全 文 ：收稿日期:2007-05-02;　修订日期:2007-07-12
基金项目:浙江省自然科学基金资助项目(No.Y204256)
作者简介:聂　 (1985-),男(汉族),浙江嘉兴人 ,现就读浙江中医药大
学药学院 ,主要从事中药新产品开发研究工作.
＊通讯作者简介:熊耀康(1959-), 男(汉族),浙江杭州人 , 现任浙江中医
药大学药学院教授 ,学士学位 ,主要从事中药资源研究与开发利用工作.
石荠苧总黄酮抗炎作用及其机制研究
聂　 ,余陈欢 ,王芳芳 ,熊耀康＊ ,白冰冰
(浙江中医药大学药学院 ,浙江 杭州　310053)
摘要:目的 观察石荠苧总黄酮抗炎作用并对其机制进行初步研究。 方法 采用二甲苯致小鼠耳肿胀 , 冰醋酸致小鼠腹
腔毛细血管通透性增加 ,角叉菜胶致小鼠足跖肿胀及大鼠气囊炎等炎症模型 ,观察石荠苧总黄酮对不同炎症模型的抗炎
作用 , 并测定蛋白质 、前列腺素 E
2
(PGE
2
), 一氧化氮(NO),丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性。 结果 石
荠苧总黄酮能显著降低小鼠毛细血管通透性 ,抑制小鼠二甲苯致耳肿胀 ,减轻小鼠足跖肿胀 ,降低炎症组织 PGE2含量 ,抑制角叉菜胶致大鼠气囊炎模型中渗出液总蛋白质含量 ,降低血浆 NO, MDA含量 ,增强血浆 SOD活性。结论 石荠苧总
黄酮具有明显的抗炎作用 , 其抗炎作用可能与其降低血管通透性 、抑制 PGE
2
, NO等炎症介质生成及增强清除氧自由基 、
抗脂质过氧化能力有关 。
关键词:石荠苧;　总黄酮;　抗炎;　作用机制
中图分类号:R285.5　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2008)01-0065-02
StudyontheAnti-inflammatoryEffectandMechanismofFlavonesinMoslahangzho-
wensisMatsuda
NIEBen, YUChen-huan,WANGFang-fang,XIONGYao-kang＊ , BAIBing-bing
(PharmaceuticalColege, ZhejiangUniversityofTraditionalChineseMedicine, Hangzhou, Zhejiang310053,
China)
Abstract:ObjectiveTostudytheanti-inflammatoryeffectofflavonesinMoslahangzhowensisMatsudaanditsmechanism.
MethodsAuricleedemainducedbydimethylbenzene, permeabilityofbloodincreasebyHAcandedemainfeetinducedbycarrag-
eenaninmice, Air-pouchacuteinflammationinducedbycarrageenaninratswereappliedforanti-inflammatoryexperiments.
Anti-inflammatoryeffectofflavonesinMoslahangzhowensisMatsudawereobsevedindiferentmodels, thenthecontentofpro-
tein, prostaglandinE2(PGE2), nitrogenmonoxidum(NO), malonaldehyde(MDA)andtheactivityofsuperoxidedismuitase(SOD)weredetermined.ResultsFlavonesinMoslahangzhowensisMatsudacouldinhibitvasopermeabilityandengorgementofinflammatory
texture, decreasetotalproteincontentineflusion, reducePGE
2
, NO andMDA contentsandincreaseSODactivity.
ConclusionThemechanismsofanti-inflammatoryactionofflavonesinMoslahangzhowensisMatsudaarerelatedtothedepression
ofvasopermeability, reductionofinflammatorymediatorsandaugmentationofoxygenfreeradicalseavengirgcapacityandanti-lip-
idperoxidation.
