全 文 ：·1538· 中革蒋ChineseTraditionalaⅡdHerb Drugs第3s卷第10期2007年10月
正常
模型
优降糖
黄芋胶囊
80
1000
2000
4．63士0．14
6．19士0．17‘‘
5．06士0．19
4，33士0．256△
4．73±021AA
5．15士0．28
6．70士9033’。
6．49士084
5．67士o．17△△
4．68士021△△
45．80土2．70
48．98士3．46。1
47．00士220
44．34±3．04AA
42．97土290AA
2．10士0．18
3，90土0．24’’
2 72士0．23
2．65士m216△
2．46士022AA
与正常组比较r～P
与模型组比较：△6P<0．01
△6P
Table4 Effects0fHuangyuCapsula∞bloodsugarnseruminsulinevelsofnormalrats(；±j，n8)
组别 剂量／(rag·kg一)高切黏度／(mPa·，)低切黏度／(mPa·s) 红细胞压积／“ 纤维蜇白原／％
低血糖的效果基本相近。黄芋胶囊对正常大鼠血糖、
血液黏度及血清胰岛素水平均无职显的影响。同时
本研究结果迸一步证明黄芋胶囊在降低血糖、血脂
和血液流变学指标的同时，亦能升高糖尿病大鼠血
清胰岛素及肝糖原水平(P<0．01)。上述的实验结
果表明黄芋胶囊降血糖作用的机制可能与促进残存
胰岛p细胞释放胰岛素的作用有关，此作用对延缓
糖尿病的合并症发生具有良好的功效。本实验结果
为黄芋胶囊在临床上治疗糖尿病的应用提供一定的
科学依据。
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鲜姜有效部位对H：o：致血管内皮细胞ECV一304氧化损伤的保护作用
宋芸1，魏欣水
(1．山东大学医学院药理学研究所，山东济南
，丁华”，程秀民2
250012；2．山东大学药学院，山东薪南250012)
摘要：目的研究鲜姜有效部位对离体培养的血管内皮细胞ECV一304氧化损伤的保护作用。方法取健康大鼠
每日ig不同剂量(200、400、800mg／kg)鲜姜有效部位或洛伐他汀(40mg／kg)，共4d．取含药血清作为受试药
物。采用H：O：建立离体培养的ECV一304细胞氧化应激的损伤模型，测定细胞存活率、内皮细胞培养液中LDH、
MDA水平及细胞中MDA水平。结果鲜姜有效部位含药血清能够显著提高H。O。损伤的内皮细胞的存活率，降
低受损内皮细胞培养癌中LDH，并减少细胞培养液及细胞中MDA。结论鲜姜有效部位具有较强的抗氧化能力
收稿日期2007．0213
基金项目：国家自然科学基金资助项目(30271584)，山东省自然科学基金资助项目(Y2000C13)
作者简介：宋菩(1979一)．女，河南人．助教．硕士，研究方向为心血管药理。
Tel：(0531)86305166Email：xiaosongyun@126．com
·通讯作者丁华
万方数据
中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrags第38卷第10期2007年10月·1539·
及内皮细胞保护作用，可减轻内皮细胞的氧化损伤。
关键词：鲜姜有教部位；H：O：；乳酸脱氢酶(LDH)，丙二醇(MDA)
中国分类号；R285．5 文蘸标识码：A 文章编号：0253—2670(2007)10—1538—04
ProtectionofeffectivepartsofZingiberofficinaleonECV一304cells
oxidativestressinjuryinducedbyH202
SONGYunl．WElXin—bin91．DINGHHal，CHENGXiu—min2
(1．InstituteofPharmacologytSchooIofMedicine，ShandongUniversity，Jinan250012，ChinaI
2．SchoolfPharmacy，ShandonsUniversity，Jinan250012，China)
Keywords：activefractionofZingiberofficinale(Rosc．)；H202}1actatedehydrogenase(LDH)}
