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Comparison on HPLC fingerprints of pre- and post processed Radix Polygala with honey-fried method

远志蜜炙前后HPLC指纹图谱对比研究



全 文 :中草1lsChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第11期2006年11月·1657·
远志蜜炙前后HPLC指纹图谱对比研究
夏厚林,董敏,吴 希,盛 燕,王 建
(成都中医药大学药学院,四川成都610072)
摘 要:目的研究远志蜜炙前后HPI。C指纹图谱的差异。方法采用梯度洗脱法,分别对生远志及相应的10批
蜜远志进行HPI,C测定,流动相为乙腈一0.05Voo磷酸线性梯度洗脱,检测波长为210nm;记录时间为100rain。采
用中南大学出版的指纹图谱相似度比较软件进行比较。结果 lo批蜜远志的指纹图谱相似度均大于0.95;生远志
与蜜远志建立的共有模式的相似度均小于0.9。结论蜜炙对远志化学成分种类影响不大,但改变了成分间的比例
关系;蜜炙方法具有较好的重现性和稳定性。
关键词:远志;蜜炙;高效液相色谱
中圈分类号:R286.01 文献标识码:A 文章编号:0253—2670(2006)11一l657—03
ComparisononHPLCfingerprintsofpre-andpostprocessed
RadixPolygalawithhoney—friedmethod
XIAH()U—lin.DONG—MinWU~X 。SHEN(;一Yan,WAN(;Jian
(SchoolfPharnlacy·ChengduUniversityof7lraditionalChineseMedicine.Chengdu6I0072.【’hina)
Keywords:Radia’Polyg’ala;honey—friedprocessing;HPI。(、
远志为远志科植物远志P013,galatenui.1}dia
Willd.或卵叶远志Iolygalasibil‘?ⅢI,.的干燥根。
本品始载于《神农本草经》,其味苦、辛。性微温,归
心、肾、肺经,具有安神益智、祛痰开窍、消肿散痈功
效。其化学成分主要有远志皂苷A、B、C、D、E、F、G
等三萜皂苷类;远志酮I、11,1-羟基一3,6,7-.三甲基
咕吨酮类;哈尔满、1_丁氧羰基一B一咔啉等生物碱类;
糖及糖苷类和脂肪油类等[】]。中药炮制理论认为蜜
炙能增强远志的化痰止咳作用,历来就有“蜜炙甘缓
而润肺”之说。此外,蜂蜜尚有解毒之功。生远志具
有胃黏膜损伤、胃肠运动抑制等靶器官毒性,而远志
蜜炙品的不良反应则相对小[2。]。
本实验对具有药理活性的远志甲醇提取部位进
行了高效液相色谱指纹图谱比较研究,以探求蜜炙远
志与生远志之间的相关性,拟从化学物质基础角度,
为揭示蜜炙远志的“解毒”作用机制提供科学依据。
1仪器与材料
岛津I。c一10ADVP高效液相色谱仪,岛津
SPD一10AVP检测器;Class—VP色谱工作站;乙腈
(色谱纯,美国Fisher公司):自制重蒸水;其他溶剂
均为分析纯。
生远志药材购自成都荷花池药材市场,经本校
卢先明鉴定为远志,’.tenui/},liaWilld.的}二燥根;
蜜远志按《中国药典))2005年版一部炮制通则项下
进行炮制(每10()kg远志用炼蜜2()kg)。
2方法与结果
2.1 供试品溶液的制备:精密称取样品粉末2.o
g,加甲醇20mL,称质量,超声提取40min,放冷,
称质量,以甲醇补足损失的质量,滤过,取续滤液适
量,以0.45弘m微孑L膜滤过,即得。
2.2色谱条件:色谱柱:Dikma公司DiamonsilC.。
(250mm×4.6mm,5pm);流动相:乙腈一0.05%
磷酸水溶液进行梯度洗脱,见表1;检测波长:210
nm;柱温:30C;体积流量:1.0mI。/min;进样量:
10t*I。。
表1梯度洗脱
Table1 Gradientelution
2.3 内参比峰的选取:由于缺少对照品,且该方法
得到的图谱峰较多,难以插入适宜的内标物,因此,
收稿日期:2006—03—14
基金项目:国家自然科学基金资助项目(30371778)
作者简介:夏厚林(1964一),男,四川省大竹人,副教授、硕士生导师,主要从事中药及其复方制剂物质基础研究。
Tel:(028)87778381E—mail:xhl64@163.com
万方数据
·1658· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第11期2006年11月
采用保留时间在22rain左右的、对称性较好的峰作
为内参比峰,见图1。
0 lO 20 30 40 50 60 70 80 90 100
.儿
O 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100
,/min