Keywords:MoslahangzhowensisMatsuda;　Flavones;　Anti-inflammatoryeffect;　Mechanism
　　石荠苧 MoslahangzhowensisMatsuda为唇形科草本植物 , 为
江浙民间常用中草药 , 具有清热解毒 ,理气化湿之功效 ,主治夏日
感冒 、腹痛泄泻 、湿疹 、疖肿 、外伤出血 、跌打损伤 、疮毒和慢性支
气管炎等 [ 1] 。现代药理研究表明 , 石荠苧含有 1, 8 -桉叶油素 、
侧柏酮 、β -石竹烯 、香荆芥酚 、百里香酚 、黄酮类化合物及脂肪
酸等成分 [ 2, 3] 。本课题组前期研究发现 , 石荠苧中总黄酮类成分
具有明显的抗菌 、抗流感病毒作用 , 能明显改善流感病毒感染小
鼠肺组织炎症 [ 4, 5] 。本实验进一步对其抗炎作用及其机制进行
系统研究 , 以期为石荠苧的临床应用和新药开发提供实验依据。
1　器材
1.1 　动物 ICR小鼠 , 体重 18 ～ 22 g;健康 Wistar大鼠 , 清洁
级 , 体重 180 ～ 200g。均由中国科学院上海实验动物中心 /上海
斯莱克实验动物有限公司提供 , 动物合格证号:XYXK(浙) -
2003-0003。
1.2　 药品与试剂 石荠苧总黄酮(TFS), 由资源鉴定教研室提
供。地塞米松片(批号:061218), 浙江仙居制药厂。阿司匹林肠
溶片(批号:061102),南京白敬宇制药有限责任公司。氢化可的
松(批号:061210), 山东新华制药股份有限公司。 角叉菜胶(批
号:45F-0427), Sigma公司。伊文思蓝(批号:F20040213, 进口
分装),国药集团化学试剂有限公司。 SOD检测试剂盒(批号:
20070331), NO检测试剂盒(批号:20070331), MDA测定试剂盒
(批号:20070402),总蛋白液体试剂盒(批号:20070403), 均购自
南京建成生物工程研究所。其他试剂均为分析纯。
1.3　仪器 TU-1900双光束紫外可见分光光度计 , 北京普析通
用仪器有限责任公司。 BS110S电子天平 , 北京赛多利斯公司。
微量移液器 , ThermoLabsystemsFinnPipette。
2　方法与结果
2.1　对冰醋酸致小鼠毛细血管通透性的影响 [ 6] 取小鼠 50只 ,
雌雄各半 ,随机分成 5组 ,分组及给药剂量见表 1(模型组给予同
体积生理盐水)。每日灌胃给药 , 1次 /d, 连续 5 d,末次给药后 1
h,尾静脉注射 0.5%伊文思蓝生理盐水溶液 0.1 ml/10 g,并同时
腹腔注射 0.6%醋酸溶液 0.1ml/10 g, 20 min后处死 , 用 6 ml生
理盐水冲洗腹腔 ,洗液离心 5min(1 500 r/min),取上清液在分光
光度计 590 nm处 ,测定值。
表 1　TFS对小鼠毛细血管通透性的影响( x±s)
组别 剂量 C/mg· kg-1 OD值 抑制率(%)
模型 - 0.156±0.019
地塞米松 10 0.096±0.033＊＊ 38.46
TFS低 25 0.114±0.030＊ 26.92
TFS中 50 0.106±0.032＊ 32.05
TFS高 100 0.103±0.028＊＊ 33.97
　　与模型组相比 , ＊P<0.05, ＊＊P<0.01;n=10
由表 1结果可知 , TFS能显著抑制冰醋酸致小鼠毛细血管通
透性 , 其中 TFS25, 50, 100 mg/kg剂量组与模型组相比较有显著
意义。
·65·
LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2008VOL.19NO.1 时珍国医国药 2008年第 19卷第 1期
