全 文 ：中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第7期2006年7月·1095·
表2野生与栽培品指纹图谱的比较结果
Table2 Comparisonsoffi gerprintsbetween
wildandcultivatedcru erugs
成基本一致，但在量上有较大差别。
由于地下部分在全草中所占的比例不是很大
(<10％)，所以，地上部分与全草的指纹图谱相似程
度较高，表明：两者被分析部分的化学成分及量的比
值差别不大。
由于肿节风药材为多年生草本，如果使用全草
的话，不利于该药材资源的可持续发展。由于地上部
分与全草的化学成分差别不大，笔者认为现阶段可
将肿节风药材的地上部分与全草等同使用。
测定结果显示，来源于同一产地的野生药材与
栽培品的不同药用部位的指纹图谱中，其差别大小
依次为：地下部分>全草>地上部分。虽然地下部分
的差异较大，但由于地下部分在全草中所占的比例
不是很大(<100A)，因此对全草的相似度影响较大。
References：
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HPLC法同时测定丹皮中丹皮酚和去甲丹皮酚
盛习锋1’2，谭健兵2，徐康平2，李福双2，黄伟2，谭桂山2+
(1．湖南师范大学医学院，湖南长沙410013；2．中南大学药学院药物化学系，湖南长沙410013)
丹皮为毛茛科植物牡丹Paeoniasuffruticosa
Andr．的干燥根皮，是我国传统常用中药材，具有清
热凉血、活血化瘀的功效口]。丹皮酚是丹皮的主要有
效成分之一，具有抗炎、抗氧化、血小板凝聚抑制等
药理活性[z]，一直作为丹皮药材的质量控制指标。研
究表明，丹皮中还有多种丹皮酚的结构类似物，这些
苯乙酮类成分显示出强大的抗菌、抗炎、抗凝血活性
及增加巨噬细胞吞噬细胞的活性[3]。笔者在对湖南
邵东产丹皮进行系统化学成分研究时得到几个苯乙
酮类成分，其中去甲丹皮酚的收率明显高于文献报
道的0．003％[4]，达到0．15％。笔者认为有必要对丹
皮药材中的丹皮酚和去甲丹皮酚进行分析，为丹皮
的综合利用与开发提供依据。
丹皮中丹皮酚的测定方法，文献中已有报
道[5’6]，但去甲丹皮酚的测定分析尚未见文献报道。
本实验建立了同时测定丹皮中丹皮酚(paeon01)和
雷锁苯乙酮[去甲丹皮酚(resacetophenone)]的高效
液相色谱法，并用建立的分析方法，分析测定了不同
产地的丹皮药材中丹皮酚和去甲丹皮酚。
1仪器与试药
美国Agilent1100型高效液相色谱仪(低压四
元泵，自动进样器，柱温箱，二极管阵列检测器，
ChemStations色谱工作站，色谱柱：KromasilODS一
1(200mm×4．6mm，5v-m)。
乙腈和甲醇均为色谱纯；95％乙醇和磷酸为分
析纯，水为双蒸水并经0．45肛m水系滤膜滤过。
丹皮酚和去甲丹皮酚为自制，并经UV、IR、
1H—NMR、”C—NMR等确证结构，经HPLC检查质
量分数均大于99％。
丹皮药材经中南大学药学院生药教研室李劲平
博士鉴定，为毛茛科植物牡丹P．suffruticosaAn—
dr．的干燥根皮。
2方法和结果
2．1 色谱条件与系统适应性试验：乙腈一磷酸溶液
(pH一3．o)，梯度洗脱(ACN％：0min5％，5min
14％，15min15％，30min20％，15min15％，40
收稿日期：2005—09—25
基金项目：湖南省卫生厅中医药科研基金(204099)
作者简介：盛习锋，女，中南大学药学院访问学者，从事天然产物研究、开发和教学工作。
Tel：(0731)8912473E—mail：shengxi63@yahoo．eom．ca
*通讯作者谭桂山Tel：(0731)2650395Fax：(0731)2650442E—mail：tgs395@yahoo．com．cn
万方数据
·1096· 中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第7期2006年7月
rain35％)，体积流量为1．0mL／min，检测波长为
275nm，柱温为30C。采用外标峰面积法计算，理
论塔板数均大于1×104，对称因子均在0．95～
1．05，与相邻杂质峰的分离度均大于2．0，且经
DAD进行峰纯度检测，表明均为单一成分峰。色谱
图见图1。
一L一一1
0 10 20 30 40 50 600 10 20 30 40 50 60
