全 文 ：·512· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第4期2005年4月
制剂与质量
葛根芩连汤配伍规律的研究
罗佳波，谭晓梅，余林中，戴开金，伍杰勇，吴昭晖
(第一军医大学中药制剂重点实验室，广东广州 510515)
摘 要：目的研究葛根芩连汤不同配伍对主要化学成分、药理效应变化的影响，综合分析该方的配伍规律。方法
采用HPLC法测定各主要成分，考察HPCE指纹图谱的变化，药理指标采用体外抑菌、体内抑菌、解热试验、抗腹泻
试验和病理损害模型。结果葛根和黄连降低黄芩苷的含量，黄连降低甘草酸的含量，葛根、黄芩、甘草使小檗碱的
含量降低。配伍产生的沉淀，经分析含有黄芩苷、小檗碱、葛根素、甘草酸。各药配伍组合中，以黄连的体内外抑菌活
性最强，不同的菌株强度有差异；解热试验中，最佳组合为葛根和黄芩；在抗腹泻试验中，最佳组合为黄连和炙甘
草。结论从治疗“协热下利”证来说，全方4味药组合最佳。
关键词：葛根芩连汤；配伍；抑菌；解热；抗腹泻
中圈分类号：R286．02；R286．6文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2005)04—0512一07
CompatibleregulationofGegenQinlianDecoction
LUOJia—bo，TANXiao—mei，YULin—zhong，DAIKai—jin，WUJie—yong，WUZhao-hui
(KeyLaboratoryofChineseMateriaMedicaPh rmaceutics，FirstMilita yMedicalUniversity，Guangzhou510515，China)
Abstract：ObjectiveTos udytheinfluenceo hemicalcomponentsandpharmacologicaleffectof
GegenQinlianDecoction(GQD)bydifferentcompatibilitywhoser gulationwasa alyzedcomprehen—
sively．MethodsUsingHPLCmethodto eterminethecontentsofmaincomponentsandHPCEto
observethfingerprintchangesofGQD．Thep armacologicaleffectsofinvivoandinvitrobacteriostasis，
antipyretic，andantidiarrheawertestedinanimalpathologicdamagemodelandtheirindiceswere
calculatedbystatistics．ResultsadixPuerariaeandRhizomaCoptidismadebaicalindecrease，Rhizoma
Coptidismadeglycyrrhizinicacidecrease，RadixPuerariae，RadixScutellariae，andR dixGlycyrrhizae
madeberberinedecrease．Therewersomebaicalin，berberine，puerarin，andglycy rh zinicac di the
sedimentationsofcompatiblemixture．RhizomaCoptidishadthestrongestbac eriostasis，whiled fferent
bacteriostasiceffectstovariousstrains；RadixPuerariaecombinatedwithRadixScutellariaehadthbest
antipyreticffect；RhizomaCoptidiscombinatedwithRadixGlycyrrhiaePreparatahadthebest
antidiarrheaeff ct．ConclusionGQDwiththeabovefourcombinationherbalmedicinessthebesttothe
