全 文 ：·222· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第2期2005年2月
回收率。结果平均回收率为99．79％，RSD为
1．96％(咒一5)。
2．10样品的测定：取淫羊藿苷对照品溶液(0．06
mg／mL)、供试品溶液各10pL，进样，测定色谱峰面
积，以外标法计算，色谱图见图1，结果见表1。
表1 复方益肾颗粒中淫羊藿苷的含量(席一3)
Table1 DeterminationoficariinnCompound
YisbenGranula(月一3)
3讨论
本实验采用HPLC法能达到有效分离各组份
的目的，且阴性对照试验证明在淫羊藿苷色谱峰处
其他成分无干扰。本法具有灵敏度高、操作简单、分
0 5 10 15 200 5 10 15 200 5 10 15 20
时间l／min
*一淫羊藿苷
*一icariin
图1淫羊藿苷对照品(A)、复方益肾颗粒
(B)和阴性对照(c)的HPLC图谱
Fig．1 HPLCchromatogramsoficariinreference
substance(A)，CompoundYishenGranula
(B)，andnegativesample(C)
离效果好等优点，可作为复方益肾颗粒的含量测定
质量控制标准。
薄层扫描法测定紫龙金片中黄芪甲苷的含量
郭景强1，牛瑞杰2，黄桂芬2
(1．天津市药品检验所，天津300070；2．天津隆顺榕制药厂，天津300232)
紫龙金片为国家药品监督管理局于2001年批
准生产的三类抗癌中药，具有益气养血、理气化瘀之
功效。适应于原发性肺癌气血两虚证或兼有瘀热的
化疗患者，能够显著改善生活质量，提高免疫功能，
减轻化疗引起的白细胞下降和肝肾毒副反应之功
效。紫龙金片由黄芪、丹参、龙葵、郁金等药物组成。
方中君药黄芪益气养血、脱毒，主要含有黄芪皂苷、
异黄芪皂苷和大豆皂苷等皂苷类成分及多糖类成
分、黄酮类成分、氨基酸和无机盐等。在黄芪有效成
分的含量研究方面，主要是对其中所含黄芪甲苷进
行测定，其中以黄芪甲苷的薄层色谱法测定较为成
熟，故本实验对该制剂中的黄芪甲苷含量采用薄层
色谱法测定。
1仪器与材料
岛津CS一9301薄层扫描仪，高效薄层板(烟台
化工研究所)，试剂均为分析纯，紫龙金片由天津中
新药业集团股份有限公司隆顺榕制药厂(原天津中
药制药厂提供，批号：0302016，黄芪甲苷对照品(中
国药品生物制品检定所，批号：781—9001，供含量测
定用)。
2方法与结果
2．1对照品溶液的制备：精密称取黄芪甲苷对照品
适量，用甲醇溶解，配制成0．4mg／mL的溶液，作为
对照品溶液。
2．2供试品溶液的制备：取本品20片，去除薄膜包
衣，称定质量，研匀，精密称取4g，置索氏提取器中，
加甲醇适量浸泡过夜，加热回流提取至无色，回收甲
醇至干，加15mL水使溶解，用醋酸乙酯提取2次
(20mLx2)，弃去醋酸乙酯层，水层再用水饱和正
丁醇提取3次(20mL×3)，合并正丁醇液，用氨试
液洗涤3次(20mL×3)，弃去氨试液，正丁醇液蒸
干，加甲醇使溶解，转溶于2mL量瓶中，加甲醇至
刻度，摇匀，作为供试品溶液。
2．3阴性供试品溶液的制备：除黄芪外，按本方工
艺制备样品，照供试品溶液制备方法进行处理，制得
阴性供试品溶液。
2．4测定方法：照薄层扫描法(《中华人民共和国药
典))2000年版一部附录VIB)实验，分别吸取黄芪甲
苷对照品溶液4、6弘L，供试品溶液4弘L，阴性供试
品溶液10肛L，分别点于同一硅胶G高效薄层板上，
收稿日期：2004—08—20
作者简介：郭景强(1965一)，男，毕业于西北大学药用植物专业，从事药品检验工作。Tel：(022)23374076
c一妊
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第2期2005年2月·223·
以氯仿一甲醇一水(7：3．5：0．4)为展开剂，展开，取
出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，于105℃烘5
min，取出，在薄层板上覆盖同板大小的玻璃板，周
围用胶布固定，扫描。测定供试品的吸光度积分值与
对照品吸光度积分值，按外标二点法计算即得。
2．5方法学考察
2．5．1 线性关系的考察：用定量毛细管精密吸取黄
芪甲苷对照品溶液(0．458mg／mL)1、2、3、4、5、6
弘L，分别点于同一硅胶G薄层板上，展开，晾干后，
经显色进行扫描测定。以点样量为横坐标，斑点的吸
光度积分值为纵坐标，进行回归处理，得回归方程
Y一1167．938+27044．445X，r一0．9988，线性范
围0．458～2．748Fg。
