全 文 ：中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第3期2005年3月。413‘
大补阴丸对空肠弯曲杆菌致敏小鼠的免疫调节作用
张雷明1，董群2，赵向忠2
(1．烟台大学药学院，山东烟台 264005；2．皖南医学院微生物与免疫学教研室，安徽芜湖241001)
近年临床报道中医滋补肾阴的经典名方大补阴
丸，在治疗系统性红斑狼疮‘1|、糖尿病嘲等自身免疫
疾病方面疗效肯定，且无雷公藤等药物的不良反应。
肝炎也是一种自身免疫性疾病，大补阴丸对肝炎的
作用至今尚无临床报道。本实验通过病理切片、细胞
培养、酶联免疫吸附实验等技术观察了大补阴丸水
提物对空肠弯曲杆菌CJ—SⅢ致敏小鼠的免疫调节
作用，为大补阴丸在治疗肝炎等自身免疫疾病方面
的应用提供理论依据。
1材料
1．1动物：ICR小鼠，雌性，体重18～22g，南京医
科大学动物中心提供，合格证号：苏动字97001号。
1．2 CJ—Sm菌株：上海疾病预防与控制中心提供。
1．3试剂与仪器：弗氏完全佐剂(FCA)、脂多糖
(LPS)、四甲基偶氮唑盐(MTT)、刀豆蛋白
(ConA)，Sigma公司提供；羊抗小鼠酶标抗体，华美
生物公司提供；1640培养基，日本制药株式会社提
供；小牛血清，Hyclone公司提供。DG--3022A型酶
标仪，华东电子管厂。
2 方法
2．1大补阴丸水提物制备：首先将黄柏、知母、熟地
黄、龟板分别磨成粗粉，按方剂中比例(2：2：3：
3)混合，加等量蒸馏水超声(20kHz)处理30min，
进一步破坏细胞，水煎2次，第1次加水12倍量，第
2次加水5～8倍量，趁热滤过，合并滤液，浓缩至含
生药0．5g／mL。
2．2致敏小鼠模型制备：参考文献方法[3]，将小鼠
随机分为4组，每组10只，分别为正常组、模型组、
地塞米松组、大补阴丸组。取CJ—SⅢ混悬液和等量
FCA混匀，完全乳化，除正常组外的各组小鼠左后
足跖SC乳化的CJ—SⅢ50弘L；正常组左后足跖SC
生理盐水50弘L。初次免疫后14d，尾iv加强免疫1
次。小鼠于免疫后第28天进行肝、肾组织病理学观
察和免疫功能检测。
2．3给药方法：小鼠造模14d后，大补阴丸组每天
ig大补阴丸9g／kg(相当于成人每天用药量)；地塞
米松组每天ig地塞米松0．75mg／kg；正常组、模型
组ig等量生理盐水。连续14d。
2．4组织病理学检查：取新鲜组织块固定、脱水，石
蜡包埋，常规切片，HE染色。
2．5脾脏T、B淋巴细胞增殖反应检测：参考文献
方法‘3|，采用MTT法，实验孑L分别加入ConA(终
质量浓度4ptg／mL)和LPS(终质量浓度6弘g／
mL)，对照孔以培养液代替，在酶标仪570nm处测
定吸光度(A)值。
2．6血清自身抗体测定：参考文献方法[4]，用酶联
免疫吸附实验测定小鼠血清中抗ds—DNA、SS—DNA
抗体，在酶标仪490nm处测定A值。
2．7数据统计：数据以z±S表示，用方差分析和q
检验进行显著性检验。
3结果
3．1病理学检查：常规染色，发现与正常组比较，模
型组病理变化最为明显。肝脏细胞明显肿胀变性，门
静脉周围有明显的炎性细胞堆积，肝细胞问有散在
的炎性细胞浸润，可见灶性凝固性坏死。而地塞米松
组和大补阴丸组仅在组织内有少量散在的炎性细胞
浸润；各组肾脏均未见明显病理改变。
3．2 T、B淋巴细胞活性：结果见表1。模型组T、B
淋巴细胞活性明显高于正常对照组(P<0．01)，地
塞米松组和大补阴丸组T、B淋巴细胞活性较模型
组明显降低(P
模型组血清中抗ds—DNA、SS—DNA抗体水平明显
高于正常组(P
模型组(P<0．01)。
4讨论
收稿日期：2004—07—09
基金项目：安徽省教育厅自然科学基金资助项目(2002kj301)
作者简介：张雷明(1976一)，男，助教，硕士。Tel：(0535)6706030—8022Email：zlm21st@sina．corn
万方数据
·414· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第3期2005年3月
表1 大补阴丸对CJ—S。致敏小鼠T、B淋巴细胞活性及血清中抗ds—DNA、ss—DNA抗体水平的影响(；±s，一一10)
Table1 EffectofDabuyinPillonT，Biymphocytesactivitiesands—DNA，ss—DNAantibodylevels
inserumofCJ—S13lsensitizedmice(；士s，n=10)
与正常组比较：+P<0．05一P<0．01；与模型组比较：△△P<0．01
。P<0．05。’P<0．01vsnormalgroup：△△P
甲亢、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、肝炎等，目
前尚无满意的治疗药物，因此研究和开发低毒高效
控制自身免疫性疾病的新药是国际发展趋势。大补
阴丸是中医滋补肾阴的经典名方，临床上发现用其
治疗某些自身免疫疾病疗效肯定，但目前相关实验