，／min
1一去甲丹皮酚2丹皮酚
1一resacetophenone2一paeonol
图1对照品(A)与丹皮样品(B)HPLC色谱图
Fig．1HPLCChromotogramsfreferencesubstance
(A)andCoⅣBJMoutan(B)
2．2标准曲线的制备：精密称取丹皮酚52．70mg、
去甲丹皮酚10．08mg置50mL量瓶中，甲醇超声
溶解并稀释至刻度，摇匀制得混合对照品溶液。分别
精密吸取混合对照品溶液2、2．5、5、10、15、20弘L进
样分析。按HPLC条件测定峰面积积分值，以峰面
积(y)为纵坐标，以进样量(X)为横坐标，进行回归
计算，得回归方程丹皮酚：Y一2558．7540X+
2575．1512，，．一0．9992，线性范围为2．108～
21．08弘g，去甲丹皮酚：Y一4037．9552 X，r一
0．9997，线性范围为0．4032～4．032p-g，结果表明
线性关系良好。
2．3重现性试验：精密称取同一批湖南邵东丹皮药
材粗粉5份，按照“2．7”项下操作，测定丹皮酚和去
甲丹皮酚，计算质量分数的RSD分别为1．45％和
2．29％。
2．4精密度试验：精密吸取混合对照品溶液5肚L，
重复进样5次，记录峰面积，测得丹皮酚和去甲丹皮
酚质量分数的RSD分别为0．25％、0．37％。
2．5稳定性试验
2．5．1对照品稳定性试验：精密吸取混合对照品溶
液5弘L分别于配制后0、2、4、6、8、12、24、36、48h
测定峰面积，计算RSD分别为0．70％、0．91％，表
明对照品溶液在48h内稳定。
2．5．2供试品稳定性试验：精密吸取供试品溶液
(按2．7项下制备)5弘L分别于配制后0、2、4、8、12、
24、36、48h测定峰面积，计算RSD分别为1．7％、
1．9％，表明供试品溶液在48h内稳定。
2．6加样回收率试验：以湖南邵东产丹皮药材为研
究对象，精密称定已测定质量分数的药材粗粉5份，
每份2．5g，分别加丹皮酚40mg，去甲丹皮酚2．5
mg，精密称定，按2．7项方法测定，计算各自的量，得
出丹皮酚和去甲丹皮酚的平均回收率分别为99．3％
和101．9％，RSD分别为1．05％、1．35％(卯一5)。
2．7样品的测定：精密称取不同产地丹皮药材粉末
5．0g，加入95％乙醇50mL，索氏提取10h，溶液浓
缩至于浸膏，甲醇超声溶解，转移至100mL量瓶
中，并稀释至刻度，摇匀即得。取供试品溶液，用微孑L
滤膜(o．45pm)滤过，取续滤液20肛L进样，按外标
法计算丹皮酚和去甲丹皮酚，结果见表1。
表1不同产地丹皮中的丹皮酚和去甲丹皮酚(疗一3)
Table1 Contentsofpaeonoiandresacetophenonein
CortexMoutanfromvarioushabitats(挖一3)
3讨论
3．1 检测波长的选择：应用二极管阵列检测器在
190～400nm对丹皮酚和去甲丹皮酚进行扫描，两
个成分的UV吸收曲线相似，在275nm有最大吸
收，故检测波长选择为275nm。
3．2流动相与色谱柱的选择：本试验曾比较过多种
流动相：MeOH—H。0系统、ACN—H。O系统、ACN—
H3PO。溶液(pH3．0)系统和ACN—NaH：PO。(0．2
mol／L，pH3．o)系统等。ACN—H：0系统比Me0H—
H：O系统分离度好，柱效高；在未调节pH值的
ACN—H。O系统情况下分离度不好，峰形拖尾，应用
H。PO。调节pH一3．0时峰形和分离度得到有效改
善，柱效显著提高，峰形与分离度达到最佳；采用等
度洗脱时去甲丹皮酚出峰拖后且峰展宽，故考虑应
用梯度洗脱；最终确定以ACN—H。PO。溶液
(pH3．O)为流动相进行梯度洗脱。笔者还对色谱柱
进行了比较，以KromasilODS一1C18(200mm×4．6
mm，5弘m)柱峰形最佳，分离度好，柱效高。
3．3 提取条件的选择：对丹皮干燥药材设计正交试
验考察提取条件，考察项目包括提取溶媒(水、丙酮、
乙醇)，粉碎度(药材切片，过30目筛的粗粉，过80目
筛的细粉)，提取方法(回流提取、索氏提取、超声提
取)，结果表明以乙醇经索氏提取粗粉效果最好。又考
察了乙醇体积分数及提取时间对提取效率的影响：当
乙醇为95％时，两者均能得到较完全的提取；提取时
间分别进行了8、10和12h的考察，10和12h所测
万方数据
中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第7期2006年7月
