全 文 ：中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第4期2005年4月·539·
表3方差分析
Table3 Varianceanalysis
方差来源 离差平方和 自由度 方差 F值 P值
A 12．22 2 6．11 3．99
B 827．12 2 413．56270．30Pd0．01
误差e 6．1 4 1．53
Fo05(2，4)一6．94Fo．ol(2，4)一18
2．6 验证试验：按最佳工艺搭配A。B，，即PEG
4000为基质，基质与药物配比2：1，90℃滴制，冷
却剂温度为5℃进行试验，结果丸重平均值为
0．0562，丸重变异系数为3．59％，溶散时限为4．50
min(，z一3)。
3讨论
滴丸的成丸情况和质量受多种因素的影响，本
实验采用具量化指标的丸重变异系数、溶散时限以
及包括滴丸圆整度、硬度在内的外观质量评分3项
指标评定工艺条件优劣，使结果更可靠、合理。
本工艺制备简便，显著提高难溶性黄芩苷和其
他药物的溶出，提高其生物利用度、减少服药剂量，
又可消除注射剂的不良反应。
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HPLC法测定山茛菪麝香膏中祖师麻甲素的含量
陈娟，师彦平+
(中国科学院兰州化学物理研究所甘肃省天然药物重点实验室，甘肃兰州 730000)
山莨菪麝香膏收载于《中华人民共和国卫生部
药品标准》中药成方制剂第2册，是由唐古特瑞香、
山莨菪、麝香、干姜、乳香、没药等9味药加工制成的
中药橡胶膏剂，具有活血镇痛、祛风除湿的功能，用
于风湿痹痛，关节炎、类风湿关节炎，跌打损伤等症
的疼痛。原标准只在检查项下规定了含膏量限度。唐
古特瑞香为本方主药，其主要成分祖师麻甲素具有
镇痛、消炎、抑菌、抗血栓、抗凝、抑制中枢神经、降
压、抗缺氧等多种药理作用，其中镇痛、抗炎作用等
均与本品功能主治相吻合，因此，选择祖师麻甲素作
为控制本品内在质量的指标成分。祖师麻甲素的测
定有薄层一紫外分光光度法[1]、薄层扫描法[z3和高效
液相色谱法[3“]。本实验建立HPLC法测定本品中祖
师麻甲素的方法，具有分离效果好、灵敏、准确等优
点，可以为进一步控制该产品的质量提供方法，也为
中．药橡胶膏剂中有效成分的测定提供一定的参考。
1仪器与试药
Waters高效液相色谱仪，包括6—600E四元梯
度泵、2996二极管阵列检测器、Millieum23色谱工作
站。祖师麻甲素对照品(中国药品生物制品检定所，
供含量测定用，批号900—200102)。山莨菪麝香膏
(奇正制药有限公司，批号为20040201、20040202、
20040203，规格为10cm×7cm／片)，不含唐古特瑞
香山莨菪麝香膏阴性对照(奇正制药有限公司)，甲
醇为色谱纯，水为重蒸水，其余试剂均为分析纯。
2方法与结果
2．1 色谱条件：色谱柱：KromasilC18(250mm×
4．6mm，5肛m)(中国科学院大连化学物理研究
所)；流动相：甲醇一0．5％磷酸溶液(30：70)；体积流
量：1．0mL／min；柱温：室温；检测波长：325nm；进
样量：10pL。在上述条件下，祖师麻甲素和样品中其
他组分色谱峰达到基线分离，祖师麻甲素与其相邻
色谱峰的分离度大于1．5；以祖师麻甲素峰计算理
论塔板数为13200，拖尾因子为1．08。同时取阴性
对照溶液进样，结果阴性对照在祖师麻甲素位置处
无相应峰出现，见图1。
2．2线性范围的考察：精密称取祖师麻甲素对照品
4．90rag，置25mL量瓶中，加85％甲醇溶液溶解并
收稿日期：2004—06—24
基金项目：国家自然科学基金资助项目(20475057)；中国科学院“百人计划”基金资助项目
作者简介：陈娟(1975一)，女，湖南邵阳人，中国科学院兰州化学物理研究所博士研究生，研究方向为天然药物分析化学。
*通讯作者Tel：(0931)4968208E—mail：shiyf，@lzb．ac．cn
万方数据
·540· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第4期2005年4月
A
．}Lc』