2.2　对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响 [ 6] 取小鼠 50只 , 雌雄各半 ,
随机分为 5组 ,分组及给药剂量见表 2(模型组给予同体积生理
盐水)。每日灌胃给药 , 1次 /d,连续 5 d,末次给药 30 min后 ,于
小鼠右耳两面涂二甲苯 0.05ml致炎 , 左耳不涂为正常耳;1 h后
处死小鼠 , 沿耳廓基线剪下双耳 , 用直径 6 mm打孔器在同一部
位取下耳片 , 称重 , 以左右耳片重量差值表示炎性肿胀程度。由
表 2结果可知 , TFS能显著抑制二甲苯致小鼠耳肿胀 , 其中 50,
100mg/kg剂量组与模型组相比较有显著意义。
由表 2结果可知 , TFS能显著抑制二甲苯致小鼠耳肿胀 ,其
中 50, 100 mg/kg剂量组与模型组相比较有显著意义 。
表 2　TFS对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响( x±s)
组别 剂量C/mg· kg-1
肿胀度
C/mg· (10g)-1
肿胀抑制率
(%)
模型 - 2.67±0.46
地塞米松 10 1.35±0.58＊＊ 49.44
TFS低 25 2.38±0.51 19.85
TFS中 50 1.92±0.51＊ 28.09
TFS高 100 1.48±0.36＊＊ 44.57
　　与模型组相比 , ＊P<0.05, ＊＊P<0.01;n=10
2.3　对角叉菜胶引起足跖肿胀及炎症组织中 PGE2的影响 [ 7] 取
小鼠 50只 , 雌雄各半 ,随机分为 5组 ,分组及给药剂量见表 3(模
型组给予同体积生理盐水)。每日灌胃给药 , 1次 /d,连续 5 d,末
次给药后 30 min, 于每只小鼠左后肢足跖注射 1%角叉菜胶 50
μl, 4h后颈椎脱臼处死小鼠 ,于踝关节处剪下左右后肢 , 称重 ,以
左右后肢重量之差作为炎症肿胀程度。 将剪下上述致炎足 , 剥
皮 , 剪碎放入 2ml生理盐水中浸泡 24 h, 离心 ,取上清液 0.1 ml,
加 0.5 mol/LKOH-甲醇溶液 2 ml,在 50℃下异构化 20min,用
甲醇稀释至 4 ml,于 278 nm处测定 OD值 ,以每克炎症组织相当
的 OD值表示 PGE2的含量。
表 3　 TFS对小鼠足跖肿胀及炎症组织 PGE2 含量的影响( x±s)
组别 剂量C/mg· kg-1
足跖肿胀
m/mg
PGE2 含量
(OD值 /g组织)
模型 - 45.41±3.14 2.84±0.73
阿司匹林 10 23.10±5.69＊＊ 2.29±0.19＊＊
TFS低 25 39.19±4.45＊ 2.78±0.43
TFS中 50 38.04±5.50＊＊ 2.63±0.30＊
TFS高 100 33.56±5.69＊＊ 2.30±0.12＊＊
　　与模型组相比 , ＊P<0.05, ＊＊P<0.01;n=10
由表 3结果可知 , TFS能显著抑制角叉菜胶致小鼠足趾肿胀
及降低炎症组织 PGE2含量 ,其中 TFS50, 100 mg/kg剂量组与模
型组相比较具有显著意义。
2.4　对角叉菜胶致大鼠气囊炎的影响 [ 6] 取大鼠 60只 , 按体重
随机分为 6组:空白组 、模型组 、阳性对照组及石荠苧总黄酮高 、
中 、低剂量组。除空白组和模型组给予同等生理盐水外 , 每组动
物均连续灌胃给药。于给药当天在大鼠背部肩胛区皮下注入空
气 10ml, 第 3天及第 6天再次注入空气各 5 ml,维持气囊的膨胀
度 , 并在末次给药后在大鼠背部气囊内注入 2 %角叉菜胶 2 ml
诱发炎症 , 空白组注入相应体积生理盐水 , 3 h后再给药 1次 ,于
致炎 6 h后麻醉 , 心脏取血 , -20℃保存待测 NO, MDA含量及
SOD活性。处死动物 ,气囊内注入冰生理盐水(含肝素 50 U/ml)
