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正交试验-人工神经网络模型优化龙眼多糖的超声提取工艺



全 文 :·1514· 中草药 ChineseTraditionalandtHerbalDrugs第37;卷第10期2006年10月
四周用胶带封好,进行扫描测定。
熊果酸薄层展开剂受温度和湿度影响较大,本
实验摸索出较为理想的展开剂系统为氯仿一丙酮一醋
酸乙酯(20:.2:5)。
正交试验一人工神经网络模型优化龙眼多糖的超声提取工艺
王统一h2,赵兵”,王玉春1
(1.中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室,北京’100080;2.中国科学院研究生院,北京100049)
龙眼为无患子科植物龙眼DimocarpUSlongan
Lour.的果实,药用价值很高,自古以来被视为珍贵
补品。龙眼甘、平、无毒,主治思虑过度,劳伤心脾,健
忘怔忡,虚烦不眠,自汗惊悸,具有开胃健脾,补虚益
智的作用,可作为治疗病后虚弱、贫血痿黄、神经衰
弱、产后血亏等症的佳品。在清除活性氧自由基、抑
制脂质过氧化以及提高免疫方面,龙眼果肉提取液
均具有很高的活性[1],并且其对宫颈癌细胞的抑制
率可达90%比]。目前龙眼深加工仍以龙眼干为主,
产品附加值较低。超声波对植物中各种成份的提取
分离的强化作用主要源于其空化作用,其提取的效
果与物料及体系的性质、超声波强度、作用时间等多
种因素有关,因而选择适宜的提取条件有助于提高
提取率和降低提取成本。
本实验利用正交试验和人工神经网络模型优化
了超声强化提取龙眼多糖的条件,与传统加热提取
相比显著提高了龙眼多糖的提取得率和效率,可为
龙眼深加工提供参考。
1仪器与材料
JY99—2D超声波细胞破碎机(宁波新芝);
DGG--9140A电热恒温鼓风干燥箱(上海森信);
QN一999粉碎机(韩国日进精工有限公司);08—2B
离心机(上海安亭科学仪器厂);752紫外光栅分光
光度计(上海精密科学仪器有限公司);HF一5.OB
超声循环提取机(北京弘祥隆生物技术开发有限公
司)。龙眼干产于广东高州,试剂均为分析纯。
2方法与结果
2.1 超声提取工艺流程:将一定量龙眼果肉与水
混合粉碎,调节合适液固比,置于超声提取装置中进
行超声强化提取。提取后将提取液进行液固分离、蒸
发浓缩、加入适当体积分数乙醇沉降24h,液固分
离,得到龙眼多糖粗品。
2.2多糖的测定[3]:采用苯酚一硫酸法,取葡萄糖
对照品配成200tlg/mL的溶液,取0、0.2、0.4、0.6、
0.8、1.0mL溶液,各加水补至2mL,然后加入6%
苯酚试液1mL和5mL浓硫酸,静置10min后摇
匀,20min后于490nm处测定吸光度值,以质量浓
度(C)对吸光度(A)进行线性回归得到回归方程为
C=0.12545A一0.00362,,.一0.99877。待测多糖
粗品溶于100mL水,取0.5ml。稀释至50mL,取
此稀释液1mL,按上法测定吸光度,根据标准曲线
换算糖的质量浓度。计算多糖提取率(多糖提取率=
多糖质量浓度×体积/龙眼果肉质量X100%)。
2.3 正交试验及其结果:选用pH值(A)、超声功
率(B)、超声作用时间(C)、占空比(D)、粒度(E)、液
固比(F)、提取温度(G)7个因素,每个因素3个水
平,采用L。。(37×21)正交表进行试验。因素水平见
表1。
表1因素水平
TableFactorsandlevels
每次称取10g龙眼果肉,按液固比10:1加水
粉碎,过40、60、80目筛并调节合适pH值,正交试
验结果见表2。
由。极差R的大小可知因素重要性:液固比>pH
温度>占空比>时间>功率>粒度。试验12号条件的
得率最高,条件为pH10,功率300W,30min,占空比
30%,粒度40目,液固比30,温度20℃。
对结果进行方差分析,粒度偏差平方(219.376)
和与误差偏差平方和一195.603相近,故把其并入误
差项,分析精度提高。对结果进行方差分析,见表3。
收稿日期:2006—04—29
作者简介: 王统一(1980一),男,山东临沂人,硕士,研究方向为生物化学工程。
*通讯作者赵兵Tel:(010)82627059E—mail:bzhao@home.ipe.ac.on
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第10期2006年10月·1515·
表2正交试验结果
Table2 Resultsoforthogonaltest
表3方差分析
Table3 Varianceanalysis
*,由方差分析可以得出pH值和液固比对结果具
有高度显著性影响,占空比和温度对结果有显著性
影响,其他因素影响相对较小。虽然正交试验中12
号条件的提取率最高,但根据各因素的k值理想的
提取条件为pH10,功率300W,提取时间30min,
占空比30%,粒度40目,液固比30,温度30℃。但这
些条件需重新试验或再次安排正交试验进行验证。
而人工神经网络模型只需要利用已获得的试验数据
即可预测出随意条件的试验结果‘
2.4神经网络模型优化:神经网络模型是由生物学
的大脑和神经系统的启示而建立的一种信息处理的
计算模型。它由接受信息的输入层、输出信息的输出
层以及中间隐含层构成。其中,后传递神经网络模型
(backpropagation,BP)应用最为广泛。BP模型是
指导学习下的模拟结构,便于充分挖掘实验数据信