图1远志生品(A)和炮制品(B)的HPLC图谱
Fig.1HPLCChromatogramsfrawP.tenuifolia(A)
anditsprocessedmateriamedica(B)
2.4方法学考察
2.4.1重现性试验:取同一批生远志5份,依法制
备、测定,得到相应色谱图数据。利用计算机辅助相
似度评价系统中相合系数法评价整体相似度,其相
似度分别为0.9694、0.9832、0.9858、0.9898、
0.9885,RSD为0.8336%。内参比峰的保留时间
平均为22.483rain,RSD为1.200%(咒一5),单位
峰面积(峰面积与取样量的比值)平均为
2298159.28,RSD为2.186%(咒一5)。
2.4.2精密度试验:取生远志药材1份,依法制备
供试品溶液并平行测定,其相似度分别为0.9827、
0.990l、0.9839、0.9927、0.9836,RSD为
0.456%(咒一5)。内参比峰的保留时间平均为
22.452rain,RSD为1.27%(竹=5),单位峰面积平
均为2287454.904,RSD为2.78%(以一5)。
2.4.3稳定性试验:取生远志药材1份,依法制备
供试品溶液,分别在0、2、4、6、12、24h进样测定。其
相似度分别为0.9756、0.9597、0.9853、0.9814、
0.9705,RSD为1.03%(扎一5)。内参比峰的保留
时间平均为22.517rain,RSD为1.19%(雄一5);单
位峰面积平均为2233690.42,RSD为2.68%
(胛一5)。
2.5 蜜远志指纹图谱共有模式的建立:取蜜远志
10批,依法制备供试品溶液并测定。其相似度分别
为0.9726、0.955、0.9851、0.982、0.9758、
0.9847、0.9778、0.9777、0.9702、0.9734,RSD
为0.91%(行一10)。内参比峰的保留时间平均为
22.542min,RSD为1.05%(咒=10);单位峰面积
平均为1841097.07,RSD为2.82%(行一10),10
批蜜远志的HPLC的共有模式见图2。
2.6生远志与蜜远志的比较:取同一批生远志药材
5份,依法制备供试品溶液并测定。其相似度为
0.9694--0.9898,共有模式见图3。
圈2 10批童远志共有模式
Fig.2Mutualmodeoftenbatchsofprocessed
materiamedica
O
圈3 5批远志生品的共有模式
Fig.3MutualmodeoffivebatchsofrawP.tenuifolia
5份生远志与蜜远志建立的共有模式的相关系
数为0.7806、0.7576、0.7813,0.8437、0.8533,
平均为0.8033,RSD为4.24%(,z=5);相合系数
为0.8756、0.8502、0.8588、0.8973、0.8946,平
均为0.8753,RSD为2.10%(疗一5)。
取生远志与炼蜜的简单混合物(按蜜制比例)
2.0g,依法制备、测定,结果见图4。与生远志建立的
共有模式的相关系数为0.8726;与蜜远志建立的
共有模式的相关系数为0.8765。
圈4药材与蜜混合物的HPLC圈请
Fig.4HPLCChromatogramofmixtureofcrude
andhoney-friedmat riamedica
3讨论
10批蜜远志之间的相似度均大于0.95,说明
远志的蜜炙方法具有较好重现性和稳定性。
生远志与蜜远志建立的共有模式相比,相似度
不论以相关系数还是以相合系数计均小于0.90,但
是从生远志共有模式和蜜远志共有模式的图谱直观
分析可见,两者的出峰位置基本相同,仅峰形高低略
有不同,说明其醇溶性成分的种类差别不大,只是量
万方数据
中草115ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第11期2006年11月·1659·
多少有所不同。结合笔者以前测定的远志蜜炙后总
皂苷的量大于蜜炙前(该实验另作报道),表明蜜炙
对远志中化学成分的影响可能在于改变了成分间的
比例关系且增加其溶出率。这也可从远志皂苷的稳
定性较差得到佐证。
远志和炼蜜的简单混合物(比例为5:1)与蜜
远志的共有模式比较,相关系数为0.8765,说明简
单混合物与经炮制加工的蜜远志有差异,确证炮制
对远志化学成分有一定的影响。
流动相的选择:远志甲醇提取物的成分较多,在
等梯度条件下,难以达到理想的分离效果,故选用梯
度洗脱,在实验过程中反复调整流动相梯度,由于仪
器自身的性能无法采用非线性梯度,在70~80min
出的一簇峰始终分不开,但对于使用软件评价的相
似度结果影响不大。
远志皂苷稳定性较差且提纯较难,目前尚无法
定对照品(仅有供薄层扫描用的远志皂苷元)。本实
验采用远志的一个特征峰作为内参比峰,借助现在
使用较为方便的相似度评价软件,得到的结果较为
可信。考虑到取样量的影响,采用单位峰面积进行计
算,结果更为可靠。
远志发挥药效的主要物质是皂苷类成分,课题
组的前期研究证明远志的胃肠毒性物质亦可能是皂
苷成分D]。远志皂苷母核为五环三萜类,连接的糖基
