全 文 ：中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第5期2006年5月·707·
表1 胃康胶囊中的人参皂苷Rb。和人参皂苷Rg。(n一3)
Table1 Resultsofdeterminationforg nsenosides
RblandRglinWeikangCapsules(疗一3)
10：20)；正丁醇一醋酸乙酯一水(4：1：5)；氯仿一醋
酸乙酯一甲醇一水(15：40：22：10)；氯仿一甲醇一水
(13：7：2)。在胃康胶囊测定方法研究过程中，发现
展开系统氯仿一甲醇一水(13：7：2)较氯仿一醋酸乙
酯～甲醇一水(15：40：22：10)分离效果更好，斑点
更圆整，所以选用该系统为分离条件。
薄层显色过程中，显色剂10％硫酸乙醇溶液的
用量不可过大，以免扫描时背景颜色过深，影响实验
结果。
HPLC—ELSD法测定益气糖康胶囊中黄芪甲苷
向 静1，陈 勇H，熊富良2，王玉巧2
(1．湖北大学中药生物技术省重点实验室，湖北武汉430062；
2．湖北省中药现代化工程技术研究中心，湖北武汉430052)
益气糖康胶囊由绞股蓝、黄芪、葛根等组成，具
有益气养阴、温阳活血等作用，主要用于气阴两虚症
糖尿病的辅助治疗。黄芪为方中君药，其主要成分有
皂苷、多糖、氨基酸等，具有促进免疫反应等活性。为
了有效控制益气糖康胶囊中黄芪甲苷的内在质量，
本实验参考有关文献报道[1矗]，采用HPLC—ELSD
测定法对本制剂中黄芪甲苷进行了测定。
1实验材料
1．1 仪器：日本岛津IOA高效液相色谱仪；HW一
2000色谱工作站(2．11版)；SEDEX75型ELSD检
测仪。
A
1．2药品：益气糖康胶囊(武汉健民科研所提供，批
号分别为20040701、20040702、20040703)；黄芪甲
苷对照品(中国药品生物制品检定所，批号0781—
9807)；甲醇为色谱纯；水为重蒸水；其他试剂均为分
析纯。
2方法与结果
2．1 色谱条件：Kromasil—C18柱(250mm×4．6
mm，5肛m)；柱温25。C，甲醇一水(80；20)为流动
相；体积流量为1．0mI。／min；ELSD条件：漂移管温
度40C，氮气压为3．5×105Pa。理论塔板数以黄芪
甲苷峰计不低于3000，色谱图见图1。
O 2 4 6 8 10 12 14 16 0 2 4 6 8 10 1214 16 O 2 4 6 8 10 12 14 16
r，rain
*一黄芪甲苷
*一astragalosideIV
图1 阴性样品(A)、益气糖康胶囊(B)和黄芪甲苷对照品(C)的HPLC图
Fig．1HPLCChromatogramsofnegativeample(A)，YiqiTangkangC psules(B)，
andastragalosdeⅣreferencesubstance(C)
2．2供试品溶液的制备：取益气糖康胶囊约5g研 丁醇提取液，接着用氨试液洗涤两次(每次25mL)，
细，精密称定后加甲醇溶液50mL超声提取1h，滤 弃去氨溶液，将正丁醇溶液蒸干，残渣加热水10mL
过并将滤液蒸干，残渣加水20mL使之溶解，用水 溶解，放冷后通过D一101大孔吸附树脂柱(内径1．5
饱和的正丁醇振摇萃取3次(每次25mL)，合并正 cm，长12cm)，用80mL水淋洗树脂柱并弃去淋洗
收稿日期：2005—09—09
*通讯作者陈勇
IL叫
万方数据
·708· 中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第5期2006年5月
水溶液，再用40％乙醇40mL淋洗并弃去淋洗液，最
后用90％乙醇50mL洗脱，收集洗脱液并蒸干，用甲
醇转溶并定容至5mL量瓶中，摇匀即得供试品溶
液。供试品溶液经0．45弘m微孔膜滤过后进样分析。
2．3空白试验：取不含黄芪阴性样品约5g，按“供
试品溶液的制备”方法制得阴性样品溶液。取10pL
进行分析，在黄芪甲苷出峰时间附近无吸收峰出现，
即阴性样品对黄芪甲苷没有干扰。
2．4线性关系的考察：精密配制不同质量浓度系列
黄芪甲苷溶液进行分析，进样体积10肛L。对色谱峰
面积的对数值(y)与以进样量的对数值(X)进行线
性回归处理，得线性回归方程为：Y一1．5652X+
5．1139，r=0．999，线性范围为1．19～5．94pg。
2．5 精密度试验：以0．3960mg／mL黄芪甲苷对
照品溶液为考察对象，连续进样5次，其峰面积的
RSD值为1．41％。
2．6稳定性试验：取批号为20040701的供试品溶
液，每隔2h进样10肛L，测定1次，共测定5次，其
峰面积的RSD值为1．72％。
2．7 重现性试验：取益气糖康胶囊(批号
20040702)5份各5g，精密称定，制备供试品溶液，
进行测定，结果黄芪甲苷的平均质量分数为0．2755
mg／g，RSD为2．97％。
2．8加样回收率试验：用加样回收法，称取益气糖
康胶囊(批号20040702)3份，各约2．5g，精密称
