全 文 :中草115ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第1期2007年1,El·105·
带薄壁细胞和分生细胞的组织容易诱导出愈伤组
织,并分化不定芽。植物材料的种胚中含有较多的未
分化及分化程度较浅的分生细胞,因而是诱导再生
合适的外植体。
以MS培养基附加2.0mg/L的GA,杜仲胚轴
的伸长生长效果最好。杜仲种胚胚轴具有很强的再
生活性,在含有0.1mg/L的NAA及0.8mg/L6一
BA的MS培养基中,胚龄20d杜仲胚轴伤口处皮
层,不经愈伤组织分化可直接形成芽原始体并高频
再生不定芽,诱导率达到47%。与蒋祥娥、陈品良、
陈丕铃等人的研究结果有所不同[7~9]。在壮芽及增
殖培养中,分别采用MS培养基附加1.0mg/L6一
BA、0.1mg/LNAA及MS培养基附加2.0mg/L
6-BA、0.05mg/LNAA的效果最好,经28d芽苗
生长系数及增殖系数分别达到2.48和3.64。生根
培养基采用1/2MS培养基附加1.5mg/LIBA及
20mg/L蔗糖,经14d材料的生根率可达91.7%。
本研究建立了稳定高效的杜仲再生体系,为外源基
因导入杜仲奠定了基础。
在整个培养诱导过程中内源激素水平、组培材
料各细胞所处的状态是在不断变化的;在选择了合
适外植体的前提下通过实验筛选出了适合杜仲组培
各阶段生长的一系列培养基。目前采用农杆菌介导
法对杜仲胚轴的遗传转化已获得转基因再生植株。
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人参木质索量与生长年份关系的研究
李靖1,程舟¨,杨晓伶1,李珊1,顾敏2,万树文2,张文驹3,陈家宽3
(1.同济大学生命科学与技术学院,上海200092;2.上海雷允上药业有限公司,上海200002;3.复旦大学生命科学学院
生物多样性科学研究所生物多样性与生态工程教育部重点实验室,上海 200433)
摘要:目的研究不同生长年份人参中木质素量的变化规律,探讨木质素的量用于判断人参生长年份的可行性。
方法 采用紫外分光光度法测定人参木质素的量。结果 人参不同部位和组织的木质素的量存在明显差异;人参
根须部的木质素量与生长年份呈极显著负相关(r一0.986一),可作为判断人参生长年份的指标;根据人参根须部
木质素的量估算的人参生长年份与实际生长年份的误差范围小于2.5年。结论紫外分光光度法可快速、准确地
测定人参根须的木质素的量,无需破坏人参的外形即可初步估算人参的生长年份,不仅可以作为人参生长年份的
鉴定方法,同时也可供中药材年份鉴定借鉴。
关键词:人参;生长年份;木质素;紫外分光光度法
中图分类号:R282.6 文献标识码:A 文章编号:0253—2670(2007)01—0105—04
RelationshipbetweenlignincontentsandgrowthagesofPanaxginseng
LIJin91,CHENGZhoul,YANGXiao—lin91,LIShanl,GUMin2,WANShu—wen2,
ZHANGWen—ju3.CHENJia—kuan3
(1.SchoolofLifeScienceandTechnology,TongjiUnivers ty,Shanghai200092,China;2.ShanghaiLeiyunshang
收稿日期:2006—03—19
基金项目:上海市科委中药现代化专项(04DZl9834)
作者筒介:李靖(1981一),湖北省荆州市人,同济大学生命科学与技术学院在读硕士,从事药用植物资源保护及利用研究。
*通讯作者程舟Tel:(021)65985185E—mail:chengzhou@mail.tongji.edu.cn
万方数据
·106· 中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第1期2007年1月
PharmaeeuticalCo.,Ltd.,Shanghai200002,China;3·KeyLaboratoryofBiodiversitySc enceandEcological
Engineering,MinistryofEduca ion,InstituteofBiodiv rsityScience,SchoolofLifeSience,
FudanUniversity,Shanghai200433,China)
Abstract:ObjectiveTos udytheregulationoflignincontentchangedwiththegrowthagesof
Panaxginsenga discussthefeasibilityofP.ginsenggrowthagesidentifiedbylignincontent.Methods
UVSpectrophotometrywasus dodeterminethelignincontentofP.ginseng.ResultsThelignin
contentindifferentpartsortissuesofP.ginsengwasobviousdifference.Thelignincontenti P.ginseng
rootfibrilhadextremelyn gativecorrelation(,.一0.986。。)withthegro thagesofP.ginseng.Itcould
beconsideredasacharacteristicindicatortoidentifythegrowthagesofP.ginseng.Theidentifyingerror
ofgrowthagesforP.ginsengbetweentherealityandthestimatedbythelignincontentislessthan2.5
years.ConclusionThismethodisrapidandaccurateford terminingthelignincontentinP.ginsengroot
fibrilandcanbeusedtoestimateapproximatelythegrowthageswithoutbreakingtheformofP.ginseng.
