全 文 ：·550· 中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第4期2007年4月
PEG4000和PEG6000均可作为滴丸基质，但
在实验中发现PEG6000与独一味提取物混合熔融
后黏度较大，滴制困难，而PEG4000与独一味提取
物混合熔融后黏度较小，但滴丸不易成型，故选用
PEG4000与PEG6000的混合物作为独一味滴丸
的基质。
HPLC法测定复方虎杖颗粒中大黄素
张彤，丁越，陶建生，徐莲英
(上海中医药大学，上海201203)
复方虎杖颗粒是根据名老中医经验方研制的
中药六类新药，由虎杖、黄柏、苦参3味中药组成，具
有清热解毒、活血祛瘀、收湿止痒、加快伤口愈合之
功效，主治各类痔疮、肛瘘等肛肠科疾病。虎杖为方
中君药，主要含有大黄素等葸醌类成分。因此本实验
采用HPLC法对复方虎杖颗粒中主要药效成分游
离大黄素和水解总大黄素进行了测定，以期建立该
制剂的质量控制方法。
1仪器与试药
HP8453E紫外可见光谱仪(Aglient公司)；
Aglient1100型高效液相色谱仅；大黄素对照品(批
号756—200110，中国药品生物制品检定所)，复方虎
杖颗粒(上海中医大药业股份有限公司)，甲醇为色
谱纯，重蒸水为自制，其他试剂均为分析纯。
2方法与结果
2．1检测波长的选择：文献报道大黄素检测波长有
254nm[1|、434rimE2|、437nm[引、290nmE引。本实验
将大黄素对照品甲醇溶液在190～600am全波长
扫描。结果在230am以上，大黄素有253、267、290、
437nm4个吸收峰。因此实验选择以吸收强度最大
的吸收峰290nm为HPLC法的检测波长。
2．2色谱条件与系统适用性试验：色谱柱为Hy—
persilC18柱(250mm×4．6mm，5弘m)(大连依利特
科学仪器有限公司)；甲醇一0．1％磷酸水溶液(85：
15)为流动相；检测波长：290glm；体积流量：1．0
mL／min；柱温：室温。在上述条件下，样品中大黄素
，与其他组分达到基线分离，与相邻的色谱峰分离度
大于1．5。大黄素峰理论塔板数不小于3000。结果
， 见图1。
2．3供试品溶液的制备：取复方虎杖颗粒约0．5g，
精密称定，置100mL量瓶中，加5％醋酸甲醇约90
A
一忆
C
t／rain
1一大黄素
l—emodin
图1大黄素对照品(A)、复方虎杖颗粒(B)、复方虎杖
颗粒水解后样品(C)裙缺虎杖的阴性样品溶液
(D)的HPLC色谱图
Fig．1HPLCChromatogramsfemodinreferencesub-
stance(A)，CompoundHuzhangGranula(B)，
hydrolyzedsampleofCompoundHuzhang
Granula(C)，andnegativesample(D)
mL，超声处理(功率250W，频率30kHz)30min。放
至室温，加甲醇至刻度，摇匀，滤过。取续滤液，即得
用于测定游离大黄素的供试品溶液。
另取上述续滤液10mL，置100mL圆底烧瓶
中，挥去甲醇。加2．5mol／L硫酸溶液20mL，水浴
1h，冷却。加氯仿约30mL，继续回流2h，冷却。移
置分液漏斗中，用少量氯仿洗涤容器，洗液并人分液
漏斗中，分取氯仿层。酸液用氯仿提取2次，每次约
8mL，氯仿液并入100mL圆底烧瓶中。挥干氯仿，
残渣用甲醇溶解并定容至50mL，即得用于测定总
大黄素的供试品溶液。
2．4空白干扰试验：根据处方组成，取除虎杖外的
其余药味，按制剂工艺制备，制得缺虎杖的阴性样品
颗粒。按供试品溶液的制备方法同法处理制得阴性
样品供试品溶液。取大黄素对照品溶液、供试品溶液
枝稿日期：2006—05—12
作者简介：张彤(1972一)，男，浙江杭州人，副教授，博士，从事中药制药和中药质量标准研究。
Tel：(021)51322318E—mail：zhangtdmj@sohu．com
万方数据
中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第4期2007年4月·551·
和阴性样品溶液依法测定，结果阴性样品溶液在大
黄素位置上无吸收峰出现，表明其他组分对大黄素