maleicdialdehyde(MDA)
生姜是常用中药，有解表散寒、温中止呕、化痰
止咳的作用，现代研究表明生姜具有抗氧化作用，能
够清除自由基，抑制机体的氧化损伤；调血脂作用，
可降低血浆胆固醇和三酰甘油；抗炎作用，可抑制炎
症的发展过程。生姜的上述作用均有利于保护血管
内皮细胞，阻止动脉粥样硬化(AS)的发生和发
展[“。鲜姜有效部位是采用先进的提取工艺，将生姜
的主要成分挥发油和姜辣素合并提取并处理加工而
成的固体物质，保留了生姜的天然活性。本研究观察
了鲜姜有效部位对离体培养的血管内皮细胞ECV一
304氧化损伤的保护作用。
1材料
1．1药品与试剂：鲜姜有效部位为山东莱芜产鲜姜
经固一液萃取法所得的粉末状物质，收率4％，缛高
效液相法测定含总挥发油6．1％、总姜辣素5．z％，
由山东大学药学院提供。洛伐他汀，浙江海正药业生
产，批号040214。过氧化氢，天津市化学试剂一厂产
品。乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛
1．2仪器：水套式二氧化碳培养箱，美国Shelton
公司生产；VC750型细胞破碎仪Sonlcs＆Material
INC生产；L7—75B低温超速离心机，美国
Beckman公司；uV一2102PCS型紫外可见分光光
度计，尤尼柯(上海)仪器有限公司生产。
1．3实验对象：Wistar大鼠50只，体重(200士
25)g，山东大学实验动物中心提供，动物生产合格
证号：鲁动质20021024；ECV．304细胞株，中国科
学院上海细胞生物研究所典藏，山东大学基础医学
院细胞生物学研究所辛华教授惠赠。
2方法
2．1动物分组及血清的制备：大鼠实验室环境下适
应性饲养1周后随机分为5组：空白组ig生理盐水
10mL／(kg·d)，鲜姜有效部位低、中、高剂量组分
别ig鲜姜有效部位200、400、800mg／(kg·d)，洛
伐他汀组ig给药40mg／(kg·d)。将一日剂量分两
次给药，连续给药3d，当日晚上禁食不禁水，次晨
将一日剂量一次给予。于末次给药后1～2h内心脏
取血，于3000r／rain离心10min，取血清，56℃灭
活30min，置一20℃冰箱保存备用。
2．2 H202氧化应激损伤模型的建立：取ECV一304
细胞株，复苏及传代培养口]，生长至亚融合状态时，
将细胞随机分为6组；正常组、H。02500、750、
1000、1250、l500／1mol／L组。各损伤组分别加入
不同终浓度的H：O：分别作用1、2、3、4h[3]，MTT
法测定各组细胞存活率，确定适合的损伤因素作用
浓度以及作用时问。
2．3细胞培养分组及给药：取ECV一304细胞株，
复苏及传代培养o]，生长至亚融合状态时，将细胞随
机分为7组：正常组，损伤组，空白血清组，鲜姜有
效部位低，中、高剂量含药血清组，洛伐他汀含药血
清组。其中正常组给予DMEM基础培养基，其余组
给予含H：0：(终浓度1000p-mol／L)的DMEM基
础培养基，作用4h后吸弃各孔中培养基，正常组和
损伤组织给予含10％NCS(新生牛血清)的基础
培养基，空白血清组给予含10％空白血清的基础
培养基，鲜姜有效部位低、中、高剂量舍药血清组分
别给予含10％含药血清的基础培养基，洛伐他汀
组给予含10％含药血清的基础培养基，继续培养
20h。
2．4细胞形态学：倒置相差显微镜下观察变化。
2．5细胞存活率：MTT法测定。
2．6生化指标的测定：作用终止时，取细胞培养液
及细胞，严格按照试剂盒说明书操作，用分光光度计
测定细胞培养液中LDH活性，细胞培养液及细胞
中MDA水平。 、
2．7统计学处理：采用SPSS11．0统计软件进行，
万方数据
·1540· 中羊番ChineseTraditionalandHerbnlDrugs第38卷第10期2007年10月
实验数据用；士s表示，采用不配对t检验及单因素
方差分析处理数据。
3结果
3．1 H：O。损伤条件：采用1000ttmol／LH：O：损伤
4h可以使EcV一304细胞的存活率降至50％～
60％，故确定此条件为损伤模型条件，结果见图1。
，／h
1～5一H202500，750，100．1250、1500gmol·L’1
