全 文 ：·1018· 中草115ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第7期2007年7月
HPLC法测定元胡止痛片中欧前胡素和异欧前胡素
王洪志1，李惠芬2量，周 静2，郝兰芳2
(1．天津市中西医结合急腹症研究所药物研究室，天津300100；2．天津医科大学药学院，天津300070)
元胡止痛片是由元胡和白芷两味药材组成，具
有理气、活血、止痛之功效，用于治疗气滞血瘀的胃
痛，胁痛，头痛和痛经等。白芷中香豆素成分欧前胡
素和异欧前胡素具有抗菌、抗肿瘤等多种药理作用，
与药品质量有密切的关系。目前测定欧前胡素和异
欧前胡素的方法多采用薄层色谱法[13和高效液相色
谱法[2]，且测定的成分单一。本实验采用HPLC法
同时测定欧前胡素和异欧前胡素两种指标成分，以
制定制剂的质量控制标准。
1仪器与试药
日本岛津LC--IOATvp高效液相色谱仪，Anas—
tar色谱工作站，日本日立U一3310紫外分光光度计。
欧前胡素(批号826—9401)、异欧前胡素(批号
0827—200105)对照品由中国药品生物制品检定所提
供，元胡止痛片由天津同仁堂股份有限公司提供，甲
醇为色谱纯，水为双蒸水，其他均为分析纯。
2方法与结果
2．1 色谱条件：色谱柱为Shim—packCLC—ODS
(150mm×4．6mm，5肛m)，流动相为甲醇一水(70；
A
l 2。—．．JL^．—————————————～
0 5 lO 15 20 25
30)，测定波长：300nm，体积流量：1．0mL／min，柱
温：室温，进样量：10弘L。
2．2溶液的配制
2．2．1对照品溶液的配制：分别精密称取欧前胡
素、异欧前胡素对照品各10mg，置25mL量瓶中，
加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，备用。
2．2．2供试品溶液的配制：取元胡止痛片10片，去
包衣干燥，研细精密称量，称取2．000g置100mL
碘量瓶中，加入石油醚20mL浸泡24h，超声提取
40min，滤过，回收石油醚至干。残渣用色谱纯甲醇
溶解，转移，滤过，置10mL量瓶中，加色谱纯甲醇
至刻度，摇匀，即得。
2．2．3阴性对照溶液的配制：除去白芷后，根据元
胡止痛片处方、制备工艺及供试品溶液的配制方法
制成阴性对照溶液。
2．3 阴性干扰试验：吸取对照品溶液、供试品溶液
和阴性对照溶液各10弘L进样，记录色谱图。结果与
供试品溶液色谱图比较，阴性对照溶液在欧前胡素、
异欧前胡素色谱峰位置无干扰峰。见图1。
O 5 lO 15 20
f／mln
1一欧前胡素2一异欧前胡素
1一imperatorin2-isoimperatorin
图1对照品(A)、阴性对照(B)和元胡止痛片(C)的HPLC图谱
Fig．1HPLCChromatogramsfreferencesubstance(A)，negativesample(B)，andYuanhuZhitongTablets(C)
2．4标准曲线及线性范围：将欧前胡素和异欧前胡 3．600弘g时，峰面积与进样量呈良好的线性关系。
素对照品溶液等体积混合，然后精密吸取3、6、9、 2．5精密度试验：精密吸取同一供试品溶液，连续
12、15、18弘L，进样测定峰面积。以进样量为横坐标，进样6次，每次lopL，测定峰面积积分值，计算得
峰面积为纵坐标，得回归方程。欧前胡素：Y一 欧前胡素峰面积的RSD为1．12％，异欧前胡素峰
84399X+3626．8，r一0．9993；异欧前胡素：Y一 面积的RSD为0．94％。
1×106X一163426，r一0．999。结果表明欧前胡 2．6 重现性试验：取批号030906的元胡止痛片
素和异欧前胡素在0．217～1．304弘g、0．600～2． 0g，共6份。制备供试品溶液，每次进样10弘L，
收稿日期：2006—11—16
作者筒介：王洪志(1965一)，男，天津人，副主任药师，研究方向为天然药物制荆。
*通讯作者李惠芬Tel：(022)23529243E—mail：lihuifen@tijmu．edu．cn