ItnotonlycanbeusedforidentifyingthegrowthagesofP.ginseng,butalsoforeferenceforgrowthage
identificationoftraditionalChinesemedicinalmaterials.
Keywords:.PanaxginsengC.A.Meyer;growthages;lignin;UVspectrophotometry
人参PanaxginsengC.A.Meyer系五加科
(Araliaceae)多年生植物,是我国著名的传统中药
材,被誉为“百草之王,,[¨。人参的商品种类很多,仅
以生长年限和生长方式就可分为生晒参(园参)、移
山参、生晒山参(山参)等规格瞳]。人参的生长年份被
认为是影响和判断人参品质最为重要的因素之一。
传统的人参鉴别主要依靠“五行”(须、皮、芦、纹、体)
和“六体”(灵、笨、老、嫩、棱、顺),要求鉴定者有丰富
的实践经验,并且受主观因素影响较大。
人参皂苷是人参的主要活性成分,肖新月等[3]
的研究表明6种人参单体皂苷量之和在移山参、山
参(野山参)和园参(栽培参)主根间无明显差异。而
吴广宣等n]测得野山参的总皂苷量高于栽培参,到
目前为止人参皂苷的量尚不能作为判断人参生长年
份的指标。
木质素作为植物的化学成分与纤维素及半纤维
素共同形成植物体的骨架[5]。木质素的积累一般随
着植株的大小、部位、品种及收获季节的不同,呈现
有规律的变化,如红麻[6]、丝瓜‘71等。本实验通过紫
外分光光度法对不同类型人参的木质素的量进行分
析和比较,以期明确人参木质素的量随生长年份的
变化规律,并进一步探讨木质素的量用于判断人参
生长年份的可行性。
1材料与方法
1.1主要仪器及试剂:精密天平(Sartorius),烘箱
(上海一恒科技),恒温水浴锅(上海甲生科技),紫外
光度计(Hitachi),抽滤器(上海豫康),玻璃器皿。乙
酰溴(AR),醋酸(AR),72%硫酸,氢氧化钠(AR),
高氯酸(AR)。
1.2人参样品:4年生栽培人参(园参)采自辽宁省
新宾满族自治县红升乡张家村,8、12、16、20年生移
山参采自辽宁省桓仁满族自治县四平乡巨户沟村,
30年生野山参由上海雷允上药业有限公司提供。将
8年生移山参分成芦头、根上部、根中部和根须4个
部位,测定各部位的木质素的量。将4年生栽培人参
和8年生移山参的韧皮部和木质部分别取样测定木
质素的量。
1.3 Klason法测定人参木质素的量[8]:称取人参
粉末约0.5g(W,)放入研钵中,加入72%H。SO。20
mL,用研磨棒搅拌至无块状,室温静置4h,将该混
合液移至1000mL的三角烧瓶中,加水765mI。,在
电炉上回流煮沸2h后,用已恒重(Ⅳ。)的砂芯漏斗
(规格G4)抽除过滤,再将盛有木质素的漏斗放在烘
箱中以105℃的温度烘至恒重,取出称质量(Ⅳ。)并
计算,重复3次。Klason法测得的木质素的量由下
式计算。
木质素一(W3一Ⅳ2)/Wl×100%
I.4紫外分光光度法测定人参木质素的量∞]:称取
人参粉末约6mg放入20mL试管中,加入25%溴
乙酰一醋酸溶液5mL和高氯酸0.2mL,将管口加木
塞并密封,于70℃恒温水浴30rain,每隔10min振
荡试管。将反应液完全移入已装有10mL2 mol/I。
NaOH和25mL冰醋酸混合液的容量瓶内,振荡充
分混匀并用冰醋酸定容至100mL。以纯冰醋酸为空
白对照,用紫外分光光度计测定样品溶液260nm
处吸光度。溶液吸光率由下式计算。以多次算得的
万方数据
中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第1期2007年1月· 07·
吸光率取平均值作为标准吸光率,计算木质素的量:
吸光率=A×y/(Ⅳs×K。)
