全 文 ：脂素的毒性 ,且其毒性大小与鬼臼木脂素类成分的
含量成正比 [5 ]。
3. 2　 5种样品对小鼠移植性肝癌均有抑制作用 ,以
秕鳞八角莲提取物的抑瘤作用为最强 ,其次为桃儿
七提取物、小叶莲提取物 ,鬼臼类中药乙醇提取物对
小鼠移植性肝癌的抑制作用明显好于单体化合物
(鬼臼毒素和去氧鬼臼毒素 ) ,且毒性较小 ,其作用效
果可能为几种成分共同作用的结果。 实验结果为开
发利用鬼臼类中药药用资源 ,寻找高效低毒的抗肿
瘤有效成分提供了依据。
3. 3　各样品组对小鼠 EAC均有一定的抑制作用 ,
除小叶莲提取物外 ,其余 4个样品的抑瘤率均大于
30% ,且与对照组相比均有显著性差异 ( P < 0. 05)。
参考文献:
[1 ]　尚明英 ,李　萍 ,蔡少青 . 秕鳞八角莲的化学成分研究 [ J ]. 中
草药 , 2000, 31( 6): 412-414.
[2 ]　尚明英 ,李　萍 ,李　军 ,等 . 藏药小叶莲的化学成分研究 [ J ].
中草药 , 2000, 31( 8): 569-571.
[3 ]　中国医学科学院药物研究所 . 中药志 (第一册 ) [M ]. 北京:人
民卫生出版社 , 1977.
[4 ]　 Lb eti V , Donadio M , John D. Cisplatin and teniposide
ch em oth erapy for adv anced non-small cell lung cancer [ J ]. Eur
J Cancer, 1991, 27( 9): 1104-1106.
[5 ]　 Pat rick J, Loeh rer S, Susan R, et al . Etoposide, i fos famide
and cisplatin in extensiv e small cel l lung cancer [ J] . Cancer,
1992, 69( 3): 669-673.
[6 ]　尚明英 ,徐国钧 ,徐珞珊 ,等 . HPLC法测定鬼臼类生药中鬼臼
木脂素的含量 [ J] .中国药科大学学报 , 1996, 27( 4): 219-222.
牛蒡苷元体外抗流感病毒活性
高　阳1 ,董　雪2 ,康廷国1 ,赵长智 2 ,黄　智 2 ,张效禹 1
( 1. 辽宁中医学院 中药系 ,辽宁 沈阳　 110032; 2. 沈阳市卫生防疫站 ,辽宁 沈阳　 110031)
摘　要: 目的　体外观察牛蒡苷元 ( ar ctig enin, ACT )抗甲 1流感病毒作用 ,为进一步确认 ACT是牛蒡子 Fructus
arctii解表功能有效成分提供实验依据。方法　采用 M DCK细胞培养法 ,通过红细胞凝集实验 ,以流感病毒血凝滴
度为指标 ,观察 ACT对流感病毒复制的抑制作用。结果　 ACT浓度 ( mmol /L)为 6. 7, 13. 4, 26. 8和 53. 6的血凝
滴度抑制率 (% )分别为 0. 75, 87. 5和 100。结论　 ACT在体外有直接抑制流感病毒复制的作用 ,是牛蒡子解表功
能的有效成分 ,对其进行含量测定作为牛蒡子质量标准的定量指标是适宜和可行的。
关键词: ACT;甲 1流感病毒 ; MDCK细胞 ;血凝滴度
中图分类号: R286. 87　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2002) 08 0724 03
Activity of in vitro anti-influenza virus of arctigenin
GAO Yang
1
, DONG Xue
2
, K ANG Ting-guo
1
, ZHAO Chang-zhi
2
, HU ANG Zhi
2
, ZHANG Xiao-yu
1
( 1. Depar tment of Chinese Mate ria M edica , Liaoning Colleg e of TCM , Shenyang 110032, China;
2. Shenyang Sanitation and Antiepidemic Sta tion, Shenyang 110031, China)
Abstract: Object　 To observ e in v itro inhibi to ry activi ty o f a rctig enin ( ACT ) against inf luenza A1
virus in o rder to make fur ther v eri fication o f that ACT is an activ e consti tuent o f Fructus Arctii fo r reliev-
ing ex terio r syndrome. Methods　 Madin da rby canin kidney ( MDCK) cell culture techniques w ere used fo r
evaluating antivi ral activi ty o f ACT by hemagg lutination assay wi th the influenza vi rus hemagglutination
titer as index and for investig ating the inhibi to ry ef fect o f ACT on replication of influenza vi rus. Results　
The inhibi tion rates (% ) of hemagglutination ti ter w ere 0. 75, 87. 5, and 100 at the ACT concentrations
( mmo l /L) o f 6. 7, 13. 4, 26. 8 and 53. 6, respectiv ely. Conclusion　 ACT has directly in vit ro inhibitory ef-
fect ag ainst inf luenza virus replica tion, and is an activ e constituent of Fructus Arct ii for the relieving ex te-
rio r syndrome. It is suitable and feasible to determine the qua li ty control index as ACT content in Fructus
Arctii to assess the quali ty of the herbal drug.