万方数据
中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第7期2007年7月·1019·
测定，计算得样品中欧前胡素和异欧前胡素的平均
质量分数为0．27、0．34mg／g，其RSD分别为
0．20％、0．42％。
2．7稳定性试验：取供试品溶液每隔2h进样1
次，每次进样10肛L，共进样6次，测定峰面积积分
值，计算得欧前胡素峰面积的RSD为0．31％，异欧
前胡素峰面积的RSD为1．18％，表明10h内供试，
品溶液的稳定性良好。
2．8 回收率试验：采用加样回收法。取批号030906
元胡止痛片2．000g，共6份，分别加入0．4mg／mL
欧前胡素和异欧前胡素对照品溶液1mL，制备供试
品溶液，进样10弘L，测定，计算回收率。结果欧前胡
素的平均回收率为99．5％，RSD为1．79％，异欧前
胡素的平均回收率为99．9％，RSD为1．77％。
2．9样品测定：取元胡止痛片，每批次各3份，制备
供试品溶液，进样10肛L，测定欧前胡素和异欧前胡
素的峰面积，采用外标法计算样品中两者的质量分
数，结果见表1。
裹I元胡止痛片中欧前胡素和异欧前胡素的测定结果
Table1 Determinationofimperatorinandtsoimperatorin
inYuanhuZhitongTablets
3讨论
经日立U一3310分光光度计紫外区域内扫描，
发现欧前胡素和异欧前胡素在300nm波长处有最
大吸收，故本实验选用的检测波长为300nm。
由于白芷的有效成分欧前胡素和异欧前胡素的
极性较小，采用正相高效液相色谱法，流动相选用非
极性溶剂时，对高压泵垫的腐蚀较大，且条件苛刻，
因此本实验采用反相色谱法，以甲醇一水(70：30)为
流动相，能有效克服以上缺点，且操作更简便，灵敏
度也高。
在优化色谱条件过程中，甲醇与水的配比分别
采用75：25、70：30、68：32，结果发现75：25时
氧化前胡素峰与欧前胡素峰部分重叠口]，68：32时
目标峰的保留时间过长，只有当70：30时，欧前胡
素色谱峰与异欧前胡素的色谱峰保留时间恰当，峰
形也好。
供试品溶液的配制中超声处理时，进行了20、
30、40、50min提取，结果发现提取40min时有效成
分的量最高。
实验中发现欧前胡素对照品的HPLC色谱峰
不是单一峰，而是氧化前胡素和欧前胡素的混和物。
对欧前胡素的定量只能通过两者峰面积积分值之比
计算出所称对照品中欧前胡素所占的质量比，以此进
行计算，或需采用制备高效液相色谱重新制备欧前胡
素对照品，分得单一峰，按例行方法计算。不过需新鲜
配制，现用现配。本实验选用前一种方法计算。
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高效液相色谱法测定骨仙片中柚皮苷
李玉仿，林月英
(天津市大港区药品检验所，天津300270)
骨仙片是由骨碎补、熟地黄、黑豆、女贞子等9味
药材制成的中药制剂，收载于《中华人民共和国卫生
部药品标准》中药成方制剂第4册。但原标准仅有一
般鉴别和检查项，缺乏定量检测方法。骨仙片具有填
精益髓、壮腰健肾、强壮筋骨、舒筋活络、养血止痛的
收稿日期：2006—10一16
功效，其君药为骨碎补。结合骨仙片制备工艺主要是
水提取，骨碎补主要是以柚皮苷为主的水溶性成分，
本研究建立了骨仙片中柚皮苷的HPLC测定方法。
1仪器与试药
岛津LC--2010AHT高效液相色谱仪，LC—
万方数据
HPLC法测定元胡止痛片中欧前胡素和异欧前胡素
作者： 王洪志， 李惠芬， 周静， 郝兰芳
作者单位： 王洪志(天津市中西医结合急腹症研究所,药物研究室,天津,300100)， 李惠芬,周静,郝兰芳
(天津医科大学药学院,天津,300070)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2007,38(7)
被引用次数： 12次

参考文献(3条)
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