测定无干扰。结果见图1。
2．5线性关系考察：精密称取以五氧化二磷为干燥
剂减压干燥24h的大黄素对照品6．19mg，置50
mL量瓶中，以甲醇溶解并稀释至刻度，得质量浓度
为0．1238mg／mL的对照品溶液。以此为母液，依
次稀释2倍，分别配制成0．00193～0．0619
mg／mL的一系列质量浓度的对照品溶液。分别吸
取上述的对照品溶液各20弘L，进样测定。以峰面积
积分值为纵坐标，质量浓度为横坐标，绘制标准曲
线，计算得回归方程：y=86656．963x一4．08834，
r=0．9998。结果表明大黄素质量浓度在
0．00193～0．0619mg／mL与峰面积的线性关系
良好。
2．6精密度试验：取批号为031003的复方虎杖颗
粒，制备供试品溶液，连续进样5次，测定大黄素的
峰面积，计算得游离大黄素的峰面积RSD为
0．94％，水解后总大黄素的峰面积RSD为0．54％。
2．7溶液的稳定性：取批号为031003的复方虎杖
颗粒，制备供试品溶液，分别于0、1、2、4、8、12、24h
进样测定大黄素的峰面积。结果表明，在24h内供
试品溶液基本稳定，游离大黄素的峰面积的RSD为
1．9％，水解后总大黄素的RSD为1．5％。
2．8重现性试验：取批号为031003的复方虎杖颗
粒，平行取样6份，精密称定，制备供试品溶液，进样
测定，计算大黄素的质量分数，结果游离大黄素的质
量分数的RSD为1．3％，水解后总大黄素的RSD
为2．o％。
2．9加样回收率试验：取批号为031003的复方虎杖
颗粒(含游离大黄素2．75mg／g)约0．35g，加入大黄
素对照品0．774、0．968、1．162mg，制备测定游离大
黄素的供试品溶液，进样测定，计算回收率。结果平均
加样回收率为99．4％，RSD为2．1％(行=6)。
取批号为031003的复方虎杖颗粒(含水解后总
大黄素10．10mg／g)约0．25g，加入大黄素对照品
2．32、2．71、3．10mg，制备测定总大黄素的供试品
溶液，进样测定，计算回收率。结果平均加样回收率
为100．7％，RSD为2．3％(，2—6)。
2．10样品测定：分别取3批复方虎杖颗粒，制备
供试品溶液，迸样测定，以外标法计算大黄素的质量
分数，结果见表1。
表1 复方虎杖颗粒中大黄素的测定结果(万一3)
Table1 DeterminationofemodininCompound
HuzhangGranula(一=3)
3讨论
大黄素是常见的一类葸醌类有效成分，在大黄、
虎杖、何首乌、决明子中均有，常作为指标成分。本实
验的研究表明，290nm吸收峰的响应值最高，灵敏
度最高，且远离了溶剂的末端吸收区，选作HPLC—
UV法测定大黄素的检测波长较为合适。
中药所含蒽醌类成分，一部分以游离大黄素、大
黄酚等游离蒽醌类存在，另一部分以大黄素葡萄糖
苷等结合蒽醌的形式存在。因此，为更好控制这类中
药的质量，应同时控制游离蒽醌和水解后总蒽醌的
量。研究考察了不同提取溶剂、不同超声时间对复方
虎杖颗粒中游离大黄素的提取率的影响，结果表明
以5％的醋酸甲醇溶液为提取溶剂超声30min提
取效率较高。加酸水解时，用直火加热较难控制火
候，总大黄素的量降低。所以选用沸水浴加热水解的
方法。
3批复方虎杖颗粒中试样品游离大黄素和水解
后总大黄素平均质量分数分别为2．85、10．08
mg／g。由于1g复方虎杖颗粒含虎杖药材1．33g，
生产这3批复方虎杖颗粒的虎杖药材中游离大黄素
和水解后总大黄素质量分数分别为3．oo、14．8
mg／g，可计算出该制剂生产工艺对游离大黄素和水
解后总大黄素的转移率分别为71％、51％。因此，制
剂指标成分的测定在一定程度上反映出制剂工艺的
合理性。
References：
[13DuanYB，HanYW，JinJ，eta1．Determinationofemodin
contenti MeibaoCapsules[J]．LishizhenMedMaterMed
Res(时珍国医国药)，2006，17(1)：37—38．
[2]LiHL，SunxH，SunW，etat。Determinationofthecon—
tentsofrheina demodininZhipingkangbyHPLC[J]．Chin