diarrheaduetointeriorcoldandexteriorheat．
Keywords：GegenQinlianDecoction(GQD)；compatibility；bacteriostasis；antipyreticactivity；
antidiarrhea
中药配伍理论是中医药理论的精华之一，开展
方剂配伍规律的现代研究对于继承和发展中药配伍
理论具有重要理论意义，同时也为更有效地指导临
床和中药新产品研制提供依据[1]。葛根芩连汤为医
圣张仲景名方，出自《伤寒论·太阳篇》，有解表清
里、升清止利之功。本方由葛根、黄连、黄芩、甘草4
味中药组成，方中含多个常用药对及常见配伍，并在
方剂配伍中出现使用频率最高的甘草，因此，选该方
进行配伍研究极具代表性。本实验采用正交设计对
葛根芩连汤的不同配伍进行化学、药理方面的研究，
从化学成分的变化与配伍、药理效应间的内在联系，
阐明葛根芩连汤的配伍内涵。
1仪器与试药
美国惠普HPll00高效液相色谱仪(紫外一可见
光检测器、二级管阵列检测器)，270A—HT型高效
毛细管电泳仪(美国AppliedBiosystem公司)，未涂
层融硅毛细管(62cm×50p．m，有效长度40cm)(河
北永年锐沣色谱器件有限公司)，pH计(美国
收稿日期：2004—06—20
基金项目：国家自然科学基金面上重点资助项目(39970886)；广东省自然科学基金资助项目(001070)；军队“十五”重点课题(012053)
作者简介：罗佳波(1947～)，男，黑龙江佳木斯人，教授，博士生导师，现任第一军医大学中药制剂重点实验室主任，主要从事中药配伍规
律、组方原理的研究及中药新药的开发研究。Tel：(020)61648266E～mail：lib@fimmu．corn
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第4期2005年4月·513·
ORION，410A型)；甲醇、乙腈为色谱纯，其他试剂
均为分析纯；葛根素、黄芩苷、小檗碱、甘草酸对照品
(中国药品生物制品检定所)。埃希氏大肠杆菌
(ATCC44113)、肺炎链球菌(ATCC31004)、金黄色
葡萄球菌(ATCC26001)由本校微生物教研室提供，
福氏2a志贺氏菌(ATCC51573)由中国药品生物制
品检定所提供。普通昆明种小鼠、Wistar大鼠、新西
兰兔由第一军医大学实验动物中心提供。葛根、黄
芩、黄连、甘草(蜜炙)药材由广东省药材公司提供，
由本校炮制教研室奚林明讲师鉴定。
2方法与结果
2．1 配伍对葛根芩连汤中主要效应成分的影响
2．1．1黄芩苷测定[2]：色谱柱为ZorbaxODSC18柱
(250mm×4mm，5pm)；流动相：甲醇一0．2％磷酸
水溶液(48：52)；体积流量：1．0mL／min；柱温：室
温；检测波长：280nm。标准曲线的回归方程为y一
15．8672 x一4．5347，，-一0．999，线性范围为
12．04～96．321ag／mL。
2．1．2 葛根素测定[3]：色谱柱为ZorbaxSn—C，。柱
(250mm×4mm，51am)；流动相：甲醇一乙腈一水
(12：8：80)；体积流量：1．0mL／min；柱温：室温；
检测波长：250nlTl。标准曲线的回归方程为Y一
38．7452 x一2．1845，r一0．999，线性范围为
10．01～160．161ag／mL。
2．1．3 小檗碱测定[4]：色谱柱为ZorbaxSB—C，8柱
(150ITlm×4．6mm，5肛m)；流动相：乙腈一0．2mol／
L乙酸铵(0．01mol／LKH。PO。+0．2％三乙胺)
(47：53)；体积流量：0．8mL／min；柱温：室温；检测
波长：346nm。标准曲线的回归方程为y一19．5689
x一9．5649，厂一0．999，线性范围为11．96～
95．681ag／mL。
2．1．4 甘草酸测定口]：色谱柱为Zorbax柱(250
mm×4．6mm，10pm)；流动相：甲醇一0．2mol／L醋
酸铵一冰醋酸(67：33：1)；体积流量：1．0mL／min；
柱温：室温；检测波长：250nm。标准曲线的回归方