Key words: a rctig enin ( ACT) ; inf luenza A1 virus; Madin darby canin kidney ( MDCK) cell; hemag-
g lutina tion titer
·724· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 8期
收稿日期: 2001-12-17基金项目: “九五”国家重点科技攻关项目 ( No. 96-903-02-01)
　　流感是由流感病毒引起的一种急性病毒性呼吸
道传染病。现临床应用的抗流感病毒药多易损害宿
主细胞 ,毒性较大和易导致耐药毒株出现。 因此 ,研
究新型抗流感病毒药物具有重要的现实意义。 牛蒡
子属辛凉解表药 ,具有疏散风热 ,宣肺透疹 ,解毒利
咽的功效。牛蒡苷元 (a rctig enin, ACT)是从牛蒡
子中提取的一种木脂素类成分。 我们既往的实验结
果表明: ACT对离体大鼠气管、结肠、肺动脉、胸主
动脉及豚鼠气管有松弛作用 ,是由抑制细胞外钙内
流和内钙释放引起 [ 1]。 在此基础上 ,本文观察了
ACT体外抗流感病毒作用 ,为进一步确认 ACT是
牛蒡子解表功能有效成分和开发应用提供实验依据。
1　材料
ACT: 自制 ,纯度为 99. 8%。 临用时用 DMEM
溶液溶解 ,并加适量聚乙二醇 400配制成 4个浓度
( mmo l /L) 6. 7, 13. 4, 26. 8和 53. 6,所含聚乙二醇
(% ) 分别为 2. 5, 5. 0, 10. 0和 20. 0,并调 pH至
7. 2～ 7. 4,经过滤除菌后冷存。
病毒唑注射液 (山东兖州益健制药厂 ):临用时
用 DMEM溶液配制成 4个浓度 ( mmol /L ) 1. 6,
3. 2, 6. 4和 12. 8。
MDCK ( Madin darby canin kidney )细胞、甲 1
流感病毒 [A /京防 /262 /95 ( H1N 1) ]: 购自中国预
防医学科学院病毒所。
MDCK细胞生长液、细胞维持液、 Versene溶
液和消化液: 按文献 [ 2]方法配制。
2　方法
2. 1　 MDCK细胞传代和流感病毒培养: 按文献 [ 2]
方法进行。
2. 2　聚乙二醇及 ACT对细胞毒性试验:将聚乙二
醇用 DM EM 溶液配制成浓度 (% ) 为 2. 5, 5. 0,
10. 0, 20. 0及 ACT如前配制后 ,加入已长成单层细
胞的细胞板内 0. 1 mL /孔 ,并加细胞维持液至 1
mL /孔 , 35℃、 5% CO2孵箱内培养 72 h,观察细胞
病变。同时设 MDCK细胞对照。实验重复 2次。结
果表明: 聚乙二醇及含聚乙二醇之 ACT对 MDCK
细胞没有产生非特异性细胞病变 ( CPE)。提示所用
浓度聚乙二醇和 ACT对 MDCK细胞无毒性。
2. 3　 ACT抗流感病毒试验:如上所配各浓度 ACT
及病毒唑各 0. 2 mL、甲 1流感病毒悬液 0. 2 mL, 4
℃条件下 ,静置 2 h,加入已长成单层细胞的细胞板
内吸附 2 h,用 Hank s液洗 4遍 ,加入细胞维持液
1 mL /孔 ,置于 35℃、 5% CO2孵箱内培养 72 h。同
时设 MDCK细胞对照、甲 1流感病毒对照、助溶剂
聚乙二醇对照和阳性药病毒唑对照。选用适当血凝
实验板 ,除第一孔外 ,每孔加 25μL生理盐水。第一
孔加 50μL待测病毒悬液 ,取 25μL做 2倍系列稀
释 ,最后一孔弃去 25μL。每孔加 25μL 0. 75% 豚
鼠红细胞悬液 ,轻弹实验板 ,使红细胞与病毒充分混
合 ,置室温 60 min后 ,观察血凝现象并记录结果。以
出现“+ + ”的流感病毒最高稀释度为血凝终点 ,该
稀释度的倒数即为流感病毒的血凝滴度 [2 ] ,并按文
献 [3 ]方法进行统计处理。
3　结果
