全 文 ：·764· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第5期2005年5月
相当。
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RP—HPLC法测定墓头回中的齐墩果酸
曹艳萍1，李翠芹2+
(1．榆林学院化学系，陕西榆林719000；2．西安交通大学药学院，陕西西安710061)
墓头回别名箭头风、臭罐子等，系败酱科败酱属
植物异叶败酱PatriniaheterophyllaBunge或糙叶
败酱P．scabraBunge，分布于陕西、河南、河北、山
西等地。根及全草入药口]。有消肿排脓、祛瘀止痛的
功效，临床上用于治疗急性阑尾炎初起、瘰疬、无名
肿痛、宫颈糜烂、跌打损伤、骨折等症[2]。现代药理研
究表明，该植物对体内、外肿瘤癌细胞有强大的杀伤
作用[3]。对该植物的生药学研究和化学成分研究表
明，有效成分主要是以齐墩果酸苷元和常春藤苷元
组成的三萜皂苷[4j。齐墩果酸具有降低谷丙转氨酶，
促进细胞再生，防止肝硬化，抗炎和强心作用，是治
疗肝炎的有效成分[5]。已有文献报道，用比色法和薄
层扫描法[6川]测定齐墩果酸。但用RP—HPLC测定
墓头回中齐墩果酸未见报道，本实验建立了用RP—
HPLC法测定墓头回中齐墩果酸的方法，并对5种
不同产地墓头回植物中齐墩果酸进行了测定，为墓
头回药材的质量控制及合理使用提供了依据。
1仪器、试剂与药品
日本岛津高效液相色谱仪(包括Lc一10ATvp
泵、SPD--10AvP紫外检测器和SPD—M10Avp二
极管阵列检测器)，7725型手动进样阀(美国
Rneodyne公司)，ANASTAR色谱工作站(奥泰科
技有限公司)，KQ一250B型超声波清洗器(昆山市
超声仪器有限公司)；齐墩果酸对照品购自中国药品
生物制品检定所(批号0709—9803)，甲醇为色谱纯，
实验用水均为二次蒸馏水，墓头回药材购于各地药
店或直接从产地收集，均由西安交通大学药学院牛
晓峰教授鉴定。
2方法与结果
2．1色谱条件：KromailODS色谱柱(150mlTl×
4．6mlTl，0．5um)；流动相为甲醇一0．05％冰醋酸水
溶液(88：12)；体积流量为1．00mL／min；柱温为
室温(26℃)；检测波长为225DID．；进样量20弘L；理
论板数按齐墩果酸峰面积计算应不低于2000。在该
色谱条件下齐墩果酸的保留时间是11．3min。
2．2对照品溶液的制备：精密称取干燥至恒重的齐
墩果酸对照品50．0mg，置于25mL量瓶中，加甲醇
15mL超声处理5rnin，用甲醇稀释至刻度，摇匀得
质量浓度为2mg／mL对照品储备液。
2．3供试品溶液的制备：精密称取干燥至恒重的墓
头回粉末(100目)1g于150mL三角瓶中，加入
10％硫酸30mL，沸水浴中水解4h，放冷后滤过，滤
渣用水洗至中性，45℃烘干，精密加入氯仿50mL，
超声提取50min，补足损失质量，滤过，精密量取续
收稿日期：2004—07—17
作者简介：曹艳萍(1958一～)，女，陕西榆林人，副教授，主要从事药物分析和有机化学研究。
Tel：(0912)3891144E—mail：lcql6@mailst．xjtu．edu．en
*通讯作者Tel：(029)82655142Fax：(029)82655451
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第5期2005年5月。765。
滤液25mL，蒸干后加甲醇溶解，稀释并定容至10
mL，摇匀，离心取上清液即得。
2．4标准曲线和线性范围：分别从齐墩果酸对照品
储备液中精密吸取0．25、0．5、1．0、2．0、3．0、4．0、
5．0mL于10mL量瓶中，以甲醇稀释至刻度，摇
