全 文 ：·534· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第4期2005年4月
裹作用，使得醇沉物中留有较大量的靛玉红[6]。研究
结果表明，板蓝根醇沉物具有明显的清热解毒作用，
并对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等的生长均有明显
的抑制作用，其作用强度与同剂量板蓝根颗粒剂前
浸膏相当[7]。板蓝根醇沉物中靛玉红的量明显高于
板蓝根颗粒剂前浸膏，说明板蓝根醇沉物中含有一
定的药理活性物质。
对原料及成品的主要成分进行比较可以看出，
产品的含氮量明显高于原料。作为饲料添加剂，既含
有大量的蛋白质，菌体中又富含维生素、多种酶及辅
助因子等成分，可为动物生长提供丰富的营养。同
时，醇沉物经过发酵后有效成分靛玉红的质量分数
仍然高达0．45btg／g，残留的靛玉红也可发挥清热
解毒的作用。
醇沉物中的糖分以多糖为主，而多数微生物只
能以小分子的单糖、双糖作为碳源，因此需要对其中
的多糖进行水解，成为可发酵性糖。多糖水解分为酶
水解和酸水解两种，考虑到酸水解条件比较剧烈，温
度高，时间长，所需pH值在1．5～1．8，水解结束后
调节pH值会带入较多的金属离子，不利于菌体的
生长，因此选择条件较温和的双酶法进行水解。
高质量浓度的还原糖对酵母菌生长具有抑制作
用，应当将发酵液初始还原糖质量浓度控制在5％
以下。在对数生长后期，随着菌体的大量繁殖，发酵
液中还原糖等营养物质被耗尽，有害代谢产物不断
积累，使得菌体的生长速率下降。为了提高培养液中
的菌体数，可在对数生长后期，采用分批补料或流加
补料的方式，向发酵液中补加还原糖，以延长菌体的
对数生长期，从而获得高密度培养液。
我国是中草药种植、生产加工和消费的大国，近
年来随着对中药资源开发力度的不断加大，中药材
加工产生的废弃物也越来越多。这些药渣中的绝大
多数均作为废料被扔掉或烧毁，这其中有尚未提取
完全的有效成分及未开发的新用途。本研究中探讨
了利用板蓝根醇沉物培养益生菌的方法，不仅有效
解决了污染问题，并且使原料资源得到了更充分合
理有效的利用，提高了产品的附加值，同时为采用相
似工艺进行生产的其他中药的综合利用提供参考。
References：
[1]ZhangRZ，ZhangYW．Theresearchingprogressof
indigowoadro tEJ]．ChinTraditHerbDrugs(中草药)，
2000，31(6)：474—476．
[2]SunP，LiY，GuCZ，eta1．Microwaveextractionandcontent
determinationofGlycyrrhizauralensisFiseh．polysaccharide
EJ]．PrimaryJChinMaterMed(基层中药杂志)，2001，i5
(6)：22—23．
[33TianjinInstituteofLightIndustry，WuxiInstituteofLight
Industry．IndustrialFermentationAnalysis(212业发酵分析)
[M]．2nded．Beijing：ChinaLightIndustryPress，1997．
[43DuLX．TechnologyfIndustrialM crobiology(工业微生物
技术)[M]．Tianjin：TianjinSciencedTechnologyPress，
1992．
E53SunT S．Controllingfactorsofmicroorganicmetabolism
duringfermentation[J]．ChinCondime t(中国调味品)，1994
(10)：2—5．
[63HuangJ，HuangL．Improvementofextractionprocessof
indigowoadrootgranule口]．WestChinaJPharmSci(华西
药学杂志)，1999，14(5—6)：381—382．
[7]XuQT，DuGJ，LinHH．Pharmacologicalstudyonalcohol
depositofRadixIsatidis[J]．ChinHospP armJ(中国医院
药学杂志)，2003，23(10)：587—589．
