全 文 ：中革蒋ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第3期2006年3月·341·
马桑叶中黄酮类化合物的分离提取及结构鉴定
张雁冰，王克让，刘宏民，徐向军，朱献民
(郑州大学化学系，河南郑州450052)
马桑叶为马桑科植物马桑CorlarlasinicaM x—
im．的叶子，主要产于山西、陕西、甘肃、河南、湖北、
湖南、四川、广西、贵州、云南等地，主治痈疽、肿毒、
疥癣、黄水疮、烫伤等口j。国内外对马桑叶的研究主
要集中在马桑内酯、羟基马桑内酯、马桑亭等。笔者
对马桑叶中黄酮类化合物进行了系统研究，从马桑
叶乙醇提取物浸膏的氯仿、丙酮、水相中一共分离了
9个黄酮类化合物，并鉴定了结构，分别是山柰酚
(kaempferol，I)、山柰酚一3一O—a—L一鼠李糖苷
(kaempferol一3一O一Ⅱ一D—rhamnoside，Ⅱ)、【¨柰酚一3一
opD一半乳糖苷(kaempferol一3一O一口D—galacioside，
Ⅲ)、山柰酚一3OaL阿拉伯糖苷(kaempferol一3一O-
a—L—arabinoside，IV)、山柰酚一3一O一口一D一葡萄糖苷
(kaempferol3O口Dglueoside，V)、槲皮素
(quereetin，VI)、槲皮素一3一O-eL阿拉伯糖苷
(quercetin一3一OaLarabinoside，Ⅶ)、槲皮素一3一O-
pD一半乳糖苷(quercetin一3一O—B—D—galactoside，Ⅷ)、
槲皮素一3—0-}D一葡萄糖苷(quercetin一3一O一口D—glu—
coside，IX)。化台物Ⅱ、Ⅲ、iv、V、Ⅶ、IX为首次从马
桑叶中分到。
1仪器和材料
旋转蒸发仪：德国BUCHIRotavaporR一200；
熔点仪：上海市安亭电子仪器厂2F一2型；紫外灯：
上海顾村电光仪器厂ZF—I型三用紫外分析仪；超
导核磁共振光谱仪：DPX一400；红外光谱仪：Ther—
moNieoletIR200Spectrometer；ODS反相柱：德国
Waters公司PreparaliveC1855～105pm；大孔树
脂：天津南开大学化工厂AB一8大孔吸附树脂；硅
胶：青岛海洋化工厂产品；植物原料从河南省西蛱县
采集，经河南中医学院鉴定。
2提取和分离
马桑叶用工业乙醇回流提取，旋转蒸发回收乙
醇，浸膏用正丁醇溶解后，加水用氯仿萃取。氯仿萃
取段过硅胶柱，分成氯仿、醋酸乙酯、丙酮段。剩余水
相先过大孔吸附树脂，再过ODS反相柱，分成
30％、50％、80％、100％甲醇4部分，将50％甲醇过
硅胶柱，氯仿一甲醇溶液梯度洗脱，得到化合物Ⅲ、
Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ；将80％甲醇的沉淀过硅胶柱．氯仿甲醇
溶液梯度洗脱得到化合物1、Ⅱ、Ⅵ；氯仿段得到Ⅳ、
Ⅶ；丙酮段得到V。
3结构鉴定
化合物I：淡黄色粉末，紫外灯下显黄色荧光。
mp275～276℃；HClMg反应呈阳性。1HNMR
((CD3)2CO)：12．61(1H，s，OH一5)，8．15(2H，dd，
J一11．8Hz，H2’ 6’)，7．02(2H，dd．J一14．6Hz，
H ’，57)，6．54(1H，d，J一2．0Hz，H8)，6．26(1H，
d，，一1．9Hz，H一6)，”C—NMR与文献报道01基本一
致，数据见表1，故鉴定为山柰酚。
化合物Ⅱ：黄色针状晶体，mp172～174‘C；
HCl一Mg反应呈阳性。1HNMR(DMSOd。)a：12．27
(1H，s，OH一5)，7．74(2H，dd，J=8．7Hz，H一27，6’)，
6．91(2H，dd，J一8．7Hz，H一3’，5’)，6．40(1H，d．
J—1．9Hz，H一8)，6．20(1H，d，J=1．9Hz，H一6)，
5．29(1H，s，H一1”)，3．97(1H，S，H一2”)，0．78(3H，d．
L，一5．8Hz，H一6”)，与文献报道01基本一致。
”C—NMR数据与文献报道[43中的山柰酚一3，7-O—a一
工一二鼠李糖的山柰酚一3一O—a—L一鼠李糖基本一致，数
值见表1，故鉴定为山柰酚3一OaL鼠李糖。
化台物Ⅲ：黄色针状晶体，mp238～240C，紫
外灯下显黄色荧光，HCI—Mg反应呈阳性。IRv鉴