息,在不用增加实验数据的基础上对结果进行预测
和优化[4]。
2.4.1训练样本:以表2正交试验数据作为样本,将
提取工艺中7个因素的试验条件作为样本输人(记为
In,n∈N≤7),多糖提取率作为输出样本记为O[5]。
2.4.2训练参数:使用BrainCom软件(BP结构模
型),采用7×12×8×l的网络结构,即7个输入神
经元分别代表7个正交试验因素,中间隐含层分两
层,第一层12个节点,第二层8个节点,1个输出神
经元代表多糖提取得率。
训练参数(trainingparameters)Momentum
0.5,learningrate0.3,停止条件(stopping
condition)步数(iterations)106,公差Tolerance%
97,“%Correct’100。
2.4.3 网络训练结果:步数(iterations)174270,
Totalerror0.0516,“%Correct”100。利用训练好
的网络,在正交试验最优的12号条件基础上,按影
响因素大小,固定其他因素研究每个因素的变化对
结果的影响。预测结果为:选择pH10,液固比为
40:1,占空比30%,温度40℃,功率400W,提取
30min,粒度60目,多糖提取率为158.698mg/g。
在神经网络模型优化的提取条件下,即取10g
龙眼果肉,pH10,液固比为40:1,占空比30%,温
度40℃,功率400W,提取30min,粒度60目,实验
得到的多糖提取率为164.848mg/g。显然,神经网
万方数据
·1516· 中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第10期2006年10月
络预测结果与实验结果一致。
2.5与传统提取方法比较:称取609龙眼果肉,按
液固比40:1加水粉碎,过60目筛,并调pH10,混
合均匀,平分成6份,在沸水浴下加热至不同时间。
将提取液进行液固分离、蒸发浓缩、加入适当体积分
数乙醇沉降24h,液固分离,得到龙眼多糖粗品,测
多糖提取率。常规提取90rain时多糖提取得率达到
最大93.589mg/g,但仍远远小于超声波提取30min
时的得率164.848mg/g。可见超声提取不仅可以节
省大量时间,降低提取温度,而且可以显著提高多糖
的提取率。
表4不同提取方法的比较
Table4 Comparisonofeffectsondifferent
methodsfextraction
提取时间/rain .龙眼多糖/(mg·g-1)
30
60
90
120
150
180
超声30
65.236
84.055
93.589
73.516
54.196
5I.436
164.848
2.6超声提取放大试验:为了考察上述超声提取
工艺的放大适应性,称取125g龙眼果肉,加入5.0
L水粉碎,过60目筛,调pH10,倒入HF一5.0B循
环超声提取装置内,搅拌速度1200r/min,超声功
率1500W,占空比30%,室温下(20℃)进行循环超
声提取,分别在15、30、45、60、75min取样测定多糖
提取率,结果见表5。可知5.0I。循环超声提取30
min多糖提取得率达到101.117mg/g,显著超过常
规沸水搅拌提取90min的多糖最高提取率93.589
mg/g。同超声提取小试试验相比,物料量放大到小
试的12.5倍后,在5.0L循环超声提取装置内多糖
提取得率略低,这主要与温度、提取条件未作优化等
有关。但是与常规提取相比,循环超声提取能显著缩
短提取时间、降低提取温度和提高多糖提取得率,而
且具有较好的放大性能,这将为实现规模化生产奠
定基础。
表5 5L循环超声提取试验结果
Table5 Resultsof5Lcirculatedultrasonic
waveextraction
超声时间/min 龙眼多糖/(rag·g_1)
15
30
45
60
75
3讨论
在超声强化提取的过程中,多种因素可以影响
其提取效果。从正交试验结果分析看,液固比和pH
有高度显著性影响。液固比在一定范围内增大有利
于溶剂主体浓度的稀释,而增加液膜两侧的浓度差,
从而可以推动更多的溶质分子向溶剂中扩散而提高
提取得率;在碱性环境下,植物细胞壁中的酯链更容
易被打断,与细胞壁多聚糖结合的酚醛酸、糖醛酸、
乙酰基也比较容易溶解,从而可以增加纤维素之间
的空隙度,使细胞壁膨胀疏松,利于超声波的破碎而
提高多糖得率。温度升高和粒度减小可以使颗粒扩
散速度加快,并能强化超声作用的湍流作用,超声功
率、作用时间及占空比则主要与超声的空化效应、机
械作用以及超声发生的稳定性有关。
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万方数据
正交试验-人工神经网络模型优化龙眼多糖的超声提取工艺
作者: 王统一, 赵兵, 王玉春
作者单位: 王统一(中国科学院过程工程研究所,生化工程国家重点实验室,北京,100080;中国科学院研
究生院,北京,100049), 赵兵,王玉春(中国科学院过程工程研究所,生化工程国家重点实验
室,北京,100080)
刊名: 中草药
英文刊名: CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年,卷(期): 2006,37(10)
被引用次数: 8次

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