桑叶中多糖提取分离工艺的研究
张琳华，高瑞昶，许明丽
(天津大学化工学院，天津300072)
摘要：目的优选桑叶多糖提取分离最佳工艺。方法 比较稀酸、稀碱、蒸馏水3种提取方法，采用L。(34)正交试
验，对影响多糖的水提取工艺和醇沉分离工艺的因素水平进行了研究，并比较了不同蛋白去除法对多糖提取分离
的影响。结果 桑叶多糖的最佳提取工艺为用10倍量蒸馏水在70℃下提取2次，每次1．5h。醇沉分离最佳工艺
为醇沉时乙醇体积分数80％，药液浓缩至1mL药液儋生药，pH值为4。用三氯乙酸(TCA)法去除蛋白质的效果
优于传统的Savage法。结论优选的桑叶多糖提取分离工艺稳定可行。
关键词：桑叶；多糖；提取分离；正交试验
中图分类号：R284．2 文献标识码：B 文章编号：0253—2670(2005)04—0534—04
收稿日期：2004—07—02
作者简介：张琳华(1976一)，女，上海人，1999年毕业于四川大学食品科学与工程系，现为天津大学化工学院制药工程专业2002级在读
硕士，研究方向为药用天然产物的研发。Tel：(022)27457016E—mail：elley2001@sina．corn．cu
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第4期2005年4月·535·
Extractionandisolationechnologyofpolysaccharidefrommulberryleaves
ZHANGLin—hua，GAORui—chang，XUMing—li
(SchoolfChemicalEngineering，TianjinUniversity，Tianjin300072，China)
Keywords：mulberryeaf；polysaccharide；extractionandisolation；orthogonaltest
桑叶，又名“铁扇子”，为桑科植物桑Morusalba
L．的叶，是药食两用的中药，始载于《神农本草经》，
味苦、甘，性寒，归肺、肝经，具有疏风清热、平肝明目
的功效。历代中医药书籍中记载桑叶能够治疗消渴
症，现代药理研究表明桑叶多糖具有显著的降血糖
作用，对大鼠四氧嘧啶型糖尿病有治疗效果[1’2]，因
此提取多糖成分开发降糖新药和功能性食品具有重
要的学术意义和实用价值。本实验对桑叶不同提取
工艺所得多糖进行了比较，采用正交试验法确定最
佳水提取和醇沉分离工艺，并比较了不同方法去除
蛋白质的效果，为生产提供依据。
1材料和仪器
桑叶购于天津市安舜大药房，所用试剂均为国
产分析纯。752型紫外一可见分光光度计(上海光谱
仪器有限公司)，R一201旋转蒸发器(上海申顺生物
科技有限公司)，pHS一3C精密pH计(上海雷磁仪
器厂)，ALPHA1—2真空冷冻干燥机(德国
CHRIST公司)，FA／iA型电子天平(上海精密科学
仪器有限公司)。
2方法和结果
2．1原料预处理：将桑叶粉碎、过筛，加入一定体积
95％乙醇，使溶液中乙醇的体积分数达到80％，回
流4h，间隙搅拌。回流完毕，离心分离取滤渣，滤渣
风干，备用。
2．2桑叶多糖的测定[31
2．2．1对照品溶液的制备：精密称取葡萄糖对照品
(105℃干燥至恒重)100mg，置于100mL量瓶中，
加水适量使溶解，稀释至刻度，摇匀。精密吸取10
mL置于100mL量瓶中，加水稀释至刻度，即得。
2．2．2标准曲线的绘制：准确吸取葡萄糖对照品溶
液0．05、0．10、0．20、0．30、0．40、0．60、0．80mL，用
蒸馏水补到1．00mL。分别加入4．00mL0．2％蒽
酮一硫酸试剂，迅速浸于冰水浴中冷却，各管加完后
一起浸于沸水浴中，管口加盖玻璃球，以防蒸发。自
水浴重新煮沸起，准确煮沸10rain取出，自来水冷
却，室温放置10rain左右。以同样处理的重蒸水为
空白，于620nm处测定。以吸光度值为纵坐标，葡
萄糖质量浓度为横坐标，绘制标准曲线，计算得回归
方程：Y一0．09219+6．54638X，，．一0．99975，结
果表明葡萄糖在20～100tzg／mL与吸光度呈良好
的线性关系。
2．2．3测定：精密称取桑叶多糖提取物50mg，加
水适量使溶解，蒸馏水定容至50mL量瓶中，摇匀。
精密吸取1mL，按2．2．2项下操作，测定吸光度值，
计算多糖的质量分数。
2．3浸膏得率的测定：采用重量法。精密量取等量