em：3400～3200，1656，1605，1496。1H—NMR
(DMSO—d。)：12．62，lO．86，10．16(3个oH)，8．07
(2H，dd，J一8．8Hz，H一2’，6’)，6．86(2H．dd，L，一
8．8Hz，H一3’，5’)，6．44(1H，d，。，=1．9Hz H一8)，
6．21(1H，d，J=2．0Hz，H一6)，5．40(1H，d，L，一7．6
Hz，H—l”)，与文献报道口1数据基本一致，”C—NMR
数据见表1，故鉴定为山柰酚3O肛D半乳糖。
化合物IV：黄色粉末，mp231～232c，紫外灯
坚銎品留：篙篙咨警臻科学基金资助项目(。。。。。。。。∞
作者简介：张雁冰(1958一)，女，教授．硕士生导师，郑州大学化学系在读博士，研究方向：天然产物化学
Bmall：￡nuangyb睹ZZU·eduucn
万方数据
·342· 中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第3期2006年3,El
下显黄色荧光，HClMg反应呈阳性。IRv罂cm：
3400～3200，1655，1606，1507。1H—NMR(DM～
S0-d。)：12。63，10．87，10．19(3个oH)，8．02(2H，
dd，J一8．8Hz，H一27，6’)，6．89(2H，dd，J一8．8Hz，
H一3’，5’)，6．44(1H，d．J一1．9Hz，H一8)，6．20(1H，
d，J=1．9Hz，H一6)，5．62(1H，s，H一1”)，与文献报
道。1数据基本一致，”C—NMR数据见表1，故鉴定为
山奈酚3一Oa—L-阿拉伯糖。
化合物V：淡黄色粉末，mp246～247℃，HCl～
Mg反应呈阳性。IR《!cm。：3400～3200，l658，
1 603，1493。1H—NMR(MeOD)：8．07(2H，dd，J一
12．0Hz，H一27，67)，6．88(2H，dd，L，一11．2Hz，H一
37，5’)，6．38(1H，d，J=2．0Hz，H8)，6．19(1H，d，
J一2．0Hz，H一6)，5．12(1H，d，J=8．0Hz H—l，，)，
3．40～5．82(5H，m，H一2”，6”)，与文献报道“1数据基
本一致，”C—NMR数据见表1，故鉴定为山奈酚3一
。一}D一葡萄糖。
化合物Ⅵ：黄色针状晶体，mp312～315℃，
HCI—Mg反应呈阳性。IR《塞cm一：3400～300，
1 663，】609，1519。‘HNMR((CD3)2CO)：12．17
(1H，s，0H一5)，7．78(1H，d，t，一2．0Hz，H一2’)，7．68
(1H，dd，J=2．0Hz，H一6’)，6．97(1H，d，J=8．4
Hz，H一5’)，6．50(1H，d，t，一1．9Hz，H8)，6．24(1H，
d，J=1．9Hz，H一6)，与文献报道[63数据基本一致，
”C—NMR数据见表1。故鉴定为獬皮素。
化合物Ⅶ：黄色粉末，mp196～197℃，HClMg
反应呈阳性。IRv悠cm1：3400～3300，1653，
1 606，15 4。1 —NMR(DMSO—d。)；12．64，10．87，
9．72，9．26(4个oH)，7．56(1H，dd，J=10．4Hz
H一 ‘)，7．48(1H，d，J一2．0Hz，H一27)，6．86(IH，d，
J一8．4Hz，H一5’)，6．41(1H，d，J=2．0Hz，H一8)，
6．21(1H，d，J一2．0Hz，H一6)，5．59(1H，d，J=5．6
Hz，H一1”)，与文献报道“川数据基本一致，”CNMR
数据见表1，故鉴定为槲皮素一3一O—L一阿拉伯糖。
化合物Ⅶ：黄色结晶，mp2457-246℃，HcI-Mg
反应呈阳性。IRv忠cm：3400～3300，1655，
1 606，1504。1H—NMR(DMSO—d。)：12．63(1H，OH一
5，，10．85，9．71，9．14<3个OH)，7．67(1H，dd，J一
10．4Hz，H一6’)，7．52(1H，d，J一2．0Hz，H一27)，
6．81(1H，d，J一8．4Hz，H一5’)，6．40(1H，d，J=2．4
Hz，H一8)，6．20(1H，d，J=2．0Hz，H一6)，5．37(1H，
d，J一7．6Hz，H一1”)，与文献报道03数据基本一致，
