全 文 ：·药理实验与临床观察·
葛根芩连汤拆方对肺炎链球菌抑菌作用比较研究
余林中, 伍杰勇,罗佳波,邵红霞

(第一军医大学 中医系 药理药化教研室,广东 广州　510515)
摘　要: 目的　通过对葛根芩连汤 ( GQD ) 各配伍组合对肺炎链球菌的抑菌作用差异来探讨其配伍规律。方法　采
用液体试管两倍稀释法测定各煎液对肺炎链球菌的最低抑菌浓度 ( M IC) ,比较各配伍组合后的药效学改变。结果
各配伍煎液的 MIC 不全相同。结论　GQD 各配伍组合水煎液对肺炎链球菌抑菌作用不全相同; 在全方中,抑菌作
用药物主要为黄连与黄芩, 炙甘草与葛根无明显抑菌作用; 两药与黄芩、黄连配伍时对其抑菌拮抗作用不同。
关键词: 葛根芩连汤; 配伍; 抑菌活性; 肺炎链球菌
中图分类号: R285. 5　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2003) 11 1011 03
Comparative study on bacteriostasis among compositions of Gegen Qinlian
Decoction against Streptococcus pneumoniae
YU Lin-zhong
1 , WU Jie-yong , LU O Jia-bo , SHAO Hong-x ia
( Depar tment o f TCM , Fir st M ilitary Medical U niver sity , Guang zhou 510515, China )
Abstract: Object　T o explore the regularity of recipe composit ion by observing different bacteriosta-
sis among composit ions of Gegen Qinl ian Decoct ion ( GQD) against Strep tococcus p neumoniae . 　Method-
sTo evaluate the m inimal inhibitory concentrat ion ( M IC) of 15 decoct ions through double-fold dilution
method. Results　Not all of the decoct ions are of the same M IC. Conclusion　Not all of the 15 decoct ions
have the same bacteriostasis against S . pneumoniae . Among the four herbs of GQD Cop t is chinensis
Fr anch. has the st rongest bacter io stasis and the next Scutel lar ia baicalensis Geo rgi. While Gly cy rr hina
w ralensis Fisch and Puer aria lobata ( Willd. ) Ohw i have no bacteriostasis, but they can inf luence the bac-
teriostasis of C. chinensis and S. baicalensis when combinat ing with them .
Key words : Gegen Qinlian Decoct ion ( GQD) ; compatibility ; bacteriostasis; Strep tococcus pneumoniae
　　中药配伍以七情合和为纲, 目前对方剂配伍规
律的研究主要是用药理或化学的方法研究中药配伍
与药理效应或化学变化之间的关系。笔者曾经提出:
方剂配伍规律研究的核心内容和关键环节在于对方
剂物质基础及其运动、变化规律的揭示; 配伍用药
“七情合和”的实质在于“化学成分合和”, 即通过方