与正常组比较；’P
存活率(i±j．n一6)
Fig．1VjaMljtyofECV一304cellstreatedwithHz02
atdifferentco centrationsandifferenttimes
(z士$，n一6)
3．2形态学变化：倒置相差显微镜下观察，Hto：损
伤ECV一304细胞4h后，可导致细胞数量及形态学
均有明显改变，具体表现为细胞数目变少，细胞体积
变小，细胞间隙增大，胞膜皱缩，胞体中可见明显空
泡。鲜姜有效部位含药血清对细胞形态学损伤有不
同程度的改善，能使内皮细胞的跑体边缘恢复清晰，
胞体饱满，恢复折光性，使细胞内空泡的数目减少。
3．3 ECV一304细胞存活率及生化指标变化：HzOz
损伤ECV一304细胞4h后，细胞存活率显著下降，
细胞培养液中LDH活性、细胞培养液及细胞中
MDA水平均显著升高。与损伤组比较，鲜姜有效部
位低、中、高各剂量含药血清均能不同程度的提高细
胞存活率，低、中剂量含药血清对LDH活性有降低
的趋势，但均无统计学意义，高剂量含药血清可显著
降低LDH活性(P
中MDA水平。结果见表1。
4讨论
内皮细胞受损，血管内皮结构与功能的损伤被
认为是AS的始动因素与中心环节[．]。内皮细胞损
伤的危险因素有很多种，其中氧自由基所致的脂质
寰1鲜萎有效部位对ECV一304细胞存活率及生化指标的影响(_士l，R一8)
Table1 EffectsofeffectivepartsofZ．officina如011viabilityandbiochemicalindexofECV一304cells(i±j，n=8)
组捌 荆量／(啦·h一1) 存活串／“LDH／(U·L-I)培养蘸中MDA／(nmol·L-)细鞠中MDA／(nmol·唧一‘l
与损伤组比较：。P
证实生姜具有较强的抗氧化作用，可以减少大鼠体
内脂质过氧化，降低体内过氧化物的量03，表明其对
体内自由基有不同程度的抑制和／或清除作用。整体
动物实验已证实，鲜姜有效部位能够显著提高大鼠
血清NO水平，具有调血脂以及抗氧化作用，提示
其可能具有内皮细胞保护作用“。]，对于阻止AS的
发生和发展具有重要意义。
本实验根据文献报道并结合预实验的结果，确
定了含药血清的制备方案，选择了3个不同莉量，体
外观察了鲜姜有效部位含药血清对H：O。所致的血
管内皮细胞ECV一304氧化损伤的保护作用。实验
结果显示，鲜姜有效部位含药血清能够显著提高血
管内皮细胞存活率，显著降低细胞培养液中LDH
活性，说明鲜姜有效部位含药血清具有一定的内皮
细胞保护作用，在～定程度上能够保护内皮细胞的
结构与功能的完整性，同时，鲜姜有效部位含药血清
能够显著降低内皮细胞培养液及内皮细胞中MDA
的量，证实其具有一定程度的抗氧化作用，能够保护
内皮细胞免受氧化因素的损伤。结合本实验室前期
的研究成果“’⋯，可以认为鲜姜有效部位具有防治
AS的作用，值得进一步研究和开发。
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单子山楂叶中多元酚类成分及其抗氧化活性研究
刘荣华“2，陈兰英1，朱根华1，奈伯阳2。
(1．江西中医学院现代中药制弃畸教育部重点实验室，江西南昌330004}2．中国药科大学
中药复方研究室，江苏南京210038)
摘要：目的提取分离单子山楂CrafaegusmonoKcna叶中多元酚类成分，并对其抗氧化活性进行比较．方法从
干燥的单子山楂叶粗粉中提取分离其中的多元酚类成分．并比较它们体外对两种不同氧自由基(羟自由基·oH、
过氧化氢HtOz)的清除活性。结果从单子山楂叶中分离得到10种多元酚类成分，分别为槲皮素(quereetin，
Qu)，金丝桃苷(hyperoside，HP)，槲皮素3—口卢肛葡萄糖昔(quercetin3J9-[3-D-glucoside．QG)，芦丁(rutin，
Rut)，牡荆衰(vitexin，Vit)，6-O一乙酰牡粥素(6叼一aeetyl—vitexin，AcV)+牡荆隶2i—口鼠李糖苷(ritexin2-O—
rhamnoside，VRh)，牡荆索4’旬一乙酰一2”o鼠李糖苷(vitexin矿qO-aeetyl一2∞一rhamnoside．VAR)，表儿茶素