”c—NMR数据见表1，故鉴定为槲皮素一3一O一口n-半
乳糖。
化合物Ⅸ：黄色结晶，nip229～231C，HCI—Mg
反应呈阳性。1H—NMR(DMSo—d。)：12．64(1H，oH一
5)，7．64(1H，dd，J—10．8Hz，H一6’)，7．58(1H，d，
J一2．4Hz，H一2’)，6．86(1H，d，J一8．4Hz，H一5‘)，
6，45(1H，d，，一1．6Hz，H一8)，6．23(1H．d，，=2．0
Hz，H一6)，5．36(1H，d，，一7．6Hz，Hl”)，与文献报
衰1化合物1～D(的”c—NMR
Table1 1℃一NMRDataofcompoundsI—Ix
万方数据
中草蒋ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第3期2006年3月
道_1数据基本一致，”c—NMR数据见表1，故鉴定为
槲皮素一3一。一pD一葡萄糖。
4结果与讨论
通过研究发现，马桑叶中黄酮醇及其苷类的量
比较大，种类比较多，主要集中在水相中，其基本骨
架为山柰酚和槲皮素。
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黄花夹竹桃内生真菌产细胞松弛素的研究
彭小伟“2，杨丽源1，李绍兰1，周斌1，李治滢1，陈有为¨
(1．云南大学云南省微生物研究所，云南昆明650091‘2．中国科学院过程工程研究所
生化工程国家重点实验室。北京100080)
植物内生真菌是指生活在植物体内或生活史的
一定阶段处于植物体内的真菌，其涵盖面相当广，包
括菌根真菌和植物病原菌o∞。也有人认为内生真菌
是指存在于健康植物的茎叶中，不形成明显病症的
真菌“’2]。在内生菌一植物宿主一食草动物生态系统
中，植物内生菌扮演重要生态学作用，发挥这些作用
的物质基础是内生菌产生的丰富多样的次生代谢产
物，它们具有多种生物活性，在农业和(或)医药业中
具有重要的应用潜力[3]。黄花夹竹桃Thevetiaperu—
viana(Pers．)K．Schum．是夹竹桃科植物，剧毒，
它是一种药用植物，全株各部位都含有药用成分黄
夹苷，果仁中质量分数最高，有强心、利尿、祛痰、发
汗、催吐等作用。YM38338菌株分离自黄花夹竹桃
植物茎韧皮部，在筛选过程中，其发酵提取物经薄层
色谱分离，发现它能产生一种次生代谢产物，对该菌
株进行扩大发酵，用乙醇萃取发酵物，经硅胶柱色谱
分离纯化，首次分离到两个化合物。通过波谱方法鉴
定化合物结构：细胞松弛素H(I)和细胞松弛素O
(Ⅱ)。
1材料
1．1菌种：菌株YM38338分离自黄花夹竹桃植物
茎韧皮部，菌种保藏在云南省微生物研究所真菌资
源与菌种保藏室。
1．2培养基：PDA液体培养基：马铃薯200g，葡萄
糖20g，蒸馏水】000mL，pH值自然。
1．3试剂与仪器
醋酸乙酯、氯仿、甲醇、丙酮、石油醚，均为分析
纯；硅胶GF：。。薄层色谱板(青岛海洋硅胶厂)；柱色
谱用200～300目硅胶(SilicaG)(青岛海洋硅胶
厂)；核磁共振谱用BurkerAM500核磁共振仪测
定；质谱用AutospecVG一3000质谱仪测定。
2方法
2．1发酵和提取：配10L液体PDA培养基，分装
于100个三角瓶(规格500mI。)，取活化72～96h
的YM38338菌种，接种于装有液体PDA培养基的
三角瓶中，置于25～28℃，300r／min摇床发酵5d。
发酵结束后，用纱布滤过．使菌体与发酵液分
开，菌体用氯仿浸泡，浸泡24h后用滤纸滤过，滤液
减压浓缩，再用新鲜氯仿浸泡菌体，重复3次，发酵
液用醋酸乙酯萃取3次，减压浓缩萃取液，分别得浓
箨薯品霁：雾j：嚣；蚤5)．男．江西人，博士生，主要从事微生物资源与应用研究。Em州：。i。。wpp@h。。m。il⋯
*通讯作者陈有为Tel：(0871)5033539Email：ywchen@．ynu．edu．Cn
万方数据
马桑叶中黄酮类化合物的分离提取及结构鉴定
作者： 张雁冰， 王克让， 刘宏民， 徐向军， 朱献民
作者单位： 郑州大学,化学系,河南,郑州,450052
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2006,37(3)
被引用次数： 13次
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