的提取液(m)，置于已干燥至恒重的蒸发皿中(m。)，
水浴浓缩于，于105oC干燥3h，移至于燥器中，冷却
至室温，迅速精密称定质量(mi)，按公式(m。一m。)／
m×100％计算浸膏得率。
2．4多糖提取工艺的优选
2．4．1不同提取方法比较：称取桑叶50g，分别加
入0．3mol／L稀盐酸溶液、0．5mol／L稀氢氧化钠
溶液、蒸馏水，恒温水浴中进行浸提，离心后取上清
液，减压浓缩后加入95％乙醇醇沉，离心取沉淀，将
沉淀用无水乙醇、无水乙醚、丙酮洗涤，真空冷冻干
燥，得桑叶多糖粗品，测定多糖的质量分数。各自在
相同的条件下重复操作3次，结果见表1。以稀碱作
为提取剂，浸提混合物浓稠，不易离心，加入乙醇后，
溶液无明显絮状沉淀，沉淀物不能被彻底离心，所得
沉淀物呈黏性半溶液状。稀酸浸提混合物也比较黏
稠，所得粗多糖的质量分数较低。可能是因为稀酸、
稀碱易使多糖发生糖苷键的断裂，使部分多糖发生
水解。而采用蒸馏水作为提取剂较易操作，粗多糖的
质量分数也高，故以蒸馏水作为提取剂。
表1提取方法的比较(一一3)
Table1 Comparisonofextractingmethods(秤一3)
提物剂 多糖／(mg·g_1)
稀HCl
稀Na0H
蒸馏水
2．4．2蒸馏水提取条件的优选：影响水提取多糖工
艺的因素很多，通过预备试验选择4个主要因素：加
水量(A)、提取时间(B)、提取温度(C)、提取次数
(D)，每个因素各取3个水平(表2)，在平行操作下，
按L。(34)正交试验，以多糖的质量分数、干浸膏得率
为提取效果的评价指标对水提取工艺条件进行优
化，结果见表3。对结果进行统计学处理，方差分析
结果见表4。
万方数据
·536· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第4期2005年4月
表2工艺优化的因素水平
Table2 Factorsandlevelsofoptimumtechnology
表3 L，(34)正交试验结果
Table3 ResultofL。(34)orthogonaltest
方差来源离差平方和自由度方差 F值 显著性
’。005(2，2)一19Fo．01(2，Z)一99
分析可知，以浸膏得率为评价指标，各因素对提
取效果的影响程度依次为B(提取时间)>C(提取温
度)>D(提取次数)>A(加水量)，B因素影响差异
有显著性，直观分析表明浸膏得率最高的工艺为
A。B。C。D：；以桑叶多糖的质量分数为评价指标，各
因素对提取效果的影响程度依次为B(提取时间)>
A(加水量)>D(提取次数)>C(提取温度)，B因素
影响差异也有显著性，直观分析表明桑叶多糖的质
量分数最高的工艺为A：B。CⅥD。。综合上述两项考
察指标，由于对干膏得率A。与A。相差不大，同时
应以桑叶多糖的质量分数为主要指标，故确定最佳
提取工艺为A。B3C，D。，即加水10倍量，提取时间
1．5h，提取温度70℃，提取次数2次。
2．5醇沉条件的优选：影响醇沉效果的主要因素有
乙醇体积分数(A)、药液的浓缩程度(B)、pH值
(C)。以蒸馏水为提取剂，采用水浸提最佳工艺提取
多糖，以上述3个因素为考察因素，每个因素各取3
个水平(表5)，在平行操作条件下，按L。(34)正交设
计试验，以多糖的质量分数作为醇沉效果的评价指
标(表6)。对结果进行统计学处理，得方差分析(表7)。
表5醇沉条件的因素水平
Table5 Factorsandlevelsofalcoholprecipitation
表6 L，(34)正交试验结果
Table6 ResultofL。(34)orthogonaltest
竺 A B c D(误差) 多糖X．i。
号 ／(mg．g一1生药)
表7方差分析
Table7 Varianceanalyis
Fo05(2，2)一19Fo．01(2，2)=99
结果分析可知，以多糖的质量分数为评价指标，
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第4期2005年4月·537·
各因素对醇沉效果的影响程度依次为A(乙醇体积
分数)>B(药液浓缩程度)>C(pH值)，A因素影响
差异有高度显著性，B因素影响差异有显著性，直观
分析表明多糖的质量分数最高的工艺为A。B，C。，即
醇沉时乙醇体积分数为80％，药液浓缩至1mL药
