全 文 :天给药 2 次,连续 9 d,第 9 天剪尾, 取血推片,瑞氏
染色,油镜下计数 100 个淋巴细胞中淋巴母细胞及
过渡态细胞数,计算它们分别占的百分率, 结果见表
4。肝得宁片大、中剂量组可使小鼠对 PHA 刺激的
转化反应增强,淋巴母细胞百分率与对照组比有显
著提高,说明肝得宁片能提高淋巴细胞的转化程度,
提高 T 细胞免疫和细胞免疫功能。
表 4 肝得宁片对小鼠淋巴细胞转化反应的影响( x±s)
组 别 剂 量
( g/ kg)
动物数
(只)
淋巴母细胞
( % )
过渡态细胞
( % )
对照组 - 10 15. 9±7. 8 28. 1±8. 2
护肝片 0. 8 10 25. 4±8. 5* 34. 2±8. 3
肝得宁 8 10 26. 3±8. 0* * 35. 7±7. 6*
4 10 23. 1±6. 9* 32. 9±8. 0
2 10 22. 0±5. 2 33. 3±6. 4
左旋咪唑 0. 04 10 31. 7±6. 9* * 36. 3±7. 9*
与模型对照组比较: * P < 0. 05 * * P < 0. 01
3 讨论
乙型肝炎的临床表现与机体免疫功能状态密切
相关。乙肝易导致慢性迁延性过程,一个重要的原因
是机体免疫功能不足。祖国医学在肝炎的中药治疗
过程中,充分发挥其保肝降酶、抗病毒作用的同时,
非常注意提高机体的抗病能力, 减轻致病因素对机
体的损伤。
本研究采用不同的免疫功能低下动物模型来评
价肝得宁片对免疫功能的影响, 旨在通过胃肠道吸
收后观察其对免疫系统的作用,了解肝得宁片对乙
型肝炎的疗效与其增强免疫功能的相互关系, 从而
探讨肝得宁片在治疗乙型肝炎中的免疫药理效应。
试验结果表明, 肝得宁片可使 BCG+ LPS 诱导升高
的小鼠血清转氨酶明显降低, 表明肝得宁对小鼠免
疫性肝损伤有明显的保护作用。在碳粒廓清法实验
中, 肝得宁片可提高廓清率 K 值,提高小鼠单核吞
噬细胞的吞噬指数和吞噬活性,说明肝得宁片对网
状内皮系统吞噬功能具有明显的激活、增强作用。提
示肝得宁片对小鼠非特异性免疫功能具有增强作
用。并且, 肝得宁片可明显改善环磷酰胺所致的小鼠
血清溶血素含量降低,提高小鼠半数溶血素含量。可
使小鼠对 PHA 刺激的转化反应增强, 提高淋巴细
胞的转化率。提示肝得宁片亦可提高小鼠特异性体
液免疫和细胞免疫功能。
本实验通过观察肝得宁片对多项免疫指标的影
响, 证明肝得宁片可增强小鼠的体液免疫和细胞免
疫, 提高机体免疫机能, 并呈一定的剂量依赖关系,
提示肝得宁片具有较好的免疫功能增强作用。
参考文献:
[ 1] 王明宇,刘 强,车庆明,等 . 灵芝三萜类对 3种小鼠肝损伤模
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[2] 李仪奎 . 中药药理实验方法学[ M ] . 上海:上海科学技术出版
社, 1991.
[ 3] 陈 奇 . 中药药理研究方法学[ M ] . 北京: 人民卫生出版社,
1993.