剂配伍-化学成分变化-药理效应改变三者之间的相
互联系研究配伍规律[ 1]。葛根芩连汤出自《伤寒论》,
由葛根、黄芩、黄连、炙甘草 4药组成;方中以葛根为
君,黄芩、黄连为臣,炙甘草为使。本实验主要通过不
同配伍煎液对肺炎链球菌抑菌作用的药效学变化来
探讨配伍-药理效应改变的相互联系。
1　材料
1. 1　煎液制备: 葛根芩连汤 ( GQD) 中葛根 15 g,
广西产豆科植物野葛 Puerar ia lobata ( Willd. )
Ohw i 的根; 黄芩 9 g , 安徽产唇形科植物黄芩
S cutellaria baicalensis Georg i 的干燥根; 黄连 9 g ,
四川产毛茛科植物黄连 Cop t is chinensis Franch. 的
干燥根; 炙甘草 6 g, 新疆产豆科植物甘草 G ly-
cy rrhiz a uralensis Fisch. 的干燥根及根茎的炮制加
工品,以上均符合《中华人民共和国药典》2000年版
规定并加工炮制合格的饮片。药材由第一军医大学
中医系中药鉴定室鉴定。依据《伤寒论》煎煮法特点,
“先煮葛根、后纳诸药”制备其水煎液。具体方法为:
加水将饮片浸泡 30 m in, 先煎葛根 20 min,再和余
药,共煎 2 次,每次 30 m in, 合并药液,滤过, 浓缩至
39 mL,使成 1 g / mL。各配伍组合分别为葛根黄芩
黄连炙甘草煎液 ( A)、黄连煎液 ( B)、葛根黄连煎液
·1011·中草药　Chinese T radit ional and Herbal Drugs　第 34 卷第 11 期 2003年 11 月

收稿日期: 2003-04-04基金项目: 国家自然科学基金资助项目 ( 39970886) ; 广东省自然科学基金项目 ( 001070) ; 军队“十五”计划基金重点课题 ( 01z053)作者简介: 余林中( 1962—) ,男, 安徽合肥人,医学博士,副教授, 硕士生导师,现任第一军医大学中医系药理药化教研室主任, 中国药理学会中药药理专业委员会常委、副秘书长, 全军中药专业委员会委员、秘书长,主要从事中药复方药理基础研究及中药新产品开发。Tel: ( 020) 61648261 ( O) ,
61648262 (O ) , 61640417 ( H)　E-mail: yulzh@ fimmu. com
( C)、黄芩黄连煎液 ( D)、黄连炙甘草煎液 ( E)、葛
根黄芩黄连煎液 ( F )、葛根黄连炙甘草煎液 ( G)、黄
芩黄连炙甘草煎液 ( H)、黄芩煎液 ( I)、葛根黄芩煎
液 ( J)、黄芩炙甘草煎液 ( K)、葛根黄芩炙甘草煎液
( L )、炙甘草煎液 ( M )、葛根炙甘草煎液 ( N )、葛根
煎液 ( O)。各配伍煎液中生药量同原方,煎法相同,
煎后均浓缩至 39 mL,使各配伍组合中各组成药生
药浓度与全方中各相应生药浓度相同,调 pH 7. 4～
7. 8, 115℃ 高压灭菌 20 m in, 备用。
1. 2　实验菌种及培养基:肺炎链球菌 ( ATCC31004)
来自本院微生物教研室保存标准株。营养肉汤培养
基、营养琼脂培养基、血琼脂平板购自环凯微生物公
司。葡萄糖酚红肉汤, 按周邦靖方法配制[ 2]。
2　方法
　　试管两倍稀释法 [ 3] : 将实验菌株先以平板划线
法接种于血琼脂平皿内, 37 ℃ 过夜培养,次日挑选
典型单个菌落于 5 mL 营养肉汤培养基中,加入无
菌小牛血清 0. 5 mL, 混匀, 37 ℃ 恒温震摇 8 h,麦
氏比浊管比浊并将菌液浓度稀释成 3×108/ mL,然
后用相应培养基稀释 1 000 倍,备用。将药物按倍比
稀释法与葡萄糖酚红肉汤培养基混匀成 1∶2, 1∶
4, 1∶8⋯⋯等浓度,取各种浓度的含药培养基 2 mL
于无菌小试管中,共 11 管,分别加入 0. 1 mL 备好
的肺炎链球菌菌液,加入 0. 1 mL 无菌小牛血清,混
匀,并以一管不加药物作为阳性对照,另一管不加菌
液作为阴性对照, 置于 37 ℃ 培养箱 24 h,观察结