研究较少，在肝炎的治疗研究中也未见相关报道。
本实验结果表明，大补阴丸可明显减轻CJ—SⅢ
致敏小鼠肝脏自身免疫性炎症反应，而且可降低血
清中抗ds—DNA、SS—DNA抗体水平。表明大补阴丸
对CJ—SⅢ所致自身免疫反应有改善作用。此外，大
补阴丸对CJ—Sm致敏小鼠异常亢进的脾细胞增殖
反应具有明显的调节作用，提示大补阴丸对CJ—Sm
致敏小鼠自身免疫性病理变化的改善作用与其纠正
整体免疫功能失调有关。而且和地塞米松组相比也
有其特点，其T、B淋巴细胞活性接近正常水平
(P>0．05)，而地塞米松组T、B淋巴细胞活性降至
正常以下(P<0．05)。提示中药大补阴丸的免疫抑
制作用较缓和。
本实验初步揭示了大补阴丸对自身免疫疾病的
免疫调节作用，由于只设了一个成人常用剂量组，所
以可在此基础上加设大、小两个剂量，以便摸索出一
个最佳剂量。并且可以继续追踪分离具有改善CJ—
Sm致敏小鼠免疫功能状态的大补阴丸中的活性组
分，并以肝炎小鼠为模型进行进一步研究，从而为大
补阴丸治疗肝炎等自身免疫性疾病打下基础。
References：
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munol(中国实验临床免疫学杂志)，1999，11(2)：21-24．
山楂叶抽提物对人脐静脉内皮细胞中过氧化氢的清除作用
兰文军，郑筱祥+
(浙江大学生物医学工程与仪器科学学院，浙江杭州 310027)
H。O：可引发细胞膜中的不饱和脂肪酸脂质发
生过氧化反应、破坏细胞膜；还能诱发细胞凋亡
(apoptosis)，促使DNA链断裂，从而损伤细胞，参
与多种病理机制。Chatterjee等[13报道，山楂的叶和
花的总抽提物WSl442有抗氧化作用。本实验研究
了富含黄酮的山楂叶抽提物对人脐静脉内皮细胞
(humanumbilicusveinendothelialcel ，HUVEC)
中H：O：的清除作用，以探讨此抽提物抗氧化作用。
1材料
流式细胞仪(FACSort，BD，美国)；微板读取
仪(Microplatereader550，Bio—Rad，美国)；紫外
分光光度计(GeneQuantPro，AmershamPhar a—
cia，英国)；PI染料(Caltag，美国)；H：O：试剂盒和
谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—Px)试剂盒购自南京
收稿日期：2004—06—07
作者简介：兰文军(1971～)，男，江苏泰州人，博士研究生，研究方向为肿瘤和心血管药物(中药)的体外筛选与评价。
Tel：(0571)87932962E—mail：lanwenjun0522@hotmail．com
*通讯作者
万方数据
大补阴丸对空肠弯曲杆菌致敏小鼠的免疫调节作用
作者： 张雷明， 董群， 赵向忠
作者单位： 张雷明(烟台大学药学院,山东,烟台,264005)， 董群,赵向忠(皖南医学院微生物与免疫学教
研室,安徽,芜湖,241001)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(3)
被引用次数： 5次
参考文献(4条)
1.Su X The experience of theraping SLE by Shen Peian pro fessor 1998(08)
2.Liu X L;Chen K;Shi H Effects of Dabuyin Pill on blood glucose level and immune function in
experimental diabetic mice[期刊论文]-中国现代应用药学 2000(03)
3.Sun B;Ma B L;Xie Y L An animal model of autoimmunity induced by formaldehyde treated CJ-S131 and
freunds complete adjuvant 1991(05)
4.TanYY;You L F;Xu Y J Effect of Dabuyin Pill on immune function in normal mice 1999(02)
引证文献(5条)
1.龙玲.胡方林.刘仙菊.阳春林 大补阴丸对甲亢大鼠FT3、FT4、T3、T4、TSH影响的实验研究术[期刊论文]-中国中
医药现代远程教育 2008(9)
2.胡方林.刘仙菊.张国民.龙玲.阳春林 大补阴丸对实验性甲亢大鼠胸腺病理改变的影响[期刊论文]-世界中西医结
合杂志 2008(6)
3.王燕.赵毅 大补阴丸对自身免疫病模型小鼠的免疫药理研究[期刊论文]-中药材 2007(5)
4.赵毅.董群 大补阴丸含药血清对自身免疫病模型小鼠T、B淋巴细胞活性影响的时效关系[期刊论文]-皖南医学院
学报 2006(1)
5.赵毅.董群 大补阴丸对自身免疫病模型小鼠免疫调节的血清药理学研究[期刊论文]-现代免疫学 2007(2)
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