匀，依次进样20pL，重复3次，在选定色谱条件下
进行测定，记录色谱图。以峰面积对质量浓度进行线
性回归，得回归方程：y一1．3589X一0．4543，r一
0．999。线性范围为1．o～20Fg。
2．5精密度试验：精密吸取对照品溶液20pL，按
选定的色谱条件进样测定，重复5次，结果齐墩果酸
对照品峰面积的RSD为1．34％。
2．6重现性试验：精密称取烘至恒重的榆林墓头回
粉末(100目)1g5份。按“2．3项方法”进行平行提
取，在选定色谱条件下进行测定，结果齐墩果酸对照
品峰面积的RSD为1．90％。
2．7稳定性实验：取供试品溶液，按每2h进样1
次，测定峰面积，结果供试品溶液在8h内稳定，齐
墩果酸峰面积的RSD为0．63％(咒一5)。
2．8 回收率试验：精密称取已知含量的榆林墓头回
干燥粉末(100目)0．5g，加入适量齐墩果酸对照品
液，按供试品测定方法提取测定，计算回收率，结果
平均回收率为99．4％，RSD为0．2％(咒一5)。
2．9 含量测定：对来自不同产地的墓头回各取3
份，按“2．3”项方法进行提取，在选定色谱条件下测
定，按外标两点法以峰面积计算齐墩果酸的质量分
数，结果见表1。色谱图见图1。
表1 5种墓头回齐墩果酸的含量(j士s，n=3)
Table1 Oleanolicac dinfivekindsofP．
heterophylla(j士s，n一3)
陕西榆林采0．54土0．040．30-k0．050．15土0．02·47土0·05
陕西太白县采0．56士0．050．31士0．03．16±0．03一
济南购买0．55士0．03一 一 一
南京购买0．32土0．01一 一 一
河南洛阳购买0．30士0．02一 一0．20±0．04
3讨论
3．1色谱条件的选择：文献中探索了RP—HPLC法
的流动相，比较了甲醇一水不同比例；甲醇一水一冰醋
酸不同比例口]。结果发现，选用甲醇一水一冰醋酸为流
动相进行分离，效果较好。甲醇对分离极性差别较大
的化合物起重要作用，体积分数过高或过低，分离效
果均不理想，冰醋酸对杂质的分离很重要，H+可改
变流动相性质，使分离效果好；改变水和冰醋酸用
t／nm
a一齐墩呆酸
a—oleanolieacid
图1 齐墩果酸对照品(A)和墓头回样品(B)
的HPLC图谱
Fig．1HPLCchromatogramsfoleanolicacid(A)
andP．heterophyllasample(B)
量，使基线分离，且保留时间适中。本实验建立的配
比，样品峰保留时间适中，峰形较好并可与杂质完全
分离。
对齐墩果酸进行紫外扫描，选择最大吸收峰波
长，结果表明紫外区有3个吸收峰，选择最大吸收峰
225nm为检测波长较205和210nm灵敏。
3．2提取方法的选择：考察了水解时间，比较了超
声、回流、索氏3种提取方法和不同的溶剂用量对提
取率的影响，结果以10％硫酸水解4h，氯仿超声提
取50min，提取率高且操作简便。比较了先用10％
硫酸水解后氯仿提取与先甲醇提取，滤渣用10％硫
酸水解后氯仿提取，结果前者操作较为快速、简便，
而且提取效果好。
3．3样品分析：本实验对不同产地的墓头回生药进
行了考察，结果表明齐墩果酸与产地和植物部位有
关，以陕西太白县产墓头回含量最高，陕西榆林产墓
头回全草中齐墩果酸质量分数(o．47％)远高于河南
洛阳的(o．20％)。根部的齐墩果酸含量高于茎部，叶
子中含量最低，这为墓头回的用药和开发利用提供
了科学依据。
3．4 根据本品测定的结果，RP—HPLC法可以较好地
分离出墓头回的主成分峰和杂质峰，能反映样品的真
实，方法简便、准确、灵敏，有利于药品质量的控制。
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HPLC法测定蔓荆子中的紫花牡荆素
田振坤，王连芝，尹永琴，闰广利