进行灌洗 , 收集灌洗液 ,测定总蛋白含量。结果见表 4 ～ 5。
表 4　对大鼠气囊炎模型中渗出液总蛋白含量的影响( x±s)
组别 剂量 C/mg· kg-1 总蛋白含量 C/g· L-1
空白 - 0.35±0.11
模型 - 2.98±0.50
氢化可的松 230 1.79±0.31＊＊
TFS低 25 2.67±0.34
TFS中 50 2.40±0.13＊＊
TFS高 75 2.22±0.17＊＊
　　与模型组相比 , ＊P<0.05, ＊＊P<0.01;n=8
由表 4 ～ 5结果可知 , 角叉菜胶致炎后 , TFS能显著降低炎
症介质渗出 ,其中 50, 75mg/kg剂量组均能降低大鼠气囊渗出液
中总蛋白含量 , 降低血浆中 NO, MDA含量 ,增强 SOD活性 ,与模
型组相比具有显著性差异 ,提示 TFS具有显著的抗炎作用。
表 5　对大鼠气囊炎模型中血浆SOD活性 , NO, MDA含量的影响( x±s)
组别 剂量C/mg· kg-1 CSOD/U· ml-1 CNO/μmol· L-1 CMDA/nmol· ml-1
空白 82.87±2.52 13.59±2.25 17.66±5.42
模型 - 49.36±5.25 25.32±4.34 37.08±3.08
氢化可的松 230 66.17±6.92＊＊ 15.13±2.48＊＊ 31.26±4.18＊＊TFS低 25 54.73±7.75 24.03±5.77 35.19±2.49TFS中 50 57.97±7.37 22.27±3.32 33.78±2.46＊TFS高 75 61.43±10.79＊ 20.19±2.21＊ 32.58±2.21＊
　　与模型组相比 , ＊P<0.05, ＊＊P<0.01;n=8
3　讨论
炎症是在致炎因素作用下 ,由炎症细胞及其释放的炎症介质
参与引起的一系列病理生理过程。在炎症反应中 ,致炎因素引起
毛细血管扩张 ,通透性增加 , 中性粒细胞趋化 、游走至炎症反应
灶 , 释放炎症介质参与炎症反应 [ 8 , 9] , 并发生呼吸暴发 , 产生
O
2
.-等活性氧自由基。这些氧自由基不仅能增加血管通透性 ,
而且攻击生物膜磷脂中的多聚不饱和脂肪酸 , 引起脂质过氧化 ,
造成生物膜损伤 ,尤其脂质过氧化产物 MDA毒性更强 , 能进一
步加重炎症反应 ,而体内自由基清除剂如 SOD可通过清除自由
基 , 抑制脂质过氧化反应。 PGE
2
作为一种炎症因子 ,存在于炎症
组织中 ,可与缓激肽 、白三烯等炎症介质起协同作用 ,引起血管扩
张 , 加强组胺和缓激肽升高血管通透性的作用。通过抑制 PGE
2
的合成 ,可以减轻炎症反应 [ 10, 11] 。 NO是一种重要的信使物质 ,
同时也是一种重要的炎症介质 ,在炎症反应的许多环节发挥复杂
的调节作用 ,其促炎症反应包括促进血管扩张 , 增强血管通透性 ,
激活前列腺素合成酶等 ,研究认为急慢性炎症的发生均与 NO有
关系 [ 12] 。本实验结果显示 , 石荠苧总黄酮可明显抑制二甲苯致
小鼠耳肿胀和角叉菜胶致小鼠足趾肿胀 , 降低炎症组织 PGE2含
量 , 降低冰醋酸致小鼠毛细血管通透性 , 减少角叉菜胶致大鼠气
囊炎模型中渗出液总蛋白质含量 ,降低血浆 NO, MDA含量 ,增强
血浆 SOD活性。提示石荠苧总黄酮具有显著的抗炎作用 , 其抗
炎作用可能与其降低血管通透性 , 抑制 PGE2 , NO等炎症介质生
成及增强清除氧自由基 、抗脂质过氧化能力有关。
参考文献:
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时珍国医国药 2008年第 19卷第 1期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2008VOL.19NO.1