果,记录各管内细菌生长情况,以不变黄色的最高稀
释度作为试验药物的最低抑菌浓度 ( M IC)。
3　结果
3. 1　GQD 拆方对肺炎链球菌的抑菌作用:见表 1。
GQD各拆方煎液对肺炎链球菌的抑菌作用均较弱,
其中起主要作用的药物为黄连, 黄芩有较弱的抑菌
活性,炙甘草与葛根则无明显抑菌作用。
表 1　GQD 中 4 种单药对肺炎链球菌的抑菌作用
Table 1　Bacteriostasis of four Chinese herbs
from GQD against S. pneumoniae
组　别 MIC 组　别 MIC
B 1∶32 M -
I 1∶8 O -
3. 2　GQD 中含黄连配伍对肺炎链球菌的抑菌作
用:见表 2。与黄连配伍的各煎液中, 两两配伍煎液
的抑菌作用, 葛根黄连煎液 ( C ) 与黄芩黄连煎液
( D) 相当, 而强于黄连炙甘草煎液 ( E )。3 者均弱于
黄连煎液 ( B) 的作用, 表明 3 药能拮抗黄连的抑菌
作用。而黄连黄芩煎液 ( D) 药效优于黄连炙甘草煎
液 ( E ) 与炙甘草无明显抑菌活性而黄芩仍有抑菌
活性有关。炙甘草对黄连抑菌拮抗作用影响强于葛
根。在 3药配伍中葛根黄连炙甘草煎液 ( G) 与葛根
黄芩黄连煎液 ( F ) 相当, 而强于黄芩黄连炙甘草煎
液 ( H )。3药配伍中可知对黄连黄芩煎液,炙甘草拮
抗作用强于葛根;对黄连炙甘草煎液,黄芩拮抗作用
强于葛根。其机制可能和各种酸性成分与碱性成分
作用产生沉淀有关。
表 2　GQD 中含黄连配伍对肺炎链球菌的抑菌作用
Table 2　Bacteriostasis of GQD including
C. chinensis against S. pneumoniae
组　别 MIC 组　别 MIC
A 1∶16 E 1∶4
B 1∶32 F 1∶16
C 1∶16 G 1∶16
D 1∶16 H 1∶8
3. 3　GQD 中含黄芩配伍对肺炎链球菌的抑菌作
用:见表 3。与黄芩各配伍煎液,两药配伍中葛根黄
芩煎液 ( J) 与黄芩炙甘草煎液 ( K ) 抑菌作用和黄
芩煎液 (Ⅰ) 相当,而弱于黄连黄芩煎液 ( D)。可知
炙甘草与葛根对黄芩抑菌作用无明显影响,而黄连
的抑菌作用较强, 故配伍后其抑菌作用虽整体是拮
抗的,但仍强于余药与黄芩的配伍。3 药配伍中, 黄
芩黄连炙甘草煎液 ( H ) 与葛根黄芩炙甘草煎液
( L ) 抑菌作用相当,而弱于葛根黄芩黄连煎液 ( F )。
可见黄芩黄连分别与炙甘草及葛根配伍时,前者抑
菌作用弱于后者。炙甘草在与黄芩黄连配伍时的抑
菌作用的拮抗较葛根强。其机制可能与酸性药物配
伍后相互影响有关。
表 3　GQD 中含黄芩配伍对肺炎链球菌的抑菌作用
Table 3　Bacteriostasis of GQD including
S. baicalensis against S. pneumoniae
组　别 MIC 组　别 MIC
A 1∶16 I 1∶8
D 1∶16 J 1∶8
F 1∶16 K 1∶8
H 1∶8 L 1∶8
3. 4　GQD 中炙甘草与葛根及两者配伍对肺炎链球
菌抑菌作用: 炙甘草煎液 ( M ) 与葛根煎液 ( O) 无
明显抑菌活性, 两者配伍后亦无明显的抑菌作用。
3. 5　GQD 全方及各配伍对肺炎链球菌抑菌作用比
较: 从整体来看,全方的抑菌作用仅次于黄连煎液,
而与葛根黄连煎液 ( C)、黄连黄芩煎液 ( D)、葛根黄
芩黄连煎液 ( F)、葛根黄连炙甘草煎液 ( G) 抑菌作
·1012· 中草药　Chinese T radit ional and Herbal Drugs　第 34 卷第 11 期 2003年 11 月
用相当,强于其他配伍组合,与方中的酸性药相互溶
出的影响、酸性与碱性药相互影响及各药的药效累
加效应有关。
4　讨论
　　复方中药物配伍后引起抑菌作用变化, 无论其
增强、加合还是拮抗,与配伍后煎液中的有效成分变
化有关,有效成分增多,抑菌作用相应增强, 反之则
减弱。GQD拆方研究中葛根、黄连、黄芩、炙甘草比