(黑龙江中医药大学中医药研究部，黑龙江哈尔滨150040)
蔓荆子为马鞭草科植物单叶蔓荆Vitextrifolia
L．var．simplicifoliaCham．或蔓荆V．trifoliaL．
的干燥成熟果实，具有疏散风热、清利头目之功
效[1]。主产于我国华北、华南、华东等沿海各省，传统
上认为山东产蔓荆子为道地药材，品质佳[2]。蔓荆子
作为《中华人民共和国药典》收载药品，但没有定量
指标。本实验收集了12个产地的蔓荆子药材生品，
以紫花牡荆素为指标[3]，采用HPLC法对其进行测
定，建立了蔓荆子药材的含量测定方法。
1 实验材料
1．1 仪器：Waters600E--2487型高效液相色谱
仪，Millennium32色谱处理系统，TP--205B超声
波清洗机，FAll04电子分析天平。
1．2试药：紫花牡荆素对照品(自提)，经光谱鉴
定，HPLC分析，其纯度为99．6％；所用甲醇为色谱
纯，水为重蒸馏水，其他试剂为分析纯。
1．3药材：蔓荆子药材分别在12个产地采购(山东
牟平、福建莆田、浙江青田、湖南湘阴、河北任县、山
东崂山、山东青岛、江西星子、江西都昌、辽宁大连、
安徽安庆和山东日照)，经黑龙江中医药大学鉴定教
研室鉴定为单叶蔓荆V．trifoliaL．var．
simplicifoliaCham．的果实。
2方法与结果
2．1 色谱条件：色谱柱：HypersiODS一2(250
mm×4．6mm，5肛m)；柱温：30℃；流动相：甲醇一水
(62：38)；检测波长：350nm；体积流量：1．0mL／
min；进样量：10pL。理论塔板数按紫花牡荆素色谱
峰计算应不低于4000。HPLC图谱见图1。
0 2 4 6 8 10 12 14 0 2 46 8 10 1214
t／min
*紫花牡荆素
*一easticin
图1 紫花牡荆素(A)和蔓荆子(B)的HPLC色谱图
Fig．1HPLCchromatogramsfeasticin(A)
andFructusViticis(B)
2．2供试品溶液制备：精密称取蔓荆子药材粉末
(40目)1g，精密加入甲醇30mL，水浴回流提取2
h，滤过，滤液定量转移至50mL量瓶中，用甲醇稀
释至刻度，摇匀，即得。
2．3线性关系考察：精密称取紫花牡荆素对照品适
量，用甲醇配制成0．1mg／mL的对照品溶液。分别
精密吸取上述对照品溶液0．5、2．0、4．0、6．0、8．0
mL，置于10mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，按上
述色谱条件进样。以峰面积为纵坐标，紫花牡荆素的
质量为横坐标绘制标准曲线，回归方程：Y一
3423．8+491015．4X，r=0．999。结果表明，紫花
牡荆素在0．052～0．892rng与峰面积呈良好的线
性关系。
2．4精密度试验：取同一质量浓度的紫花牡荆素对
照品溶液，重复进样5次，测定峰面积积分值，结果
其RSD为0．66％，表明仪器的精密度良好。
收稿日期：2004—08—05
基金项目：“九五”国家重点科技攻关计划项目(999290132)
作者简介：田振坤(1955一)，男，黑龙江人，黑龙江中医药大学中医药研究部部长，主要从事中药药效物质基础及其质量标准的研究。
Tel：(0451)82114403
万方数据
RP-HPLC法测定墓头回中的齐墩果酸
作者： 曹艳萍， 李翠芹
作者单位： 曹艳萍(榆林学院,化学系,陕西,榆林,719000)， 李翠芹(西安交通大学药学院,陕西,西安
,710061)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(5)
被引用次数： 3次

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