结果见表 1,可见聚乙二醇在所用浓度下对甲 1
流感病毒无毒性。ACT与病毒唑相似 ,低浓度时 ,对
流感病毒无明显抑制作用 ,随浓度增高 ,抑制作用逐
渐增强 ,高浓度时 ,已可完全抑制其复制 ,呈现明显
的浓度依赖性。
4　讨论
　　近二十余年来 ,已经分离和合成了大量具有抗
病毒活性的物质。但目前具有干扰病毒代谢而不损
表 1　 ACT对甲 1流感病毒的抑制作用
组别 浓度
(m mol /L)
血　凝　滴　度
1∶ 1 1∶ 2 1∶ 4 1∶ 8 1∶ 16
血凝滴度
抑制率 (% )
M DCK细胞 　
-
- - - - - 　 -
甲 1流感病毒 　
-
+ + + + + + + + + + + + + + + + + + + + 　 0
聚乙二醇 2. 5% + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + 　 0
5% + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + 　 0
10% + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + 　 0
20% + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + 　 0
病毒唑 1. 6 + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + 　 0
3. 2 + + + + + + + + + + + + + + - 50
6. 4 + + + + + + - - - 87. 5
12. 8 - - - - - 100
牛蒡苷元 6. 7 + + + + + + + + + + + + + + + + + + 　 0
13. 4 + + + + + + + + + + - - 75
26. 8 + + + + + + - - - 87. 5
53. 6 - - - - - 100
·725·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 8期
害宿主细胞的高度选择性的抗病毒药物 ,且其临床
疗效又较突出的为数很少。 我国古代医书中早就有
“疫”、“风寒”、“伤风”及“时行感冒”等记载。这些记
载中可能有些指的就是流感或包括流感在内。 呼吸
道病毒感染属中医学“风温肺热病”范畴 ,其临床表
现与 “感冒、外感咳嗽、淫气喘息”等中医病名有
关 [4 ]。近年来 ,“双黄连”等中药在治疗病毒感染疾病
中取得了甚好的临床疗效。 说明从中药宝库中寻找
抗病毒药物是很有开发前景的。
由于组织培养法的实验条件较易控制 ,方法规
范 ,因此我们采用 MDCK细胞培养法进行 ACT抗
流感病毒作用的实验研究。 结果提示: ACT能直接
抑制或灭活流感病毒 ,使其产生较强的体外抗甲 1
流感病毒作用。其通过何种方式和机制而抗甲 1流
感病毒及在体内的抗流感病毒活性如何 ,有待进一
步研究和探讨。
牛蒡子提取物对 EBV,在浓度相同时有与已知
强抗 EBV 药维甲酸相似的抑制作用 [5 ] ,尚有抗
HIV [6 ]、抗细菌 [7 ]和真菌 [8 ]的作用。我们的另外实验
研究结果证实: ACT对多种细菌和真菌有较强的抑
制或杀灭作用 (待发表 )。 ACT能抗流感病毒等病
原体 ,进一步为确认 ACT是牛蒡子解表功能的有
效成分 ,对其进行含量测定作为牛蒡子质量标准的
定量指标提供了实验依据 ,为进行深入研究和开发
应用奠定了基础。
参考文献:
[1 ]　 Gao Y, Kang T G, Zhang X Y. Studies on calcium antag onist
act ion of arctigenin. 中草药 , 2000, 31( 10): 758-762.