百草降糖片降血糖作用机制研究
茅彩萍,徐乃玉, 顾振纶
(苏州大学医学院 药学系药理教研室、苏州中药研究所, 江苏 苏州 215007)
摘 要: 目的 探讨百草降糖片的降血糖作用机制。方法 观察了百草降糖片对正常小鼠血糖、血清胰岛素、胰高
血糖素、肝糖原、肌糖原的影响, 并且观察了百草降糖片对糖尿病大鼠的血清胰岛素、C 肽、超氧化物歧化酶
( SOD )、过氧化脂质( LPO )的影响。结果 百草降糖片在降糖的同时能刺激胰岛素的分泌,降低胰高血糖素的含
量, 而且能增加肝糖原、肌糖原的含量; 对四氧嘧啶糖尿病大鼠在降糖的同时也能增加胰岛素、C 肽水平, 而且能显
著增加血清 SOD 的活性, 降低 LPO 含量。结论 百草降糖片的降血糖作用可能是既通过影响糖代谢,又通过改善
胰岛功能, 促进胰岛素分泌来实现的。
关键词: 百草降糖片;作用机制; 血糖
中图分类号: R286. 72 文献标识码: A 文章编号: 0253 2670( 2002) 02 0149 03
Studies on hypoglycemic mechanism of BAICAO JIANGTANG TABLET
*
MAO Cai-ping , XU Nai-yu, GU Zhen-lun
( Depar tment o f Pharm acy , Medical Co llege o f Suzhou U niver sity , Suzhou Institute of T CM , Suzhou Jiangsu 215007, China )
·149·中草药 Chinese T raditional and Herbal Drug s 2002 年第 33卷第 2期
收稿日期: 2001-08-11基金项目:江苏中医药管理局资助项目,编号 9948作者简介:茅彩萍( 1968-) ,女,江苏苏州人,现苏州大学攻读心血管内科学博士学位,讲师。研究方向:中药药理学及生药学。主持省级课题
2 项,发表科研论文 10篇。T el : 0512-5125270 E-mail : s zzys@ publicl. sz . js. cn.
Key words : BAICAO JIANGT ANG T ABLET ; hypog lycem ic mechanism ; ser um g lucose
*
BAICAO JIANGT ANG T ABLET is a Chinese herbal preparat ion w ith the funct ion o f hypoglycemia.
前文 [ 1]报道了百草降糖片的降血糖作用,为进
一步探讨其作用机制, 本研究以正常小鼠为模型观
察了百草降糖片的作用环节, 并且以糖尿病大鼠为
模型, 观察了百草降糖片对糖尿病大鼠的血清胰岛
素、C 肽、LPO 的含量和 SOD 活性的影响。
1 材料
1. 1 动物: 昆明种小鼠, 雌雄兼有,分笼饲养,体重
为 18~22 g ; Wistar 大鼠, 雄性, 体重 180~230 g,
均由苏州大学医学院实验动物中心提供。
1. 2 药物:百草降糖片,苏州中药研究所自行研制,
由黄芪、黄连、魔芋及丹参等配伍组成的复方中药制
剂,药材购于苏州药材公司,实验室制成每 1 mL 药
液含 1 g 药材的水煎液。金芪降糖片为天津市中药
制药厂产品; 葡萄糖氧化酶试剂盒为卫生部上海生
物制品研究所产品; 胰岛素放射免疫药盒为中国原
子能科学研究所产品; SOD 试剂盒为南京聚力生物
工程研究所产品; LPO 试剂盒为四川省卫生管理干
部学院医学科技服务部产品; 四氧嘧啶为 Sigma 公
司产品;其它试剂均为国产分析纯。
1. 3 仪器: SN-682 型放射免疫 计数器为上海核
福光电仪器有限公司制造。
2 实验方法与结果
2. 1 百草降糖片对正常小鼠血糖、血清胰岛素、胰
高血糖素、肝糖原、肌糖原的影响:正常小鼠 50只,
随机均分为对照组, 金芪降糖片组 ( 1. 80 g / kg ) , 百
草降糖片 0. 75, 1. 50, 3. 00 g / kg 3 个剂量组, 每天
ig 1 次, 连续 14 d, 末次给药后 2 h,眼眶静脉取血