种类、位置及母核中双键位置不同而形成不同的皂
苷。蜜炙远志后毒性降低的原因,是否因蜜炙使不同
类型之间的皂苷相互转化,造成毒性较大的某些皂
苷转化成毒性相对较小的皂苷,从而使总皂苷的整
体毒性降低,这些问题有待于下一步深入研究。
References:
[1]JiangY,TuPF.ProgressinstudiesDnlolygalatenuiJolia
EJ].(1hinT’,一aditHerblh—ugs(巾草药),2()()1,32(8):759
761.
[2]WangJ,GuoJ,WuY“ta1.Acuteluxieilyandinfluence
damagedto{hestomachnlueotlsu evlll)rglneof,’olyl2f#?“
,f,nuUoli‘zandthekindsofprepared[J].(’hinMedRes(7in
(I|IH陕学研究‘j临床).2005.3(2):56
[3]Wang.I.WuHH,WuY“fa1.(omparesludiesonacule
toxicitybetween,10lygala,l,nuL/bliaandonjisapoininsand
Iheprepared[1].1hal‘ⅢⅢol(YinCbinMat,TMtJd(中药药
理0ffi;i床),2001.20(6):2I23.
天麻的超微粉碎及其性能研究
马晶晶,傅正义,苏艳丽,马培燕
(武汉理工大学材料复合新技术国家重点实验室:湖北武汉430070)
现代研究表明,生物机体对药物的吸收、代谢、
排泄是一个极其复杂的过程,中药产生的药理效应
不能唯一地归功于该药物的化学组成,还应与药物
的物理状态等密切相关。当颗粒尺寸达到纳米级时,
由于量子尺寸效应和表面效应,纳米粒子呈现出新
的物理、化学和生物学特性。这就是应用中药纳米技
术可能使药物活性和生物利用度提高乃至产生新的
特性依据所在E川。
国内外学者在中药纳米化方面做了大量的研
究[2~4]。徐辉碧等将矿物中药雄黄嘲和石决明‘61粉
碎到纳米级,理化性质和疗效均发生了显著变化。天
麻为兰科植物天麻GastrodiaelatBI一的干燥块
茎,具平肝息风止痛之功效,含天麻素、天麻苷元等
酚类化合物及甾醇、有机酸、多种氨基酸、多糖、核
苷、淀粉等成分,其中天麻素为天麻的主要有效成
分[7]。本实验采用超细粉碎机对天麻进行了超微粉
碎,用ZetaPAI。S粒度分布仪、SEM、TEM、FTIR
对其进行了表征,并对粉碎前后的天麻的主要成分
天麻素进行了测定。
1仪器和试剂
高速离心剪切式超细粉碎机(HSCS),日本奈
良机械制作所;ZetaPALS光散射粒度分布仪(美
国Brookhaven公司);jsM一56lOI,V型扫描电子
显微镜;莱茨Orthoplan偏光显微镜;60SXB型傅
里叶变化红外光谱仪;美国Agilent1100Series液
相色谱仪;KQ一50B超声波清洗器。天麻购于湖北
省中药材公司,经湖北中医研究院鉴定为兰科植物
天麻的干燥根茎。天麻素对照品购于中国药品生物
收稿日期:2006一ol一23
基金项目:国家自然科学基金资助项目(50272047,50220106657)
作者简介:马晶晶(1981一),女,湖北省随州市人,硕士,研究方向:纳米技术在中药研究中的应用。
Tel:(027)87867824E—mail:mjjmbb@sohu.com
万方数据
远志蜜炙前后HPLC指纹图谱对比研究
作者: 夏厚林, 董敏, 吴希, 盛燕, 王建, XIA HOU-lin, DONG-Min, WU-Xi, SHENG-Yan
, WANG Jian
作者单位: 成都中医药大学药学院,四川,成都,610072
刊名: 中草药
英文刊名: CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年,卷(期): 2006,37(11)
被引用次数: 1次

参考文献(3条)
1.Jiang Y;Tu P F Progress in studies on Polygala tenuifolia[期刊论文]-中草药 2001(08)
2.Wang J;Guo J;Wu Y Acute toxicity and influence damaged to the stomach mucous membrane of Polygala
tenuifolia and the kinds of prepared 2005(02)
3.Wang J;Wu H H;Wu Y Compsre studies on acute toxicity between Polygala tenuifolia and onjisapoinins
and the prepared 2004(06)

引证文献(1条)
1.房敏峰.张文娟.赵新锋.岳明.赵桂仿.郑晓晖 制远志HPLC指纹图谱研究[期刊论文]-四川大学学报(自然科学版
) 2009(1)


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