[ 2 ]　郭元吉 ,程小雯 .流行性感冒病毒及其实验技术 [M ] . 北京:
中国三峡出版社 , 1997.
[3 ]　陈忠斌 ,王升启 ,朱宝珍 ,等 . 硫代反义寡核苷酸在细胞培养内
抗甲型流感病毒活性 [ J] .病毒学报 , 1998, 14( 3): 193-197.
[4 ]　欧　敏 ,杜怀堂 ,郭元吉 ,等 . 清肺饮抗小鼠流感病毒性肺炎的
实验研究 [ J] .中华实验和临床病毒学杂志 , 1996, 10( 4): 381-
384.
[ 5]　陈铁宏 ,黄　迪 . 牛蒡子对 Eps tein— Bar r病毒抗原表达的抑
制作用 [ J ] . 中华实验和临床病毒学杂志 , 1994, 8 ( 4): 323-
327.
[ 6]　 Yao X J, Mark A, Wainberg, et al . Mechanism of inhibi ti on
of HIV -1 infection in vi tro by purifi ed ex t ract of prunel la vul-
garis [ J ]. Vi rology, 1992, 187: 56-58.
[ 7 ]　 Hasegaw a M , Taked a S, Hosoya H, et al . Abs tracts of the
Ph armaceu tical Society of Japan [M ]. Sapporo, 1990.
[8 ]　曹仁烈 ,孙在原 ,王仲德 ,等 . 中药水浸剂在试管内抗皮肤真菌
的观察 [ J] .中华皮肤科杂志 , 1957, 5( 4): 286-290.
调肝导浊中药对氧化修饰低密度脂蛋白含量影响的实验研究
张柏丽 ,陆一竹 ,范英昌
(天津中医学院 ,天津　 300193)
摘　要: 目的　探讨调肝导浊中药防治动脉粥样硬化 ( AS) 的机制。 方法　运用高脂血症小鼠模型和体外培养技
术以不同培养基培养小鼠腹腔巨噬细胞和大鼠肝细胞 ,检测血清和细胞培养液中氧化修饰低密度脂蛋白 ( OX-
LDL)。结果　调肝导浊中药可明显降低血清和细胞培养液中 OX-LDL的含量并抑制 OX-LDL生成。结论　调肝
导浊中药通过降低、阻止 OX-LDL形成而防止和延缓 AS的发生。
关键词: 调肝导浊中药 ;氧化修饰低密度脂蛋白 ;动脉粥样硬化 ;单核细胞 ;巨噬细胞
中图分类号: R286. 26　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2002) 08 0726 03
Effects of Chinese medicine TIAOGAN DAOZHUO
*
on content of oxidized low density lipoprotein
ZHANG Bai-li, LU Yi-zhu, FAN Ying-chang
( Tianjin Co llege o f TCM , Tianjin 300193, China)
Key words: Chinese medicine T IAOGAN DAOZHUO; ox idized low density lipoprotein; athero scleo r-
sis; mononuclea r cell; macrophage
*
TIAO GAN DAOZHUO is a Chinese herb prescription w ith the function of regulating the disorder of
qi and removing turbid qi .
·726· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 8期
收稿日期: 2001-11-01基金项目:天津市自然科学基金资助项目 ( 003607911)作者简介:张柏丽 ( 1949-) ,女 ,天津中医学院生化教研室副教授 ,主要从事中药对脂代谢调控的研究。