程为Y一883．4925X一20．6502，r一0．9999，线性
范围为1．06～6．361ag／mL。
2．1．5正交设计：选葛根(因素A)、黄连(因素B)、
黄芩(因素C)、甘草(因素D)作为4个因素，选用药
(+)和不用药(一)为2个水平，并考虑两两交互作
用的L，。(216)，因素水平见表1，正交试验结果见表2。
2．1．6葛根芩连汤及各配伍组合煎剂的制备：根据
《伤寒论》中葛根芩连汤的配比及煎煮特点，葛根先
煎20min，再加经水浸泡30min的其他饮片共煎2
表1因素水平
Table1 Factorsandlevels
表2各配伍煎液的pH值、有效成分煎出■以及沉淀
中的有效成分
Table2 pHValue，effectivecomponentyieldof
compatibledecoctions，andeffective
componentsinsedimentation
有效成分的煎出量／(g·剂一1)配伍——
葛根素黄芩苷小檗碱甘草酸
沉淀中有效成分的量／(g·剂一1、
．．
葛根素黄芩苷小檗碱甘草酸
——pH值
次，每次30min，趁热纱布粗滤去渣，混合两次药
液，90℃水浴中定容至1000mL。取10mL，用70
mL甲醇超声提取30min，滤过，洗涤，用甲醇定容
至100mL。精密吸取5mL，用流动相定容于10mL
量瓶中，备用。其余配伍组合均参照此法制备。
2．1．7葛根芩连汤各配伍中主要成分的测定：结果
见表2。
2．1．8各配伍煎液的pH值及沉淀中黄芩苷、葛根
素、小檗碱、甘草酸的测定：各配伍组合药液放冷，离
心，上清液用pH计测pH值。沉淀用水洗3次，60
℃干燥至恒重，称重。精确称取约0．05g，加70％甲
醇40mL超声提取30min，滤过，洗涤3次，定容至
50mL，精密吸取5mL，用流动相定容于10mL量
瓶中，测定，结果见表2。
可见不同配伍中，黄芩、黄连、甘草对葛根素，甘
草对黄芩苷，葛根、黄芩对甘草酸的量没有影响；而
葛根、黄连对黄芩苷，葛根、黄芩、甘草对小檗碱，黄
连对甘草酸的量均有降低作用；含黄连、黄芩的配伍
煎液中产生的沉淀中含有大量的黄芩苷。各配伍煎
液，除黄连外，pH值比单煎液在不同程度上降低。
2．2 配伍对葛根芩连汤指纹图谱的影响
万方数据
·514· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第4期2005年4月
2．2．1葛根芩连汤全方指纹图谱的建立：电解质溶
液由30mmol／L磷酸盐和40mmol／L硼酸盐组
成；未涂层融硅毛细管(62cmX50tLm，有效长度40
cm)；分离电压22kV；检测波长254nm；温度30
℃。取全方供试品溶液1份，连续进样5次，测定主
要峰相对迁移时间和峰面积，结果表明各峰面积相
对恒定，精密度试验的RSD<5％；全方供试品溶液
分别在0、4、8、12、24h进样，测定主要峰相对迁移
时间和峰面积，结果表明各峰面积相对恒定，稳定性
试验的RSD<5％；按处方配比制得全方供试品溶
液5份，进行重现性试验，结果表明5批样品的各峰
12 15 18 21 24 27
t／rain
全方HPCE分离图
迁移时间和峰面积相对恒定，RSD<5％。全方高效 Fi2．1HPCEchromatogramofGQD
毛细管分离结果见图1。 要成分的相互影响结果见表3。
2．2．2配伍对葛根芩连汤指纹图谱的影响：取各配 可见黄连减小黄芩的q。峰和q。峰(黄芩苷)的
伍组合煎剂，按2．2．1项下方法测定，不同配伍中主 峰面积，对黄芩q。、q。、q。峰没有影响；葛根可减小黄
表3配伍对成分(有效成分及未确定成分)的影响
Table3 Effectofdifferentcompatibilityoncomponents(effectiveandunconfirmedco ponents)
峰 葛根 黄连 黄芩 甘草 葛根+黄芩 葛根+黄连 葛根+甘草 黄连+甘草 黄连+甘草 黄芩+甘草
尸>0．05 P>0．05 P>0．05P>0．05 P>0．05 P>0．05
P=0．041 P=0．017P=0．05P>0．05 P>0．05 P>0．05
P>0．05 P>0．05 P>0．05P>0．05 P>0．05 P>0．05