用葡萄糖氧化酶法[ 2]测血糖、用放射免疫法按试剂
盒说明书测定血清胰岛素、胰高血糖素,并取肝脏、
膈肌用改良的蒽酮法 [ 3]测定糖原含量。结果: 百草降
糖片 1. 5, 3. 00 g/ kg 两个剂量组能显著降低正常小
鼠血糖,增加肝糖原和减少胰高血糖素的含量,促进
胰岛素的分泌(表 1)。
2. 2 百草降糖片对四氧嘧啶糖尿病大鼠胰岛素、C
表 1 百草降糖片对正常小鼠血糖、血清胰岛素、胰高血糖素、肝糖原、肌糖原的影响( x±s)
组 别 剂 量
( g/ k g)
血 糖
( mm ol / L)
胰岛素
( mU/ m L)
胰高血糖素
( pg/ mL)
肝糖原
( mg/ g 肝重)
肌糖原
( mg/ g 膈肌)
对 照 - 7. 52±1. 31 23. 72±4. 62 350. 72±53. 28 7. 32±0. 72 1. 46±1. 04
金芪降糖片 1. 80 6. 41±0. 82* 27. 35±2. 81* 295. 15±58. 31* 8. 23±0. 64* 2. 14±0. 73
百草降糖片 0. 75 7. 08±1. 09 23. 92±3. 14 301. 54±62. 72 7. 94±0. 59 1. 45±1. 27
1. 50 6. 34±1. 17* 24. 89±2. 37 286. 52±71. 31* 8. 52±0. 89* 1. 62±0. 89
3. 00 6. 03±0. 87* 28. 01±4. 25* 215. 01±57. 24* 8. 79±0. 73* 1. 98±1. 17
与对照组比较: * P < 0. 05
肽、LPO 的含量和 SOD 活性的影响: Wistar 大鼠,
尾 iv 四氧嘧啶 65 mg / kg, 72 h 后眼眶取血测空腹
血糖,选取血糖值> 13. 88 mmol / L 大鼠 27 只用于
实验, 随机分成 4 组 (组间平均血糖值 < 0. 62
mmol/ L ) , 分别设糖尿病模型组, 金芪降糖片组
( 1. 80 g/ kg ) ,百草降糖片 1. 50, 3. 00 g / kg 组, 另取
10 只相同重量的正常雄性 Wistar 大鼠为生理盐水
对照组。所有动物每日 1 次 ig 1 mL/ 100 g 相应药
物,连续 4 周。末次给药后 2 h, 麻醉,腹主动脉取血
测血糖、用放射免疫法测定血清胰岛素、C 肽的含
量, 用黄嘌呤氧化酶法测定 SOD 活性[ 4] ,用硫代巴
比妥酸比色法 [ 5]测定 LPO 含量。结果与模型组相
比,百草降糖片能显著降低糖尿病大鼠的血糖,升高
SOD 活性,降低 LPO 的含量,并且大剂量组能明显
促进胰岛素分泌和增加 C 肽的含量(表 2)。
3 讨论
糖尿病是胰岛功能受损, 胰岛素分泌不足而引
起的代谢紊乱的一种内分泌疾病, 一般认为降血糖
表 2 百草降糖片对糖尿病大鼠血糖、胰岛素、C 肽、LPO的含量和 SOD 活性的影响( x±s)
组 别 剂 量
( g/ kg)
动物数
(只)
血 糖
( mmol /L )
胰岛素
( mU/ mL )
C 肽
( ng/ mL)
SOD
( nU/ mL)
L PO
( mmol/ mL)
对 照 - 10 5. 59±0. 56 9. 54±0. 58 1. 23±0. 37 145. 21±2. 82 0. 92±0. 19
模 型 - 8 19. 29±2. 02 4. 83±0. 42 0. 79±0. 48 83. 14±3. 52 1. 78±0. 31
金芪降糖片 1. 80 6 14. 12±1. 46* * 5. 31±0. 47* 1. 05±0. 32* 103. 24±2. 97 1. 19±0. 29* *
百草降糖片 1. 50 7 13. 87±1. 34* * 5. 27±0. 62 0. 92±0. 41 119. 74±4. 28* 1. 09±0. 15* *
3. 00 6 11. 20±1. 31* * 5. 94±0. 51* 1. 10±0. 29* 127. 49±3. 86* * 0. 89±0. 32* *
与模型组比较: * P < 0. 05 * * P < 0. 01