ooo4oo 8oo 12oo 160020oo24ooooo 400 8oo 12oo 16oo 200024ooooo 400 800 12oo 16oo 20oo 24oo
l{min
*一祖师麻甲素
*一daphnetin
图1祖师麻甲素对照品(A)、山莨菪麝香膏(B)和阴性对照(c)的HPLC图谱
Fig．1HPLCchromatogramsfdaphnetinreferencesubstance(A)，Shanlangdang
ShexiangAdhesivePlaster(B)，andnegativesample(C)
稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液。精密吸取5
mL，用85％甲醇溶液作等倍梯度稀释，得98、49、
24．5、12．25、6．125、3．0621 53125>g／mL的稀
释液。分别精密吸取对照品贮备液和稀释液各10
肛L注人高效液相色谱仪，测定祖师麻甲素峰面积
值。以峰面积值(A)为纵坐标，进样量(C)为横坐标，
绘制标准曲线，得回归方程：A一3．6622×107c+
4．7706×104，r一0．9998。结果表明，祖师麻甲素在
0．015～1．96弘g时峰面积值与进样量有良好的线性
关系。按信噪比S／N一3，最低检出限为0．002p-g。
2．3供试品溶液及阴性对照溶液的制备：取本品4
片，每片剪成8小块，除去盖衬，置250mL圆底烧
瓶中，用85％乙醇溶液水浴回流2次，每次1h，合
并提取液，水浴蒸干，残渣置50mL量瓶中，用85％
乙醇溶液溶解并加至刻度，摇匀，置冰箱(o～4℃)
中冷藏过夜，滤过，弃去初滤液。精密吸取续滤液25
mL，水浴蒸干，残渣先用30mL85％甲醇溶液分次
溶解，溶解液移人分液漏斗中，不溶部分再用30mL
环己烷微热使溶解，并入同一分液漏斗中，振摇萃
取，分取下层醇液，环己烷层用10mL85％甲醇溶
液洗涤，合并下层醇液，水浴蒸干，残渣置25mL量
瓶中，用85％甲醇溶解并加至刻度，摇匀，滤过，弃
去初滤液，取续滤液作为供试品溶液。取不含唐古特
瑞香的山莨菪麝香膏，同法制成阴性对照溶液。
2．4精密度试验：精密吸取祖师麻甲素对照品溶液
(24．5pg／mL)10弘L，重复进样5次，测定祖师麻甲
素峰面积值，计算，得其RSD为1．2％。
2．5稳定性试验：取供试品溶液(批号20040201)，
分别于0、4、8h，分别进样10弘L，测定祖师麻甲素
峰面积值，计算，得其RSD为1．4％。表明供试品溶
液在8h内稳定。
2．6重现性试验：同一批样品(批号20040201)，分
别制备5份供试品溶液，进样10弘L，测定峰面积值
并计算祖师麻甲素的含量为0．31mg／100cm2，
RSD为3．6％。
2．7加样回收率试验：取批号为20040201的样品，
分别加入祖师麻甲素对照品适量，按供试品溶液的制
备和上述色谱条件测定，计算回收率。结果见表1。
表1加样回收率试验
Table1 Resultofrecoveryt st
嚣嬲篇篇暴篱篱‘j备 婴譬?素 麻?素量 麻?素量率／五j磊／％
2．8样品测定：分别精密吸取祖师麻甲素对照品溶
液和供试品溶液各10弘L，注入高效液相色谱仪，记
录色谱图，按峰面积值用外标法计算含量，结果见
表2。
表2山茛菪麝香膏中祖师麻甲素的测定结果(n一2)
Table2 DaphnetininShanIangdangShexiang
AdhesivePlaster(一一2)
批号 祖师麻甲素／Emg·(100cm_2)]
3讨论
3．1 流动相的选择：选用了甲醇一水，甲醇一水一冰醋
酸，甲醇一水一磷酸体系，并以不同配比进行试验，结
果体系中醋酸、磷酸的存在均可抑制祖师麻甲素结
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第4期2005年4月·541·
构中酚羟基的解离，使峰形得以改善，但磷酸效果更
好，峰形尖锐对称，并且随着甲醇体积分数的降低
(60％一20％)，祖师麻甲素的保留时间增加，并与杂
质峰的分离度增大。当甲醇体积分数降低到30％
时，祖师麻甲素与杂质峰达到基线分离。为获得好的
分离效果和短的分离时间，最终选定流动相为甲醇一
0．5％磷酸溶液(30：70)。