液／g生药，药液pH值为4。
2．6 验证试验：据筛选所得最佳提取工艺
A。B。C。D。和最佳醇沉工艺A，B，C。，进行正交验证试
验，得桑叶多糖质量分数为4．05mg／g生药(咒一3)。
2．7不同蛋白去除法对多糖提取的影响：醇沉时与
多糖一起沉淀下来的蛋白质对多糖测定值及纯度产
生很大的影响，一般采用Savage法除去蛋白质，蛋
白质总去除率可达89．47％，但同时多糖损失达
37．62％(表8)，且有大量不溶于水的颗粒沉淀物产
生和粗多糖颜色较深，不利于粗多糖的进一步纯化。
采用三氯乙酸(TCA)法代替Savage法，一次去除
蛋白质后，上清液中蛋白质就降至Savage法5次除
蛋白的结果，此时多糖的损失率仅为12．87％。实验
中还发现，采用TCA法处理后溶液中的色素随着
蛋白质的沉淀而部分除去。可见用TCA法去除蛋
白质的效果优于传统的Savage法。
3讨论
3．1 桑叶多糖的提取中，原料的预处理用80％乙
醇回流，目的是为了除去桑叶中单糖、双糖、低聚糖、
苷类、生物碱、氨基酸及醇溶性蛋白质等物质。
表8 Savage法与TCA工艺参数比较
Table8 ComparisonofSavage
andTCAmethodparameter
3．2桑叶多糖的水提取和醇沉分离是不同的工艺
过程，故对水提取和醇沉分离分别采用正交试验来
获得最佳水提取工艺和醇沉分离工艺是有必要的。
经过验证，优选的桑叶多糖提取分离工艺稳定可行。
3．3水提醇沉是多糖提取中较常用的方法，本实验
优化了水提取工艺和醇沉分离。目前一些新技术、新
方法如超声提取技术、微波萃取技术、酶法等也用于
多糖的提取分离中，因此有必要采取这些新技术、新
方法提取桑叶多糖并与传统方法相比较。
References：
[1]ChenFJ，LuJ，ZhangYY．Pharmacologicalstud eson
Morus(I)：EffectoftotalpolysaccharideofMorus(TPM)
oncarbohydratemetabolismindiabeticm e[J]．JShenyang
PharmUniv(沈阳药科大学学报)，1996，13(1)：24—27．
I-z]HosseinzadehH，S deghiA．Antihyperglycemiceffectsof
MorusnigraandMorusalbainmiceEJ]．PharmPharmacol
Lett，1999，9(2)：63-65．
[3]OuYZ，LiYH，SuSL，gta1．Determinationofpolysa
eeharideinl avesofMorusalbaL．i-J]．FoodSci(食品科
学)，2003，24(11)：118—120．
双黄连滴丸制备工艺的研究
李群力
(金华职业技术学院医学院，浙江金华 321000)
摘要：目的研究双黄连滴丸的制备工艺。方法 以滴制温度、冷却剂温度为主要因素，设计正交试验制备双黄
连滴丸，测定溶散时限等各项指标。结果 最佳条件以滴制温度90℃，冷却剂温度5℃为宜。结论工艺简便可
行，评分指标可靠、合理。
关键词：双黄连滴丸；正交试验；综合评分
中图分类号：R284．2 文献标识码：B 文章编号：0253—2670(2005)04—0537一03
Preparationtech ologyofShuanghuanglianDroppi gP ll
LIQHn—Li
(SchoolfMedicine，JinhuaCollegeofProfessionandTechnologyScienceEngineering，Jinhua321000，China)
Keywords：Shuanghuan91ianDroppingPill；orthogonaltest；comprehensivescore
收稿日期：2004—08—30
作者简介：李群力(1969一)，女，硕士，高级工程师，从事新药的研究开发。
万方数据
桑叶中多糖提取分离工艺的研究
作者： 张琳华， 高瑞昶， 许明丽， ZHANG Lin-hua， GAO Rui-chang， XU Ming-li
作者单位： 天津大学化工学院,天津,300072
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(4)
被引用次数： 24次