木质素一A×y/(ws×As)×100%
A为样品溶液木质素吸光度,y为样品溶液定容体积
(L),Ws为所取材料质量(g),K-为Klason法所测得的人参
木质素的量,As为人参木质素标准吸光率
2结果与分析
2.1 人参木质素量的测定:用Klason法测得的4
年生栽培人参根须的木质素的量为1.69%,根据
Klason法测得的木质素的量及其在260nm处的吸
光度,得出人参木质素的标准吸光率为440L/(g·
cm)。以该标准吸光率和样品在260nm处的吸光度
计算人参的木质素的量,即紫外分光光度法测得的
4年生栽培人参的木质素的量为2.47%。
2.2人参不同部位的木质素的量:紫外分光光度法
测得的8年生移山参不同部位的木质素的量存在明
显差异,以根须部的量最高,为2.27%,其次为芦
头,主根中部和上部的量最小(表1)。通常植物不同
部位的木质素的量不同,且其木质素的组成也不
同[】0’¨]。鉴于人参不同部位间木质素的量变化辐度
较大,确定取样部位对研究不同生长年份人参木质
素量的变化至关重要。选取直径相近的根须用于紫
外分光光度法测定微量人参的木质素的量,不仅能
保证取样部位的一致性,而且可避免对人参整体形
态的破坏。
表1人参不同部位的木质素的量
Table1 LignincontentsofvariouspartsinP.ginseng
2.3不同生长年份人参的木质素的量:用紫外分光
光度法对不同生长年份人参的木质素的量的测定结
果表明,随着人参生长年份的增加,人参根须部的木
质素的量呈下降的趋势(表2)。木质素是一种含有
羟基和甲氧基的高分子芳香族化合物,是苯丙烷的
衍生物[12|。通常随着植物组织的不断成熟,植物细
胞的木质化程度越高,木质素的量也会增加,而人参
根须部的木质素的量变化恰好相反。木质素作为一
种复杂的高分子聚合物,在同一组织的不同细胞甚
至同一细胞中木质素的结构也可能表现出明显的不
同[13|。本研究中,无论是栽培参还是移山参其根部
的韧皮部木质素的量均高于木质部(表3),这也与
韧皮纤维植物红麻等的结果相反[6]。通过对不同生
长年份人参的组织解剖学观察发现,随着人参生长
年份的增加,人参侧根组织中木质部与韧皮部的比
例有变大的趋势(表2)。苏红文等[14]对l~4年生西
洋参根的组织发育研究中也得出同样的结论。因此,
人参根的组织发育及结构变化可能是造成其木质素
的量变化的重要因素。
表2不同生长年份人参的木质素的
量及估算生长年份
Table2 Lignincontentsbetweendifferentgrowthages
andestimatedgrowthagesofP.ginseng
年份人参
木质素/%
(×10一4)韧皮部 长年份
表3人参木质部和韧皮部的木质素的量
Table3 Ligninco tentsofxylemandphloem
inP.ginseng
4、8、12、16、20、30年生人参根须部的木质素的
量分别为2.47%、2.32%、2.24%、2.18%、2.07%
和1.67%,呈极显著负相关(r一0.986一)(表2,图
1)。据此,获得人参生长年份与人参根须木质素的量
的线性回归方程y一一33.317X+86.909(y为人
参生长年份,X为木质素的量)。用该方程估算出的
上述人参的生长年份分别为4.6、9.6、12.3、14.3、
17.93、1.3年。
廿
\
恕
廿
业
州
1-5 1.7 i.9 2.1 Z3 2.5
木质素/%
图1人参生长年份与根须木质素量的关系
Fig.1RelationshipbetweenP.ginsenggrowthages
andlignincontentsofP.ginsengfibril
用该回归方程估算辽宁省宽甸县振江乡石柱沟
6
6
3
3
9
3
4
9
2●*
7
l;3;i
l
6
oo
3
5
2
8
.
.