P=0．031 P=0．024P>0．05P=0．038 P>0．05 P>0．05
尸>0．05 P>0．05 尸>0．05 P>0．05P>0．05 P>0．05
P>0．05尸>0．05 P>0．05 P>0．05P>0．05 P>0．05
尸>0．05 P>0．05尸>0．05P>0．05P>0．05 P>0．05
P>0．05P=0．05 P>0．05 P>0．05P>0．05 P>0．05
P=0．048P=0．027 P>0．05 P>0．05P>0．05 P>0．05
P>0．05P>0．05 P>0．05 P>0．05P>0．05P>0．05
P>0．05P>0．05 P>0．05 P>0．05P>0．05P>0．05
P>0．05P>0．05 P>0．05 P>0．05P>0．05P>0．05
P>0．05P>0．05 P>0．05 P>0．05P>0．05P>0．05
P>0．05P>0．05 P>0．05 P>0．05P>0．05P>0．05
P>0．05P>0．05 P>0．05 P>0．05P>0．05P>0．05
配伍与单煎液比较：P>o．05对该成分无影响，P
响不显著；葛根、黄芩、甘草减小l。(小檗碱)峰面积； 2．3配伍对葛根芩连汤药理作用的影响
葛根、黄芩及两者交互作用均能减小l。峰面积；甘
草对黄连l。、l。、l。峰面积没有影响；葛根、黄芩对l。、
1。峰面积，葛根、黄芩的交互作用对l。、l。、1。峰面积，
甘草与葛根、甘草与黄芩的交互作用对黄连l，、l。、
1。、l。各峰面积均没有显著性影响。黄连、黄芩、甘草
对葛根中g。(葛根素)峰面积没有影响，葛根、黄芩、
甘草使12(小檗碱)峰面积减小，黄连、葛根使黄芩中
q。(黄芩苷)峰面积减小，甘草对q。(黄芩苷)没有显
2．3．1体外抑菌试验[6~8]：选择埃希氏大肠杆菌、
肺炎链球菌、金黄葡萄菌和福氏2a志贺氏菌为研究
对象，采用试管二倍稀释法和平皿打孔法，以最低抑
菌浓度和抑菌圈大小来衡量抑菌强弱，结果见表4。
可见，各配伍组合中，以黄连的体外抑菌活性最
强，其次是黄芩，不同的菌株强度有差异。炙甘草对
金黄葡萄球菌与福氏2a志贺氏菌有弱的抑菌活性，
葛根对金黄色葡萄球菌有弱的抑菌活性，在与黄连
配伍中，其余3药均起拮抗作用。其中对埃希氏大肠
9
1图
63O
)
)
碱
苷
素
檗
芩
根
小
黄
葛
h
b
k
k
吼
啦
吼
吼
吣
豇
助
酗
肌
船
骱
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第4期2005年4月·515·
表4各配伍的抑菌作用
Table4 BacteriOstaticeffectofdifferentcompatibility
肠杆菌作用中，炙甘草对黄连的拮抗作用强于葛根，
炙甘草亦拮抗黄芩，葛根则无明显影响；对肺炎链球
菌的作用中，对黄连的拮抗作用炙甘草强于葛根，而
炙甘草、葛根对黄芩均无明显影响；对福氏2a志贺
氏菌的影响中，对黄连拮抗作用，黄芩强于葛根与炙
甘草。炙甘草对黄芩有拮抗作用，葛根则对黄芩无明
显作用。对金黄色葡萄球菌中，葛根与炙甘草对黄芩
无明显影响；葛根与炙甘草呈加合作用。
2．3．2抗腹泻试验[9~12|：取正常小鼠给不同配伍
组合药物后以墨汁灌胃，观察墨汁在体内的小肠推
进率；以番泻叶煎剂制造腹泻模型小鼠，以腹泻指数
为指标观察给不同配伍组小鼠的生理反应，结果见
表5，6。
可见，在墨汁小肠推进率的试验中，以黄连与炙
甘草的作用为主，葛根与黄芩均拮抗黄连的作用，炙
表5不同配伍对正常小鼠小肠推进率的影响(一一10)
Table5 Effectofdifferentcompatibilityonsmallintestinepropellabler teinnormalmice(n—10)
甘草增强黄连的作用；对腹泻小鼠腹泻指数的影响，
起主要作用的为黄连，而葛根与炙甘草能增强黄连
作用，黄芩拮抗黄连。
2．3．3解热试验[1引：以皮下注射埃希氏大肠杆菌
悬浮液制造发热大鼠模型，然后ig不同配伍组合的
药物，测量体温(肛温)，观察不同配伍对大鼠的影
响，并观测6h体温反应指数最大体温反应高度，结
果见表7，8。