定，分别加入黄芪甲苷对照品溶液(0．3960
mg／mL)1．8mL，制备供试品溶液，分别进行测定，
计算加样回收率。结果黄芪甲苷的平均回收率为
96．28％，RSD为1．38％。
2．9测定：取5批益气糖康胶囊，依法制备供试品
溶液，每批制备两份，测定峰面积，以外标两点法对
数方程求出黄芪甲苷的质量分数，结果见表1。通过
对5批益气糖康胶囊中黄芪甲苷进行检测，建议黄
芪甲苷不得少于0．2178mg／g。
3讨论
表1益气糖康胶囊中黄芪甲苷测量结果(一=2)
Table1 Determinationof stragaloside1VinYiqi
TangkangC psules(席一2)
批号 黄芪甲苷／(rag·g-1)
0．2738
0．2752
0．2679
0．2463
0．2977
对益气糖康胶囊中黄芪甲苷的提取方法作了比
较：①甲醇超声提取，提取液蒸干后甲醇定容。②甲
醇超声提取，提取液蒸干后用水溶解，并用水饱和的
正丁醇萃取，氨试液洗正丁醇液，正丁醇液蒸干后甲
醇定容。⑧按《中国药典>>2000年版黄芪项下提取方
法操作。④甲醇超声提取，提取液蒸干后用水溶解，
并用水饱和的正丁醇萃取，氨试液洗正丁醇液，正丁
醇液蒸干，过D一101大孔树脂柱，依次用80mL水、
40％乙醇40mL和90％乙醇50mL洗脱，收集
90％乙醇洗脱液，蒸干并用甲醇定容。方法①、②所
得供试品溶液基线噪音大，干扰组分多。方法③、④所
得供试品溶液基线噪音小，干扰组分少，且方法④比
方法③中黄芪甲苷提出率高，故采用④法提取样品。
对黄芪甲苷的测定，大多采用薄层扫描法[3]，但
此方法重复性差，干扰因素多。黄芪甲苷仅在近紫外
区有弱吸收，蒸发光散射检测器对无紫外吸收或紫
外末端吸收物质具有较高的检测灵敏度。故本实验
选择了高效液相色谱一蒸发光散射检测法测定黄芪
甲苷，此方法重复性好，准确度高，而且空白无干扰，
可有效控制益气糖康胶囊的质量。
References：
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TraditChinMed(北京中医药大学学报)，2004，27(3)：71—
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E2]ZhangQ，ZhouX．M，LiuS．HPLC—ELSDDeterminationof
astragalosideIV inChinesetraditionalmedicineNaomaikang
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[3]LuJ，WangBQ．TLC—scandeterminationof stragalosideIV
EJ]．ChinTraditPatMed(中成药)，1992，14(6)：34—35．
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万方数据
HPLC-ELSD法测定益气糖康胶囊中黄芪甲苷
作者： 向静， 陈勇， 熊富良， 王玉巧
作者单位： 向静,陈勇(湖北大学,中药生物技术省重点实验室,湖北,武汉,430062)， 熊富良,王玉巧(湖
北省中药现代化工程技术研究中心,湖北,武汉,430052)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2006,37(5)
被引用次数： 4次

参考文献(3条)
1.Guo L Y;Fu W H;Zhou L Determination of astragaloside Ⅳ in Qinggan Granules by HPLC-ELSD[期刊论文]
-北京中医药大学学报 2004(03)
2.Zhang Q;Zhou X M;Liu S HPLC-ELSD Determination of astragaloside Ⅳ in Chinese traditional medicine
Naomaikang Injection[期刊论文]-药物分析杂志 2004(05)
3.Lu J;Wang B Q TLC-scan determination of astragaloside Ⅳ 1992(06)

引证文献(4条)
1.梁文.潘海峰.王迎寒.张晓峰 正交试验法优选健脾化湿颗粒的提取工艺[期刊论文]-中国医药导刊 2010(4)
2.邢婕.秦雪梅.张丽增 HPLC-ELSD法测定黄芪甲苷含量供试品溶液制备方法改进[期刊论文]-山西大学学报(自然科
学版) 2008(4)
3.梁瑞雪.张新军 心安胶囊中黄芪甲苷含量测定方法的研究[期刊论文]-齐鲁药事 2010(5)
4.杨晓腾.李井涛.郭美玲 HPLC-ELSD法测定止痛化癥胶囊中黄芪甲苷的含量[期刊论文]-中国药事 2012(7)


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