得两种成分的量已无差别，说明已提取完全。故确定
最佳提取条件为：95％EtOH索氏提取10h。
3．4试验结果表明，不同产地丹皮中丹皮酚和去甲
丹皮酚的量存在较大差异。丹皮酚的量以安徽毫州
丹皮最高，而去甲丹皮酚的量以湖南邵东的丹皮最
高。去甲丹皮酚亦为苯乙酮类化合物，其药理活性研
究尚未见文献详细报道，但从结构考虑，应与丹皮酚
具有相似的药效作用，因此，同时对丹皮中丹皮酚和
去甲丹皮酚进行定量测定，有益于完善丹皮药材的
质量评价体系。
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RP—HPLC．法测定薯蓣属植物中原薯蓣皂苷
刘中博1，王铁杰2，文琪琚3，陈晓辉1，李军2，毕开顺H
(1．沈阳药科大学药学院，辽宁沈阳 110016；2．深圳市药品检验所，深圳 518029；
3．广东药学院，广东广州 510000)
薯蓣属DioscoreaL．是薯蓣科中最大的一属，
分布于全球的热带和温带，我国和墨西哥为主产国。
其中穿山龙D．，z?缈onicaMak．，黄山药D．pan—
thaicaPrainetBurk．和山药D．oppositaThunb．
均收载于《中国药典》2005年版一部，均以根茎入
药。穿山龙和黄山药有祛湿、清热解毒的功效。穿山
龙用于治疗风湿性关节炎，腰腿疼痛、麻木，大骨节
病，跌打损伤，闪腰岔气，慢性支气管炎，咳嗽气
喘[1]。黄山药可治胃病、风湿性心脏病、风湿性关节
炎、跌打损伤、牛马炭疽等病[2]。山药可补脾养胃，生
津益肺，补。肾涩精。用于脾虚食少，久泻不止，肺虚喘
咳，肾虚遗精，带下，尿频，虚热消渴[1]。
薯蓣属植物有效成分主要为甾体皂苷类。其中
原薯蓣皂苷对人类白细胞HL一60的DNA、RNA和
蛋白质的合成及细胞生长有抑制作用[3]。同时，胡柯
等n1也发现白血病、结肠癌和前列腺癌细胞株对原
薯蓣皂苷最敏感，而卵巢癌细胞株最不敏感。经
COMPARE程序分析发现，在美国国家癌症研究所
(NCI)抗癌药筛选数据库中，没有化合物的细胞毒
作用与该成分相似，表明该化合物可能有新的抗癌
机制。原薯蓣皂苷属于呋喃甾烷型皂苷，这类皂苷含
糖量高、极性大、结构复杂，难以分离和纯化。目前为
止，对其的研究多停留在药理活性方面，没有对这一
类皂苷的定量测定方法，因此建立其测定方法是非
常必要的。本实验首次对原薯蓣皂苷(protodioscin)
进行定量测定，该方法不仅灵敏度高、专属性强、操
作简单易行，而且将质量控制与活性成分相结合，为
该属植物的质量控制提供了新思路、新尝试。
1仪器与试药
美国Waters2695型高效液相色谱仪，2996型
二级管阵列检测器和Empower工作站。
原薯蓣皂苷对照品自制，经IR、MS、1H—NMR、
13C—NMR确定结构为原薯蓣皂苷[5]。质量分数为
99．5％。乙腈为色谱醇，水为重蒸水(自制)，乙醇为
分析醇。
3种药材分别购自沈阳天益堂药店、内蒙古万
民药店、深圳市海王星辰连锁药店、辽宁省铁岭市药
材有限公司、辽宁省清原县龙胆草研究所、吉林靖宁
县综艺土特产购销中心及不同产地的药业公司，经
沈阳药科大学孙启时教授鉴定。产地见表1。药材经
40℃干燥后，粉碎过24目筛，备用。
2方法与结果
2．1 色谱条件：色谱柱为XterraTMODS(250mm×
4．6mm，5um)，以乙腈一水(27：73)为流动相，体积
收稿日期：200510-05
基金项目：深圳市无偿资助科技项目(S04055)
作者简介：刘中博(1980)，女，辽宁铁岭人，在读硕士研究生，从事药物分析研究。
*通讯作者毕开顺Tel：(024)23928487Fax：(024)21896050E—mail：bikaishun@yahoo．corn
万方数据
HPLC法同时测定丹皮中丹皮酚和去甲丹皮酚
作者： 盛习锋， 谭健兵， 徐康平， 李福双， 黄伟， 谭桂山
作者单位： 盛习锋(湖南师范大学医学院,湖南,长沙,410013;中南大学药学院,药物化学系,湖南,长沙
,410013)， 谭健兵,徐康平,李福双,黄伟,谭桂山(中南大学药学院,药物化学系,湖南,长沙
,410013)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2006,37(7)
被引用次数： 3次

参考文献(6条)
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