可见，对于6h体温反应指数，黄芩有明显降低
该指标的作用，而黄连、炙甘草对其有明显的拮抗作
用，葛根对黄芩有增强的作用。黄连不利于该指标的
改善，炙甘草对葛根、黄连均有拮抗作用。对平均最
大体温反应高度指标，与黄芩配伍，黄连、炙甘草均
表现为拮抗作用，而葛根则表现为增强黄芩的作用。
2．3．4菌痢模型试验[13’1引：将健康新西兰兔接种
福氏2a志贺氏菌以制造菌痢模型，ig不同配伍组合
药物，连续3d，然后处死，进行尸检。以结肠内容物
细菌定量记数、结肠组织内细菌定量记数、结肠炎指
万方数据
·516· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第4期2005年4月
105．2273
101．0524
4．1749
1．222l士0．290
1．2238±0．355
0．3327±0．230
0．8673i0．船l
1．3119土0．336
1．606±0．371
2．103±0．446
2．0920土0．401
1．4248±0．254
1．215l±0．312
0．150±0．318
0．2200±0．314
1．498l±0．280
1．5953士o．212
1．9048±0．476
1．861l±0．521
表7不同配伍对发热大鼠解热的6h体温
反应指数的影响(j±s，聆一5)
Table7 Effectofdifferentcompatibilityonbod
temperatureresponseindexoffebrilerat
after6hantipyreticac on(；士s，露一5)
试验号 体温反应指数 试验号 体温反应指数
1 6．50±1．52 9 7．66土1．61
2 5．14士n．66 lO 7．50±1．76
3 8．44±1．34 11 5．68±0．65
4 7．37士0．26 12 5．74±1．90
5 4．64土1．29 13 5．93士0．73
6 4．06土0．94 14 5．62土1．52
7 6．88土1．87 15 4．48土1．52
8 6．99±0．92 16 9．84士0．69
表8不同配伍对平均最大体温反应高度
的影响(；士s，咒一5)
Table8 Effectofdifferentcompatibilityonaveragetop
bodytemperatureresponseheight(x±s，露一5)
试验号 体温反应指数／T 试验号 体温反应指数／T
1 1．42土0．55 9 1．64士O．24
2 1．31土0．14 10 1．53士O．28
3 1．76土0．33 11 1．27±0．30
4 1．68土0．17 12 1．36土0．35
5 1．12土0．17 13 1．42土0．27
6 0．94士0．10 14 1．34±0．34
7 1．5l士0．24 15 1．18±0．34
8 1．54士0．17 1 6 1．81士0．14
数为指标考察不同配伍的影响。结果见表9～11。
可见，对于结肠内容物细菌定量记数指标，黄
连、黄芩均能明显减少肠内容物细菌的记数，葛根与
甘草则作用不明显。黄芩拮抗黄连的作用，葛根、炙
甘草对黄连、黄芩的作用均无明显影响。对于结肠组
织内细菌定量记数指标，同样以黄连、黄芩的作用最
明显，葛根、炙甘草无明显作用。黄芩与黄连配伍后
互相拮抗，但当炙甘草、葛根与黄芩、黄连药对配伍
时，两者拮抗作用消失。葛根、炙甘草对黄芩或黄连
则无明显作用。从结肠炎指数指标来看，炙甘草则可
以明显降低结肠炎指数，而葛根、黄芩、黄连则作用
不明显，它们对炙甘草的作用也无明显影响。
3讨论
3．1从不同配伍中4个有效成分测定结果可见，各
配伍中葛根素的量变化无显著性差异；黄芩苷、小檗
碱、甘草酸的量以各单味药单煎液的量最高，全方的
3种成分分别占单煎液的67％、59％、70％。药理实
验结果显示：各药配伍组合中，以黄连的体内外抑菌
活性最强，不同的菌株强度有差异；解热试验中，最
佳组合为葛根黄芩；在抗腹泻试验中，最佳组合为黄
连炙甘草。从化学成分和药理指标研究结果综合分
析可知，葛根与黄芩配伍中具有解热作用的葛根素、
黄芩苷的量分别为最高和次高，两药具有协同作用，
在各配伍组中解热效果最佳；黄连单煎液中小檗碱