2．5．2重现性试验：取同批样品，去除薄膜衣，研细
后，精密称取5份各4g，按供试品溶液的制备方法
处理后，进行扫描，黄芪甲苷平均质量分数为0．160
rag／片，RSD一2．410Vo。
2．5．3稳定性试验：以供试品溶液点样，展开，显色
后每隔25min测定斑点吸光度积分值，RSD为
1．98％。结果表明，黄芪甲苷在2h内基本稳定。
2．5．4同板精密度试验：分别吸取等量供试品溶液
5份，点于同一硅胶G板上，测定斑点吸光度积分
值，RSD一2．48％。
2．5．5异板精密度试验：分别吸取等量供试品溶液
5份，对照品溶液4、6pL，分别点于5块硅胶G薄
层板上，测定斑点吸光度积分值，计算样品中黄芪甲
苷的质量分数，RSD=4．69％。
2．5．6回收率试验：精密称取黄芪甲苷0．160rag／
片的样品5份各1．7g，分别加入黄芪甲苷对照品溶
液(o．458mg／mL)各1mL，按供试品溶液制备方法
操作，测定，结果平均回收率为96．113％，RSD一
1．910％。
2．6样品测定：取3批样品，按供试品溶液的制备
方法制备溶液，按上述测定方法测定吸光度积分值，
两点法计算样品中黄芪甲苷的质量分数，分别为
0．125、0．129、0．130rag／片。
3讨论
3．1供试品处理方法的研究：①采用正丁醇萃取后
甲醇定容、点样，杂质背景深；②正丁醇萃取，D一101
树脂洗脱，蒸干，定容，点样，柱上有残留；③氯仿萃
取，正丁醇萃取，蒸干，定容，点样，杂质背景较深；④
醋酸乙酯萃取，正丁醇萃取，氨水洗脱，蒸干，定容，
点样，效果较为理想。
3．2 薄层板的选择：采用普遍高效硅胶G薄层板，因
与其显色剂(10％硫酸乙醇)反应加热后板面变黑而影
响扫描；改用手铺板(以水为黏合剂)，板面虽不与显色
剂反应，但因板面太软，点样难度加大，误差大。
3．3展开剂的选择：先后采用氯仿一醋酸乙酯一甲醇一
水(15：40：22：10)下层液，氯仿一甲醇一水(13：7：
2)下层液为展开剂，经多次试验，发现主斑点的Rf值
受展开剂中甲醇和水比例的影响较大，因此将水完全
溶解在氯仿一甲醇之中，展开效果甚为理想。
(上接第191页)
较高场外出现一对(，一10．8Hz)双峰，这是C。上有
平伏亚甲基质子的特征信号口]。另”C—NMR谱中出
现艿14．20的C一24信号，而非323．0左右的C一23信
号，证明了C一23有羟基取代。故而化合物VI确定为
20【，3a，23一三羟基一乌苏一12一烯一28一酸。
化合物Ⅶ：白色粉末，mp263～265℃，EI—MS
给出的分子离子峰m／z：488EM]+。化合物Ⅶ的
1H—NMR中C。上羟基的同碳质子的二重峰的共振
信号83．55(d，，一10．2Hz)提示在C。上也有羟基
存在，而且C。和C。二质子之间为a—a或e—e偶合，
即2a—H和3p—H或213一H和30c—H。”C—NMR谱中的
连羟基碳化学位移值：368．58(CH)，885．65(CH)，
365．63(CH。)是这类化合物A环上处于2a，38和23
位羟基取代后的连氧碳的化学位移值[6]，故化合物
Ⅶ确定为20c，3B，24一三羟基一12一烯～28一乌苏酸。
4讨论
对化合物噩～Ⅶ进行了体外抗肿瘤试验，结果
表明，化合物Ⅲ～Ⅶ均有不同程度的细胞毒活性(所
用细胞株：Bel一7402、HO一8910、HL一60)，化合物V的
细胞毒活性最强，化合物Ⅵ的细胞毒活性同化合物
Ⅶ，但高于化合物Ⅲ和Ⅳ。以上实验说明，总序香茶
菜有广泛的开发利用前景。
References：
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万方数据
薄层扫描法测定紫龙金片中黄芪甲苷的含量
作者： 郭景强， 牛瑞杰， 黄桂芬
作者单位： 郭景强(天津市药品检验所,天津,300070)， 牛瑞杰,黄桂芬(天津隆顺榕制药厂,天津
,300232)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(2)
被引用次数： 4次

引证文献(4条)
1.张丽.佟巍.龚海英.李灵芝 双波长薄层色谱扫描法测定复方黄芪胶囊中黄芪甲苷的含量[期刊论文]-武警医学院
学报 2008(6)
2.康阿龙.张苏蘅.孙成荣.郭涛.李书桐.孔令媛 妇康颗粒的质量控制[期刊论文]-医药导报 2008(1)
3.梁文.潘海峰.王迎寒.张晓峰 正交试验法优选健脾化湿颗粒的提取工艺[期刊论文]-中国医药导刊 2010(4)
4.陈智 刺五加黄芪凝胶的制备工艺及临床前研究[学位论文]博士 2006


本文链接：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200502028.aspx