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Analysis of loureirins in roots,stems,and leaves of Dracaena cochinchinensis

剑叶龙血树根、茎、叶中血竭成分分析



全 文 :中草葑ChineseTraditionalandHerbalDrags第36卷第10期2005年L11月·1545·
剑叶龙血树根、茎、叶中血竭成分分析
陈定芳.采启示’
(中国科学院西双版纳热带植物园中国科学院研究生院,云南昆明 650223)
插要目的 通过对比剑叶龙血树根、茎,叶成分与龙血竭成分同的异同及对剑叶龙血树根、茎,叶中龙血素A,B
的测定,寻找龙血竭原料的町能来源。方法薄屡色谱法敷高技液相色谱技术。结果剑叶龙血树根、茎、叶中均含
有微量的龙血素A,分别为c58、53、16Yg/g;叶中还岔有微量的龙血索B,为?vg/g,而根,茎样品中未能检删到龙
血素B。结论从色谱峰的积分面积及保留时间来看,剑叶龙血树根、茎、叶成分与血竭原料有少许的相关性,但差
异显著;报、茎、叶3者问的化学组成成分也存在着显著差异,剑叶佗血树根、茎、叶中皿血素量都较低,不能直接用
作生产血蝎的原料。
关键词:剑叶龙血树;血竭;龙血煮}高教液相色谱
中国分类号tR282.6 文献标识姆:A 文章编号:02532670(20C5)101 45—03
Analysisofloureirinsinroots。stems,andleavesofDrocoenocochinchinens妇
CHENDing—fang.SONGQi—shi
(Xlshua“gbannaTropicalBotanicalGarden.theGraduateSehoni,ChineseAcademyofSciences,Kanming650223,China)
Abstract:ObjectiveThexperimentcomparedthechemicalcomponentsintheroots,stems,and
lRavesofDracaenacochinchinensiswiththo einthetawmaterlalofDragon
7
sblood,inordertofindthe
possiblelilwmaterialofDragon’6blood.MethodsTechnologyofthinlayerbromarography(TI,C)and
highperformanceliquidhromatography(HPLC)-ResultsTheresultsshowedthatheroots-stems,
andleavegolD.cochi∞chinensisjustcontainedsinailamountof10ureirinA,thecontentsof10ureirinAof
thethreesamplesare:58·53,and15ttg/g,respectively.LoureirinBwasonlyd tectedintheleaveswith
contentof2pg/g.ConclusionFr mtheanalysisofpeakareasndtheretentionme,thereareonly
slightcorrelationsaiilollgthecomponentsDfthefoursamplesandthechemicalomponentsamongthe
root8,stem,andleavesarcdifferent。MofeGltu,thereLstOOIOWcontentofIcureirinsintheroots,stem,
andleavestoberawmaterialofDragon
7
s blood.
Keywords:Dracaenacockinchinensis(Lout.)S.C.Chen;Dragon
7
sblood:loureirins‘HPLC
血竭是一种传统的内服外用的活血中药,在中
国有上千年的使用历史,对于国产血竭的研究近年
也逐渐形成丁系统全面的探讨,主要包括国产血竭
的基源植物、有效成分、临床应用及形成机耕等等。
根据现有的认识,血竭是某些植物的一种次生代谢
产物,这些植物包括棕榈科(Palmae)、龙舌兰科
(Agavaceae)、豆科(Leguminosae)及大戟科(Eu—