的量比其他配伍组均高，在抑菌指标上作用最强；黄
连与甘草配伍，小檗碱、甘草酸的量仅比单煎液低，
抛ⅢⅢ∞％”i
m
m
m∞睨0}呲m㈣雌雌0
9
7
r呲Ⅲ㈣∞％0i拼m㈣眈∞加i㈣㈣㈣％胛曲}螂叭m蛐；宝1l㈣m撕毗踮q；姗ⅢⅢ∞巧弘}螂娜批蛆U¨i螂m㈣加％¨i㈣掰拟帱∞0i湖mm骗黔他i哪叭跏昕％0
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万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第4期2005年4月·517·
而抗腹泻作用、体内抑菌、降低结肠炎指数方面仍以
黄连甘草为主；但全方同时所具有的解热、体内外抑
菌、抗腹泻等作用，是各单味药及其他配伍组所不具
备的，所以从治疗“协热下利”证来说，全方4味药组
合最佳。同时进一步证明4味药的主要有效成分分
别代表其主要功效。
3．2尤怡《伤寒贯珠集》分析葛根芩连汤的解热作
用：“葛根解肌于表，芩连解热于里；故治表者，必以
葛根之辛凉；治里者，必以芩连苦寒也”。葛根芩连汤
抗腹泻作用，徐大椿《伤寒类方》中认为“芩连甘草为
治痢之主药”，吴谦《医宗金鉴》云：“方中四倍葛根以
为君，芩连甘草为之佐，其意专解阳明之肌表，兼清
胃中之里热，此清解中兼解表里法也”。这些论述与
该配伍规律药效实验结论基本一致。
万方数据
·518· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第4期2005年4月
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万方数据
葛根芩连汤配伍规律的研究
作者： 罗佳波， 谭晓梅， 余林中， 戴开金， 伍杰勇， 吴昭晖， LUO Jia-bo， TAN Xiao-mei
， YU Lin-zhong， DAI Kai-jin， WU Jie-yong， WU Zhao-hui
作者单位： 第一军医大学,中药制剂重点实验室,广东,广州,510515
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(4)
被引用次数： 12次
参考文献(14条)
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本文读者也读过(10条)
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6. 曾佩雪.梁光义.周飞.靳凤云.冼福荣 葛根芩连汤分煎与合煎汤剂中黄芩苷的含量[期刊论文]-中国药学杂
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引证文献(12条)
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6.苗海东.文颖娟.张喜德.许爱英.王江 葛根芩连汤及其拆方对UC大鼠MIL、P选择素作用的实验研究[期刊论文]-陕
西中医学院学报 2011(3)
7.章军.刘宇政.王跃生.刘安 HPLC同时测定葛根芩连汤中12个有效成分的含量[期刊论文]-中国实验方剂学杂志
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8.周斌.张铁军.高文远.陈海霞.张家欣 中药复方配伍规律及药效物质基础研究进展[期刊论文]-中草药 2006(11)
9.王建农.张广德.余仁欢.周彩云.顾士萍.关频.邵立军 从同方汤散临床疗效差异思考传统中药剂型的深刻内涵[期
刊论文]-中国实验方剂学杂志 2010(4)
10.王京龙.孙秀梅.王英姿.周莹.张超 二黄汤半仿生提取药材组合方式的优选[期刊论文]-中成药 2013(7)
11.陈丽红.唐于平.王强 葛根芩连汤的现代研究进展[期刊论文]-中草药 2010(4)
12.朱伟.陈可冀.徐筱杰 计算机药物虚拟筛选技术在中医药领域中的应用前景[期刊论文]-中国中西医结合杂志
2007(3)
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