
2．7稳定性试验：取积雪苷霜软膏供试品溶液，分别
于0、1、2、4、8、12h进样，测定峰面积，计算RSD，结
果羟基积雪草苷和积雪草苷的RSD分别为0．77％
和1．3％。结果表明供试品溶液在12h内稳定。
2。8重现性试验：取同一样品，精密称取6份，制备
供试品溶液，进样测定，计算得羟基积雪草苷和积雪
草苷平均质量分数分别为14．28、4．312mg／g，
RSD分别为2．4％和2．6％。
2．9 回收率试验：取积雪苷霜软膏样品(批号
031001)约0．05g，共6份，精密称定，加入10mL
混合对照品溶液(含羟基积雪草苷和积雪草苷分别
为0．792、0．204rag)，制备供试品溶液，进样测定，
计算得羟基积雪草苷和积雪草苷的平均回收率分别
为98．25％和98．91％，RSD分别为2．4％和2．o％。
2．10样品测定：对3批样品每批取样3个，制备供试
品溶液，进行测定，采用外标二点法计算。结果见表1。
裹1积冒苷霜软膏中羟基积雪草苷和积冒草苷的
测定结果(露=3)
Table1 Determinationofhydroxyasiaticosideandasia—
ticosideinJixueganShuangCream(万一3)
3讨论
本实验选择蒸发光散射检测器作为检测手段对
羟基积雪草苷和积雪草苷进行分析，可以克服羟基
积雪草苷和积雪草苷在紫外末端检测时样品溶剂带
来的溶剂峰的干扰，提高检测的专属性。由于积雪草
总苷中含有的强保留成分，持续进样后基线会发生
波动，干扰测定，因此如使用紫外检测法必须采用梯
度洗脱CI]，以清除杂质干扰。采用本法可克服以上不
足，缩短分析时间，简化分析操作。
蒸发光散射检测器受温度尤其是气体体积流量
等参数的影响较大，色谱条件优选过程中，根据流动
相的种类和比例，通过观察在不同漂移管温度和不
同载气流速时色谱峰的信号强度，再结合基线的情
况，最终确定本实验中蒸发光散射检测器的参数。在
样品测定过程中，只要严格控制气体体积流量和保
证气体的纯净度，每次采用外标两点法进行标准曲
线的校正，其测定结果可以达到很好的重现。
Referencesl
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ChinMaterMed(基层中药杂志)，2000，14(6)l7-8．
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asiaticosideinformulaparticlesofCentellaasiaticaby
capillaryzoneehctrophoresis[J]．AcadJSecMilMedUniv
(第二军医大学学报)．2004，25(7)l796—797．
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methodforthedeterminationofasiaticosideinCentell
aaslaticaandSanjinpian[J]．ActaPharmSin(药学学报)，
2000。35(8)：605—608，
●
HPLC法测定温肾咳喘片中欧前胡素、蛇床子素、和厚朴酚、
厚朴酚和甘草酸
于叶玲，崔久峰，唐星
(沈阳药科大学药学院，辽宁沈阳110016)
温肾咳喘片由蛇床子、厚朴和甘草组成，具有解
痉、平喘、止咳祛痰之功效，主治咳嗽痰多、痰湿内
阻、肺气壅滞、胸闷咳喘等症。蛇床子素和欧前胡素
是蛇床子中香豆素类成分的代表性成分，和厚朴酚、
厚朴酚为厚朴中主要有效成分，甘草酸为甘草中的
指标成分。本实验建立了HPLC法同时测定温肾咳
喘片中主要药效成分欧前胡素、蛇床子素、和厚朴
酚、厚朴酚和甘草酸的方法。
1仪器与试剂
HitachiD一7000高效液相色谱仪，D一7000
HSM色谱工作站。欧前胡素对照品自制，经HPLC
检查质量分数达98％以上，蛇床子素(批号0737—
200108)、和厚朴酚(批号0730—9204)、厚朴酚(批号
0729—200006)对照品由中国药品生物制品检定所提
收穑日期：2006—03—05
作者简介；于叶玲(1976一)，女，江苏泗阳人，在读药剂学博士。Tel：(024)23986343Fax：(024)23911736
万方数据
高效液相色谱-蒸发光散射测定积雪苷霜软膏中羟基积雪草苷
和积雪草苷
作者： 张锐， 彭杨锐
作者单位： 江西省药物研究所,江西,南昌,330029
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2007,38(3)
被引用次数： 3次

参考文献(3条)
1.Zeng J G;Song Y F;Xu X Determination of the triterpenes constituents in Centella asiatica L.by
HPLC 2000(06)
2.Gu L;Huang S;Lou Z X Determination of asiaticoside in formula particles of Centella asiatica by
capillary zone electrophoresis[期刊论文]-第二军医大学学报 2004(07)
3.Xiao J;Che Z T;Bi K S Pre-column derivatiation HPLC method for the determination of asiaticoside
in Centell aaslatica and Sanjinpian[期刊论文]-药学学报 2000(08)

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2. 张锐.彭杨锐.Zhang Rui.Peng Yang-rui 积雪苷霜软膏质量标准研究[期刊论文]-中国药品标准2007,8(5)
3. 郑承剑.秦路平.Cheng-jian ZHENG.Lu-ping QIN 积雪草化学成分和生物活性的研究[期刊论文]-中西医结合学
报2007,5(3)
4. 秦路平.陈瑶.郑汉臣 积雪草的品质评价和抗抑郁作用研究[会议论文]-2004
5. 张蕾磊 积雪草化学成分及其活性的研究[学位论文]2004

引证文献(3条)
1.邵燕.陈云艳.黄文武.孔德云 积雪草总苷及其制剂的含量研究.Ⅰ.积雪苷霜软膏中积雪草苷和羟基积雪草苷的
HPLC法测定[期刊论文]-中国医药工业杂志 2010(3)
2.郏征伟.毛秀红.陈钶.王柯.季申 手性流动相添加剂法测定积雪草中积雪草总苷的量及其总苷特征图谱[期刊论文
]-中草药 2010(12)
3.薛纯盛.于慧娜.赵佳丽 积雪苷霜软膏质量标准研究[期刊论文]-中国药事 2011(9)


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