phorbiaeeae)。现在我国药厂生产、临床使用的龙血
竭主要是取捌于龙舌兰科龙血树属的植物。一般认
为血竭是龙血树受到损伤后感染真菌等微生物,两
者相互作用产生某些生化反应,改变龙血树生理代
谢途径,从而刺激龙血树产生的一种具有防御作用
的代谢产物。在自然条件下,血竭形成缓慢,同时血
蝎的基源植物龙血树在野生环境中资源储备少。随
着血竭在医学临床中应用范围的拓展,血竭有供不
应求的趋势。为了更好地利用血竭资源植物,同时僳
证血竭稳质稳量的持续开发.本实验对剑叶龙血树
根、茎、叶中血竭成分作了检测,试图寻找血竭可能
的原料来源。
1材料与方法
1.t供试材料:根、茎、叶均取自云南省勐仑镇中国
科学院西双版纳热带植物园内自然生长的剑叶龙jf;£
树西-acaenacochinchinensis(Lour.)S.C.Chen。
龙血竭为西双版纳雨林制药厂用于加工生产龙
鉴鐾品留:留豢叠鬣骗改革委员会现代申药产业化专项舞助
譬翥薷荏拳岛豁禁”~Te“l,女(08+7胡1)65衡160阳00^21车墨詈志三嚣鉴事m暂bg用.a。植.c物n化学研究{。⋯““““@“垤”“
万方数据
·1546· 中草药ChineseTraditionalandHerhalDrugs第36卷第10期2005年10月
血竭胶囊的血竭块,是剑叶龙血树含竭木的乙醇提
取物。
1.2材料处理:分别称取一定量的剑叶龙血树根、
茎、叶(均已风干,剑叶龙血树根总质量为619.6g,
茎干总质量为200g,叶总质量为5495.8g),用工
业乙醇浸提3次+水浴加热,每次约8h,得到的初提
物再分别蒸馏浓缩,称量后(根浓缩物质量为164.4
g,茎干浓缩物质量为22.6g,叶浓缩物质量660.5
g)用甲醇洗出(准确记录洗出液的体积:根提取物的
洗出液为420ml。,茎干提取物洗出液为28ml。,叶
子提取物洗出液为1600mI。)。滤过后冷藏备用。
1.3薄层色谱法:使用氯仿一甲醇(9:1)。加少量甲
酸或水在硅胶薄层板上进行色谱分离,展开1~2
次.用10%浓硫酸乙醇溶液加热显色。
1.4高敛液相色谱法
1.4.1仪器和试剂:日本岛津I。C2010AHT型高
效液相色谱仪。龙血素A对照品(本实验室分离得
到。经质谱和核磁共振鉴定结构),龙血素B(雨林制
药厂用于质检的标准样品),乙腈(色谱纯),其他试
剂均为分析纯。
1.4.2 色谱条件:色谱柱:20rbax—SB—C、。柱(250
mm×4.5mITl);流动相:1%冰醋酸溶液一乙腈(63:
37);检测波长:260171m;柱温:30C左右;进样量:10
ffI。;体积流鼍:1ml,/rain。
L4.3对照品溶液的制备:分别精密称取一定量的
龙血素A、B,用流动相溶液充分溶解,滤过,超声波
处理l5~20min,再定容到一定体积备用。
1.4.4供试品溶液的制备:精密称取龙血竭0.250
g,用乙腈1%冰醋酸(50:50)溶解.滤过后超声波
处理15rain.再定容到25mI。,充分摇匀备用。分别
量取一定体积的剑叶龙血树根、茎、叶样品溶液,用
甲醇水(4:6)充分溶解,滤过.然后定容到一定体
积备用(根提取物贮备液取1m1..用蒸馏水定容到
5mI。备用;茎提取物贮备液直接取样2mI,;叶提取
物贮备液取lmL,用蒸馏水定容到2mI,备用)。
根、茎、叶的备用溶液分别编号为DMR、DS、DI。。
1.4.5线性关系考察:分别精密称取适量的龙血索
A、B,用流动相充分溶解,使龙血素A、B的质量浓
度分别为:0.334、0.168mg/ml,;0.840、0.320mg/
mI。;0.310、0.052mg/mI。。龙血素A、B对照液分别
以10pl。进样,在上述色谱条件下,测定其峰面积积
分值。以峰面积积分值(y)对迸样量(x)进行回归。
结果表明龙血素A在3.1~8.4pg,龙血素B在
0.52~1.68pg呈现良好的线性关系,龙血素A、B
的回归方程分别为:Y一4.033×107X一3.778×
106,,一0.9878lY=2,926×107X一2.259×105,
r—O.9664。
2结果
2.1薄层色谱:在氯仿一甲醇(9:1,加少量的甲酸
或水)的溶剂系统中展开1~2次,用10%硫酸乙醇
溶液显色,龙血竭、剑叶龙血树根、茎、叶酒精提取物
在硅胶薄层板上均能较好地展开,Rf值在0.6~
0.85,并且从显色的结果(显色点的大小、形状及颜
色)可看出,这4者的成分组成问有一定的相关性.