3．2检测波长的选择：采用二极管阵列检测器对进
样后的祖师麻甲素对照品进行扫描，结果祖师麻甲
素在260、325nm处有最大吸收波长，而365nm处
的吸光度远大于260nm处的吸光度。为获得更高
的灵敏度，选择325nlTl作为检测波长。
3．3基质去除方法的考察：中药橡胶膏剂，基质难
于去除，因此，在采用HPLC法测定时，样品溶液的
处理是关键。采用85％乙醇加热回流提取的方法，
虽可使待测成分与橡胶基质分离，但在加热条件下，
有一些辅料成分会被提取出来而混入提取液。因此，
采用乙醇提取液经冰箱静置，使部分基质在低温下
凝固析出，但仍残留有部分基质，需进一步除去。进
一步采用85％甲醇一环己烷进行液液萃取，即可有
效除去基质，使溶液澄清，满足液相分析的要求。
3．4提取条件的确定：文献报道的提取溶剂多为乙
醇和85％甲醇，本实验考察了甲醇、85％甲醇、50％
甲醇、乙醇、85％乙醇和50％乙醇的提取效果，结果
85％乙醇对祖师麻甲素的提取率最高。同时，进行了
提取次数的考察，样品分别加热回流提取1、2、3、4
次(每次1h)，结果加热回流2次后，祖师麻甲素的
含量不再增加。因此，提取采用85％乙醇加热回流
提取2次，每次1h。
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HPLC法测定银杏叶片中银杏内酯的含量
张雪琴1’2，周 欣¨，袁牧1，王道平1，彭炳先1’2
(1．贵州省、中国科学院天然产物化学重点实验室，贵州贵阳550002；2．贵州大学精细化工中心，贵州贵阳550025)
银杏萜类内酯是银杏叶中除黄酮类化合物外的
另一组具有较强生物活性的化合物，即银杏萜内酯
A、B、C、M、J和白果内酯。现代药理研究表明，银杏
内酯成分除具有扩张冠状动脉血管、增加脑血流量、
改善脑营养及抗菌作用外，还有较强的血小板活化
因子抑制作用[1’2]，因此具有较高的研究开发价值。
文献报道测定银杏叶提取物中的银杏内酯成分有
HPLC—UV法∞j、HPLC—ELSD法¨J、HPLC—RID
法[5]、GC—MS法口1及HPLC—MS法[73等，但对银杏
叶片中银杏内酯的测定未见报道，故本实验采用
HPLC—RID法对不同厂家生产的银杏叶片中银杏
内酯含量进行测定，同时考察了银杏内酯的提取方
法，给银杏叶片生产厂家提供了质量控制依据。
1仪器与试剂
HPll00高效液相色谱仪，甲醇为色谱纯，水为
乐百氏纯净水，试剂均为分析纯，银杏叶片从各大药
店购买；银杏内酯A、B、C及白果内酯对照品购自中
国药品生物制品检定所，批号分别为0862—200004、
0863—9902、0864—9902和0865—9601。
2方法与结果
2．1 色谱条件：色谱柱为HypersilODS2(250
mm×4．0mm，5t-m)；流动相：23％CH30H水溶
液；体积流量：1．0mL／min；柱温：25oC；进样量：10
肚L；示差折光检测器(RID)。理论塔板数以银杏内酯
B计算不低于5000。色谱图见图1。
2．2对照品溶液的制备：分别称取经减压干燥过夜
收稿日期：200406—05
基金项目：贵阳市科学技术计划项目(2002—24)；贵州省优秀青年科技人才培养项目(2003—0311)
作者简介：张雪琴(1978一)，女，江苏泰兴人，硕士研究生，从事药物分析研究。E—mail：zxq一7812@163．corn
*通讯作者Tel：(0851)3806327E—mail：alice9800@sina．corn．cn
万方数据
HPLC法测定山茛菪麝香膏中祖师麻甲素的含量
作者： 陈娟， 师彦平
作者单位： 中国科学院兰州化学物理研究所,甘肃省天然药物重点实验室,甘肃,兰州,730000
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(4)
被引用次数： 3次

参考文献(4条)
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3.康阿龙.李伟.孙成荣.张娴 祖师麻的化学成分及制剂学研究进展[期刊论文]-西北药学杂志 2011(6)


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