2
3
4
1
O
7
9
9
6
O
4
6
3
5
O
5
1
8
9^O
7
4
7
2』t
8
7
7
4
3
2
1
O
6
2
2
2
2
2
1
4
8
2
6
O
0
1
1
2
3
参
人参
参
培山
山
栽移
野
∞龉∞坫∞0
O
万方数据
·108· 中草116ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第1期2007年1月
村产移山参的生长年份,结果估算出的年份与实际
生长年份也大致相符。辽宁省宽甸县产的8、12、16
年生移山参根须部的木质素的量分别为2.44%、
2.24%和2.06%,根据回归方程估算出的生长年份
分别为5.6、12.3、18.3年,与实际生长年份相差
0.3~2.3年。可见,用木质素的量可以估算人参的
生长年份,其误差范围小于2.5年,以估算实际生长
年份为12年的移山参时最为准确。但在估算同为8
年生的辽宁桓仁产和辽宁宽甸产的移山参的生长年
份时,两者的估算生长年份差异极大,分别为9.6年
和5.6年,相差4年。这可能与不同产地和栽培管理
等的影响有关。因此,需综合考虑产地等因素完善估
算方程,以进一步提高人参生长年份估算的准确性。
3结论
人参不同部位的木质素的量差异明显,确定取
样部位至关重要。人参根的韧皮部木质素的量均高
于木质部,随着人参生长年份的增加,人参根组织中
木质部与韧皮部的比例不断变大,木质素的量呈下
降的趋势。人参生长年份与其根须部木质素的量呈
极显著性负相关,计算其一元线性回归方程可用于
移山参的年份鉴定。用该回归方程可初步估算移山
参生长年份,其估算误差范围小于2.5年。紫外分光
光度法可快速、准确地测定人参根须的木质素的量,
无需破坏人参的外形即可估算人参的生长年份,不
仅可以作为人参生长年份的鉴定方法,同时也可供
中药材年份鉴定借鉴。
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内蒙两种源甘草种子生物学特性及播种苗生长状况的研究
孙志蓉1,王文全1,张吉树2,吕银霞2,张锐锋3
(1.北京中医药大学中药学院,北京100102;2.亿利科技实业股份有限公司甘草分公司,内蒙古杭锦旗017400;
3.北京奇源益德药物研究所,北京100070)
摘要:目的研究种源对甘草种子生物学特性及播种苗生长的影响,揭示种源在中药材规范化生产实践应用中
的重要作用。方法 采用常规方法测定不同来源甘草种子的千粒质量、含水量、种皮透性、发芽率、发芽势,播种后
测定幼苗和一年生苗的生长指标。结果 上海庙种源种子的千粒质量大于巴音乌素种源,上海庙种源和巴音乌素
种源种子的单粒质量分别为12.3和11.7mg。巴音乌素种源种子种皮的透水性较上海庙种源强,电导率测定值是
上海庙种源的2倍。上海庙种源种子的硬实率较高,种子耐贮藏性和种子活力较强。巴音乌素种源未处理种子的发
芽率和发芽势高于上海庙种源,但处理后的种子发芽率和发芽势均低于上海庙种源。两种源未处理和处理过的种
子均以小粒种子的发芽率和发芽势最高。两种源幼苗生长指标之间的差异达到了显著和极显著水平。上海庙种源
一年生播种苗的多数生长指标略高于巴音乌素种源,但两种源之间的差异未达到显著水平。结论 种源对甘草种
收稿日期:2006—02—12
基金项目:国家自然科学基金资助项目(30171141)
作者筒介:孙志蓉(1967一),女,山东诸城市人,博士,研究方向为林药复合经营、药用植物资源和规范化栽培的研究。
Tel:(010)84738623E—mail:zrs67@126.com
万方数据
人参木质素量与生长年份关系的研究
作者: 李靖, 程舟, 杨晓伶, 李珊, 顾敏, 万树文, 张文驹, 陈家宽, LI Jing, CHENG
Zhou, YANG Xiao-ling, LI Shan, GU Min, WAN Shu-wen, ZHANG Wen-ju, CHEN
Jia-kuan
作者单位: 李靖,程舟,杨晓伶,李珊,LI Jing,CHENG Zhou,YANG Xiao-ling,LI Shan(同济大学生命科学
与技术学院,上海,200092), 顾敏,万树文,GU Min,WAN Shu-wen(上海雷允上药业有限公司
,上海,200002), 张文驹,陈家宽,ZHANG Wen-ju,CHEN Jia-kuan(复旦大学生命科学学院生
物多样性科学研究所,生物多样性与生态工程教育部重点实验室,上海,200433)
刊名: 中草药
英文刊名: CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
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2.方赤光.刘思洁.郭金芝.张冠英.边疆 吉林省生晒参与红参中木质素含量的测定[期刊论文]-农业与技术 2011(6)
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