例为 15∶9∶9∶6,其中葛根、黄芩、炙甘草呈酸性,
而黄连有效成分呈碱性。四药配伍时相互之间的影
响,以酸性药对碱性药的溶出率影响最大, 而酸性药
物之间亦会相互影响[ 4]。
GQD具有抑菌作用, 其体外对金黄色葡萄球
菌、痢疾杆菌、肺炎双球菌均有一定的抑制作用[ 5, 6] ,
体内实验表明对金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌、肺炎双
球菌亦有明显的抑制作用[ 5]。
本实验从药效学角度侧重比较了 GQD 不同配
伍煎液对肺炎链球菌抑菌作用差异,从而为结合方
剂配伍-化学成分变化进而全面探讨方剂配伍规律
打下基础。
References:
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Cl in Chin M ater Med (中药药理与临床) , 2000, 16( 3) : 10-
13.
红豆杉细胞提取物抑制肿瘤细胞增殖及
诱导凋亡的实验研究
鲁翠涛1 ,赵应征2* ,梅兴国2

( 1. 华中科技大学生命科学与技术学院,湖北 武汉　430074; 2. 军事医学科学院毒物药物研究所, 北京　100850)
摘　要: 目的　研究红豆杉细胞提取物对肝癌细胞 SMM C-7721 的生长抑制作用及其机制。方法　运用台盼蓝拒
染法测定肿瘤细胞生长曲线, 流式细胞仪和 Giemsa 染色分析肿瘤细胞周期和细胞凋亡。结果　红豆杉细胞二氯甲
烷提取物对肝癌细胞 SMMC-7721 的生长有明显的抑制作用, 流式细胞仪分析发现 G 2/ M 期肿瘤细胞数量增多,
经 Giemsa 染色发现肿瘤细胞有凋亡发生。结论　红豆杉细胞提取物可以通过诱导细胞发生凋亡而抑制肝癌细胞
SMMC-7721 的生长。
关键词: 红豆杉细胞; SMMC-7721; 细胞增殖; 细胞凋亡
中图分类号: R286. 91　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2003) 11 1013 03
Extract from cultured cells of Taxus chinensis on proliferation inhibition
and apoptosis induction of tumor cells
LU Cui-tao
1, ZHAO Ying-zheng
2, M EI Xing-guo
2
( 1. School o f Life Science and Techno log y, Huazhong U niver sity of Science and Technolog y , Wuhan 430074, China;
2. Instit ut e of Tox icolog y and Pharmacolog y, Academy o f M ilit ary Medical Sciences, Beijing 100850, China)
Abstract: Obj ect　To study the inhibito ry effect and mechanism of ex t ract fr om cultured cell of Taxus
chinensis ( Pilg . ) Rehd. on hepatocarcinoma cell line SMMC-7721. Methods　T rypan blue stain assay w as
·1013·中草药　Chinese T radit ional and Herbal Drugs　第 34 卷第 11 期 2003年 11 月

收稿日期: 2003-02-16基金项目: “九五”国家攻关项目 ( 96-C02-03-01)作者简介: 鲁翠涛( 1974—) ,女, 湖北天门人,华中科技大学生命科学与技术学院 2000级博士研究生, 研究方向为红豆杉细胞药理筛选及大规模细胞培养研究。E-mail: letzyz@ sina . com
* 通讯作者　T el: ( 010) 66932654