有共同的成分,但总的来说,4者的化学成分组成间
存在较大差别。结果见图1。
O:。。o
6 。
oOoO
言弓oO
o4九。
嚣.Yo
口ooO
oo
2 3 4 5 6
l龙帆竭2一剑叶龙血树根提取物3剑叶龙血树茎提取物
4剑叶龙血树Dt‘提取物5一止血隶A6-龙血隶B
1一Dragon‘sblood2 cxtrBc[sofrootsofDcochinchinen^is
3 extractsofsten¨ofD⋯hinchinens』s4 extractsof
]eavesofD.(och/nch/nenM』5-IoureirinA 6-loureirin13
圈1龙血竭、剑叶龙血{对根,茎、叶提取物薄层色谱围
Fig.1TLCofrawmaterialofDragon’Sblood
andextractsfromroots,stem,and
leavesofD.cochinchinenxis
2.2高效液相色谱:从高效液相色谱分析的各个峰
积分面积与保留时间来看(图2),剑叶龙血树的根、
茎、叶成分与血竭原料的成分仅存在少量的相似性。
它们之间在化学组成上的差异是显著的。根据高效
液相色谱的定量分析,得知剑叶龙血树根、茎、叶样
品中均含有一定量的龙血素A(表1),其质量分数
分别为58、53、15t。glg,而对于龙血素B,因为根、茎
样品质量浓度过低,未能检测出来,只在剑叶龙血树
叶的提取物中显示出有少量的存在.其质量分数2
t。g/g。剑叶龙血树根中龙血素A的量比茎、叶中的
龙血素A量要大,但根、茎、叶中龙血素的量均远远
小于龙血竭中龙血素的量。
3讨论
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第10期2005年lo月·1547·
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^龙血索A和BB龙血竭C剑Ⅱ}地m村根提取物n一割
叶龙血树革提取物E剑叶龙血树叶提取韧
A—IoureirinsAa dB BrawmaterialofDragon‘sbloodC
extractsofrOOtSofD.‘,Jc^』,?⋯hir,j^¨ I)一£xtractofstemofI)
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图2 血蝠原料及剑叶龙血树根、茎、叶乙醇提取物HPLC围
Fig.2HPLCChromatogramofrawmateriaIof
Dragon‘Sbloodandextractsfromroots.
stem.andleavesofDcochinchinef/$/s
表1血蝎原料、剑叶龙血树根、茎、叶提取物HPLC数
据及样品中龙血素A和B(H=3)
Table1 LourelrinsAa dBofextractsofroots.stem.
andIeavesofD.cochin幽in鲥s/s抽一3)
髓着血竭应用范围的扩增及市场需求的加大
仅仅依靠现存野生龙血树进行原料取材已不能满足
血竭的生产·为了保证龙血竭优质优量的市场供应.
血竭的形成机制及原料来源问题亟待解决。近年来
有关血竭的成分组成及临床药理药效等已有较全面
系统的研究,现行的龙血竭质检标准是以龙血素B
为准,其质量分数须大于或等于0.4%。本实验通过
高教液相色谱技术对剑叶龙血树根、茎、叶化学组成
的分析比较,检测了3者中的龙血素.期望能为解决
血竭的原料来源问题提供一定的依据。从上述的实
验结果来看.剑叶龙血树中的龙血素在根、茎、叶中
逐渐递减一初步分析血竭的形成原因可能与植物组
织器官的功能有关.剑叶龙血树根中的龙血素A比
茎、叶中的高,这可能与根作为植物养分器官从土壤
中汲取营养成分提供给植株.长期跟土壤中微生物
接触有一定的关系.而剑叶龙血树叶及茎部分作为
植物的光合器官和运输的中转部分,裸露在空气中.
与微生物接触相对减少,血蝎的形成町能相对缓慢。
总的说来·剑叶龙血树根、茎、叶的化学成分组成均
与龙血竭有很大的差异.且龙血素A、B过低.其提
取物中龙血素B质量分数均低于0.4%的质量标
准,它们都不能直接用作血竭原料。对于剑叶龙血树
茎的化学组成曾有实验作过一定研究.但对于茎中
的各个成分问及其成分与血竭间的相关性未作深入
的分析.本实验室正进一步分析剑叶龙血素树叶子
的化学成分及与剑叶龙血树相关的真菌等微生物代
谢产物的组成成分.试图寻找剑叶龙血树根茎叶成
分与血竭的内在联系及真菌等微生物与龙血树问的
化学联系。为解决血竭的原料来源问题提供可能的
途径与方法。
References.
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万方数据
剑叶龙血树根、茎、叶中血竭成分分析
作者: 陈定芳, 宋启示, CHEN Ding-fang, SONG Qi-shi
作者单位: 中国科学院西双版纳热带植物园,中国科学院研究生院,云南,昆明,650223
刊名: 中草药
英文刊名: CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年,卷(期): 2005,36(10)
被引用次数: 5次

参考文献(3条)
1.Zhu H;Huang H B;Tian H Researches of the chemical con stituents of Dragons blood[期刊论文]-广西中医
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2.Xie Z W The textual research on original plants of Dragons blood 1989(07)
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引证文献(5条)
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2.赵晓辉.杨广瑾 血竭粉在压疮治疗的护理体会[期刊论文]-中国卫生产业 2013(33)
3.肖宏华.甄诚.许佳 HPLC-DAD法对通络活血胶囊中非法使用龙血竭的鉴别[期刊论文]-首都医药 2011(22)
4.赵洁.李尚真.宋启示 发酵生产龙血竭中龙血素A和B的分析[期刊论文]-天然产物研究与开发 2011(6)
5.王兴红 细菌、真菌共代谢转化龙血树木质形成黄酮类化合物[期刊论文]-天然产物研究与开发 2007(1)


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