JHospPharm(中国医院药学杂志)，2005，25(9)：835—
837．
[3]FuYM，LiBJ，BaiY，etal。Determinationthecontentof
emodininFeijiehePillsbyHPLC[J]．ChinaPharm(中国药
师)，2006，9(1)：20—21．
[4]LiY，FuxT，ZhangXQ．Determinationofthemodinin
GengnianchunTabletbyHPLC[J]．ChinJlnYTroditChin
Med(中国中医药信息杂志)，2003，10(9)：35—36．
万方数据
HPLC法测定复方虎杖颗粒中大黄素
作者： 张彤， 丁越， 陶建生， 徐莲英
作者单位： 上海中医药大学,上海,201203
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2007,38(4)
被引用次数： 2次

参考文献(4条)
1.Duan Y B;Han Y W;Jin J Determination of emodin content in Meibao Capsules[期刊论文]-时珍国医国药
2006(01)
2.Li H L;Sun X H;Sun W Determination of the contents of rhein and emodin in Zhipingkang by HPLC[期刊
论文]-中国医院药学杂志 2005(09)
3.Fu Y M;Li B J;Bai Y Determination the content of emodin in Feijiehe Pills by HPLC[期刊论文]-中国药
师 2006(01)
4.Li Y;Fu X T;Zhang X Q Determination of the emodin in Gengnianchun Tablet by HPLC[期刊论文]-中国中
医药信息杂志 2003(09)

本文读者也读过(10条)
1. 潘莹.王树桂.张林丽.陈海南 薄层扫描法测定虎杖不同炮制品中大黄素含量[期刊论文]-中国民族民间医药
2008,17(3)
2. 刘丹.汤海峰.张三奇 虎杖复方制剂的研究及其临床应用概况[期刊论文]-药学实践杂志2007,25(2)
3. 王信 HPLC法测定虎杖叶中槲皮素的含量[期刊论文]-中药材2006,29(4)
4. 毛秀红.张彤.刘云.水彩虹.徐莲英.季申 茵栀黄注射液质量标准研究[会议论文]-2007
5. 雷海民.毕葳.李强.龚卫红.黄娴.周玉新.LEI Hai-min.BI Wei.LI Qiang.GONG Wei-hong.HUANG Xian.ZHOU Yu-
xin 虎杖药材指纹图谱研究[期刊论文]-中草药2006,37(7)
6. 薛梅.兰卫.王自军.代斌 虎杖中总黄酮和多糖的含量测定[期刊论文]-中成药2006,28(5)
7. 张敏.曹庸.于华忠.龚竹琼.李贵.ZHANG Min.CAO Yong.YU Hua-zhong.GONG Zhu-qiong.LI Gui 同步荧光检测虎
杖提取物中白藜芦醇含量的新方法[期刊论文]-林产化学与工业2005,25(2)
8. 王敏.万丽.王凌.叶娉.董芳.吕芳 虎杖提取物中总黄酮的含量测定[会议论文]-2008
9. 刘元.宋志钊.李星宇.张宁宁.LIU Yuan.SONG Zhi-zhao.LI Xing-yu.ZHANG Ning-ning 复方虎杖片质量标准研
究[期刊论文]-中国民族民间医药2009,18(7)
10. 张彤.徐莲英.蔡贞贞.ZHANG Tong.XU Lian-Ying.CAI Zhen-zhen 2种实验模型评价5种中药提取物的鼻黏膜毒
性[期刊论文]-中国新药与临床杂志2005,24(9)

引证文献(2条)
1.尹银华.周洪波 HPLC法测定驱风口服液中大黄素的含量[期刊论文]-亚太传统医药 2010(1)
2.陈锡琨 HPLC法测定武打将军酒中大黄素的含量[期刊论文]-中国药师 2012(7)


本文链接：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200704028.aspx