参考文献(3条)
1.Chen F J;Lu J;Zhang Y Y Pharmacological studies on Morus (Ⅰ):Effect of total polysaccharide of
Morus (TPM)on carbohydrate metabolism in diabetic mice[期刊论文]-沈阳药科大学学报 1996(01)
2.Hosseinzadeh H;Sadeghi A Antihyperglycemic effects of Morus nigra and Morus alba in mice 1999(02)
3.Ou Y Z;Li Y H;Su S L Determination of polysa ccharide in leaves of Morus alba L[期刊论文]-食品科学
2003(11)

本文读者也读过(1条)
1. 刘咏 桑叶多糖的提取及纯化实验研究[期刊论文]-食品科技2005(1)

引证文献(24条)
1.胡文静.刘宝瑞.钱晓萍.邹玺.禹立霞 正交方法优选党参多糖的提取工艺[期刊论文]-南京中医药大学学报（自然
科学版） 2007(1)
2.项秀娣.张乐.戴瑜来 桑叶的降血糖活性成分及其作用机制研究进展[期刊论文]-安徽农学通报 2012(21)
3.李宏睿.王新.张文波.颜贤仔 艾叶多糖提取率影响因素分析及提取条件优化[期刊论文]-植物资源与环境学报
2012(2)
4.马洪波.宋春梅.张岚.葛红娟 桑叶多糖的碱性提取及含量测定[期刊论文]-安徽农业科学 2011(3)
5.邓锷.杨军.王立强.王光碧 扯根菜多糖的提取[期刊论文]-中药材 2009(1)
6.李文超.李俊龙.沙伏生.王勇.陈会良 菊花多糖提取工艺研究[期刊论文]-安徽农业科学 2010(28)
7.王子尧.陈彦.孙文秀.王述声.李绍飞 超滤法分离丹皮多糖的研究[期刊论文]-膜科学与技术 2009(4)
8.林江博.李淑芬.杨鸿玲.贾冬冬 ZTC1+1天然澄清剂在桑叶多糖提纯中的应用[期刊论文]-化学工业与工程
2008(1)
9.韩丽.欧阳臻.李晓昕.杨凌 茅苍术多糖的提取工艺研究[期刊论文]-中成药 2007(12)
10.李勇.胡兴明.邓文.叶楚华 桑叶功能活性物质提取工艺研究进展[期刊论文]-中国蚕业 2011(2)
11.王丰俊.王建中.郝俊.郭晓萍.呼晓姝 响应面法优化超声波辅助提取桑叶多糖的工艺研究[期刊论文]-北京林业
大学学报 2007(5)
12.谢美娜.范慧芬.陈朝喜.黄志宏 温度对灰兜巴粗多糖提取率的影响[期刊论文]-西南民族大学学报（自然科学版
） 2013(5)
13.刘军海.黄宝旭.许恩庆 桑叶多糖提取工艺研究[期刊论文]-中国食品添加剂 2009(5)
14.韩丽.欧阳臻.杨凌.张磊 茅苍术多糖的分析[期刊论文]-中药材 2008(12)
15.金春雁.张玲.高兴.赵东访.吴国荣 桑叶酸性蛋白多糖(APFM)抗氧化作用的实验研究[期刊论文]-食品科学
2007(2)
16.樊亚鸣.黄晓兰.陈永亨.廖子英.林海清 春砂仁多糖的提取及组分分析[期刊论文]-广州大学学报（自然科学版
） 2006(4)
17.周静华.李汉伟 正交试验优选大理百合多糖提取的工艺[期刊论文]-食品研究与开发 2010(4)
18.樊亚鸣.陶文琴.高绍中.黄晓兰.陈怡莎.艾小红.陈永亨 苏铁蕨多糖的提取及其组分分析[期刊论文]-广州大学
学报(自然科学版) 2008(6)
19.杨清香.潘锋.童军茂 阿魏菇子实体粗多糖提取的研究[期刊论文]-食品科技 2007(12)
20.王储炎.范涛.代君君 桑叶的化学成分、生理功能及其在工业中的应用[期刊论文]-中国食品添加剂 2008(2)
21.王冬梅.宋旭辉.李娟丽.孙世国 卷叶黄精多糖提取分离工艺研究[期刊论文]-西北林学院学报 2006(6)
22.申湘忠 粽叶中多糖的提取分离和光谱分析[期刊论文]-湖南农业科学 2011(1)
23.李娟丽.王冬梅.朱玮.樊金栓 卷叶黄精多糖精制工艺的研究[期刊论文]-西北林学院学报 2007(4)
24.喻谨.岳永德.汤锋.姚曦.王进 响应面法优化微波辅助提取竹叶多糖工艺研究[期刊论文]-安徽农业大学学报
2012(3)


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