·150· 中草药 Chinese T raditional and Herbal Drug s 2002 年第 33卷第 2期
的作用机制主要涉及两个方面 [ 6] , 一是促进胰岛素
的分泌和释放或是抑制胰高血糖素的分泌; 二是影
响胰岛素受体后代谢的某些环节, 主要是抑制肝脏
的糖异生作用,其目的均是降低并控制血糖。本研究
从胰岛素水平、C 肽、胰岛素受体后效应探讨了百草
降糖片降低血糖的作用机制。
四氧嘧啶是一种特异性的 细胞毒剂, 能选择
性地破坏胰岛 细胞,引起实验性糖尿病[ 7]。结果显
示百草降糖片对四氧嘧啶所致的血糖升高有明显的
抑制作用,这表明百草降糖片可减弱四氧嘧啶对胰
岛 细胞的损伤或改善受损伤的 细胞的功能。
胰高血糖素能促进糖异生作用而使肝糖原输出
增多,百草降糖片能对抗这种作用。百草降糖片能增
加肝糖原、肌糖原的含量, 另外降糖的同时, 也能促
进正常小鼠和糖尿病大鼠胰岛素的分泌和增加 C
肽的含量。由此可说明百草降糖片降血糖作用机制
可能是一方面通过防止葡萄糖在肠道吸收, 另一方
面通过改善胰岛功能, 促进胰岛素分泌来降低血
糖的。
糖尿病对机体氧化应急增加, 自由基及其产物
的产生和清除障碍与糖尿病, 尤其是大血管、微血
管、神经并发症的发病有关, 受自由基的作用,体内
生物膜中的多价不饱和脂肪酸发生过氧化反应,生
成 LPO, 糖尿病患者中 LPO 明显增高,测定 LPO
含量可反映机体脂质过氧化的速率和强度 [ 8]。SOD
是机体清除氧自由基的一种重要酶,其活力的高低
与衰老、肿瘤及血液、心血管、内分泌系统等疾病有
着十分密切的关系,也可反映机体清除自由基能力
的高低。已有较多资料表明, 糖尿病模型及临床 Ⅰ
型、Ⅱ 型糖尿病,均存在着氧自由基代谢紊乱, SOD
活性降低, LPO 增高[ 9]。本实验结果表明,百草降糖
片能显著升高 SOD 水平,降低 LPO 含量, 从而说
明百草降糖片具有明显的抗氧化作用和清除氧自由
基的能力, 故百草降糖片对糖尿病并发症的发生也
可起到一定的预防和治疗作用。
参考文献:
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[ J] . 中草药, 2001, 32( 12) : 1111-1113.
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和血浆过氧化脂质的变化[ J ] . 中华内分泌代谢杂志, 1990, 6:
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蟾蜍灵诱导白血病 HL-60 细胞分化及相关基因表达
徐瑞成1 ,陈小义1 ,陈 莉1,呼文亮1,钱 进2
( 1. 武警医学院,天津 300162; 2. 天津药物研究院, 天津 300193)
摘 要:目的 研究中药蟾酥中蟾毒成分蟾蜍灵 ( bufalin) 的抗癌机制。方法 以早幼粒白血病 HL-60 细胞为靶细
胞, 应用电镜技术观察 bufalin 诱导的细胞分化, 免疫组化方法检测增殖细胞核抗原 ( PCNA ) 和细胞周期素依赖性
蛋白激酶抑制因子 p21WAF 1的表达。结果 0. 001 mo l/ L bufalin 作用 HL -60 细胞, 细胞向粒细胞方向分化,
p21WAF1表达显著升高,而 PCNA 表达显著下降,二者呈显著负相关 (P < 0. 01)。结论 bufalin 诱导 HL-60 细胞分
化, 与其上调 p21WAF1的表达、下调 PCNA 表达有关。
关键词: 蟾蜍灵; HL-60 细胞; 细胞分化; p21WAF1 ;增殖细胞核抗原; 基因表达
中图分类号: R286. 91 文献标识码: A 文章编号: 0253 2670( 2002) 02 0151 03
·151·中草药 Chinese T raditional and Herbal Drug s 2002 年第 33卷第 2期
收稿日期: 2001-08-18基金项目:天津市自然科学基金重点项目资助 项目号: 013804311作者简介:徐瑞成, 32岁,副教授,硕士。主要从事细胞周期和细胞凋亡的研究,发表论文 10余篇。