[(一)一epicatechin，EP3和绿原醴(chlorogenicacid．ChA)。结果表明，所有样品对以上两种氧自由基的清除活性均
呈明显的结构依赖性．然而在这些样品中Qu、HP、c!G、Rut和EP对这两种氧自由基均有很强的清除活性。结论
Qu、HP、qG、Rut和EP可能是单子山楂叶中最主要的抗氧化活性成分。
关键词：多元酚}黄酮I单子山楂；过氧化氢
中田分类号：R285．6l 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2007)10—1541一04
PrincipalpolyphenoliccomponentsfromleavesofCrataegusmonogyna
andtheirantiOxidatjonac ivites
LIURong—hunl”，CHENLan—yin91，ZHUGen—hual，YU130—yan92
(1．KeyLaboratoryofModernPreparationofChineseMateriaMediea，MinistryofEducation-JiangxiUn vers ty
ofTraditionalChineseMedicine，Nanchang330004，China；2．DepartmentofChineseComplex
RecipeR search，ChinaPharmaceuticalUniversity，Nanjing210038，China)
Keywords：polyatomicphenol；flavone；CrataegusmonogynaJacq．；H202
山楂为蔷薇科苹果亚科山楂属植物n1．主要分
布在北温带大约北纬30。～50。的东亚、欧洲、北美等
地口]。目前认为有250种口]。现代药理及毒理学研究
表明，山楂对心血管系统具有良好的活性而且副作
用很小“]。据报道，山楂叶提取物(WS1442)能增
强心脏功能，对纽约心脏学会(NewYorkHeart
Association，NYHA)分类的I、I、l级心衰，冠
心病，心律失常具有较好的疗效口]。山楂提取物的心
收藕日期
基金项目
作者简介
*通讯作
血管活性机制还不清楚，但有报道认为山楂叶耐心
血管疾病的作用与其提取物具有抗氧化活性有关，
通过抑制氧自由基(oxygenfreeradical，OFR)的
产生从而保护心脏免受伤害。生物体内的氧自由基
包括超氧阴离子(o：7)、羟自由基(·OH)、一氧化
氮(NO)以及衍生物如过氧化氢(H：O：)、氧化低密
度脂蛋自(ox—LDL)、单线态氧(‘0：)、过氧化脂质
(ROOH)等。这些氧自由基在许多疾病的发生与发
；2007—04—26
：国家自然科学基金赍助项目(30472181)I扛西省自然科学基金资助项目(0640163)
；刘荣华(1964)，男，江西省永新县人．江西中医学院副教授．博士．长期从事中药化学教学和中药活性物质基础及中药质量
研究，先后发表学术论文15篇．参与编写专业著作7部．主持国家自然科学基金和江西省自然科学基金项目各1项，参与
。973”和。十一五4科技支撑项日各1项，研究方向为中药质量评竹。
Tel，(079i)7118657 Faxl(0791)7118658E删l；rhiiu@163．com
者余伯用Tel：(025)85391042F“l( 25)85391042E—maillBoyangyu@yahoo．com，cn
万方数据
鲜姜有效部位对H2O2致血管内皮细胞ECV-304氧化损伤的保护
作用
作者： 宋芸， 魏欣冰， 丁华， 程秀民， SONG Yun， WEI Xin-bing， DING Hua， CHENG Xiu-
min
作者单位： 宋芸,魏欣冰,丁华,SONG Yun,WEI Xin-bing,DING Hua(山东大学医学院,药理学研究所,山东
,济南,250012)， 程秀民,CHENG Xiu-min(山东大学药学院,山东,济南,250012)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2007,38(10)
被引用次数： 5次
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