全 文 ：( 2H, d, J= 9 Hz, H-2′, 6′) , 7. 23 ( 1H, d, J= 2
Hz, H-8) , 7. 14 ( 1H, dd, J= 9, 2 Hz, H-6) , 6. 82
( 2H, d, J= 9 Hz, H-3′, 5′) , 5. 09 ( 1H, d, J= 7
Hz, H-1glc ) . ( See Table 3)
　　 CompoundⅤ : White pow der. 1HNM Rδ( 300
MHz, DM SO-d6 ) : 1 2. 94 ( 1H , s , 5-OH ) , 9. 6 1
Table 3　 13CNMR spectral data of compounds Ⅵ ,
Ⅶ , Ⅷ , Ⅸ andⅩ ( in CDCl3 , 75 MHz)
C Ⅵ 　 Ⅶ 　 Ⅷ 　 Ⅸ * 　 Ⅹ 　
　　 1 　 39. 0 　 38. 7 　 38. 8 　 37. 3 　 37. 2
2 27. 2 27. 4 27. 2 30. 0 31. 4
3 78. 9 79. 0 79. 1 77. 0 71. 1
4 38. 7 38. 9 38. 9 34. 7 37. 9
5 54. 9 55. 3 55. 4 40. 1 40. 3
6 18. 4 18. 3 18. 3 30. 0 29. 8
7 35. 3 34. 3 34. 4 117. 9 117. 5
8 41. 3 40. 9 40. 7 139. 5 139. 6
9 46. 7 50. 5 50. 6 49. 6 49. 5
10 36. 6 37. 2 37. 2 34. 5 34. 0
11 23. 7 20. 9 20. 9 21. 7 21. 6
12 125. 6 25. 2 25. 6 39. 6 39. 5
13 141. 5 38. 1 38. 3 43. 5 43. 3
14 46. 0 42. 8 42. 5 55. 3 55. 1
15 72. 7 27. 5 30. 6 23. 3 23. 0
16 217. 4 35. 6 32. 3 28. 9 28. 5
17 54. 0 43. 0 56. 3 56. 0 55. 9
18 52. 9 48. 3 47. 0 12. 6 12. 1
19 47. 7 48. 0 49. 3 13. 1 13. 1
20 30. 8 151. 0 150. 7 41. 1 40. 8
21 35. 2 29. 9 29. 7 21. 3 21. 1
22 30. 5 40. 0 37. 2 138. 7 138. 2
23 28. 0 28. 0 28. 0 129. 6 129. 5
24 15. 6 15. 4 15. 4 51. 4 51. 3
25 16. 6 16. 1 16. 0 32. 2 31. 9
26 17. 6 16. 0 16. 1 21. 6 21. 4
27 21. 3 14. 6 14. 7 19. 2 19. 0
28 28. 0 18. 0 179. 4 25. 7 25. 4
29 32. 9 109. 3 109. 6 12. 2 12. 3
30 23. 3 19. 3 19. 4
　　* in C5D5N; glc: 102. 2, 75. 3, 78. 6, 71. 7, 78. 5, 62. 9
( 1H, s, 4′-OH) , 8. 42 ( 1H, s, H-2) , 7. 40 ( 2H,
d, J= 9 Hz, H-2′, 6′) , 6. 83 ( 2H, d, J= 9 Hz, H-
3′, 5′) , 6. 72 ( 1H, br. s, H-8) , 6. 48 ( 1H, br. s,
H-6) , 5. 06 ( 1H, d, J= 7 Hz, H-1″) .
Compound Ⅵ : White needles. mp 194℃～
195℃ . 1 HNM Rδ( 300 MHz, CDCl3 ): 5. 50 ( 1H,
br. s, H-12) , 4. 57 ( 1H, s, H-15) , 1. 22, 1. 17,
1. 02, 1. 02, 0. 975, 0. 863, 0. 850, 0. 819 ( each
3H, s, 8× CH3 ) .
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栝楼化学成分的研究及其α-菠菜甾醇的含量测定 (Ⅰ )
时岩鹏 ,姚庆强* ,刘拥军 ,韦兴光 ,王保国* * ,栾　杨
(山东省医学科学院药物研究所 ,山东 济南　 250062)
摘　要: 目的　研究栝楼 Trichosanthes k irilowii Maxim. 的化学成分并建立栝楼中α-菠菜甾醇的含量测定方法。方
法　采用反复硅胶柱层析分离纯化 ,通过理化常数测定和光谱分析鉴定其化学结构。 采用双波长薄层扫描法研究
·14· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 1期
收稿日期: 2001-04-20基金项目:山东省自然科学基金研究课题资助 ( No. Q99C08)作者简介:时岩鹏 ( 1973-) ,男 ,河北邢台人 ,助理研究员 , 1995年毕业于河北医科大学获学士学位 , 1998年毕业于山东省医学科学院获硕士学位 , 1998年至今在山东省医学科学院药物研究所工作 ,主要研究方向为心血管药物和抗肿瘤药物的研究与开发。 Tel:
2919970　　 E-mail: ypshi@ yeah. n et
* 课题负责人
* * 山东医科大学 99级本科实习生
栝楼中α-菠菜甾醇的含量测定方法。结果　从栝楼中分离得到 12个化合物 ,已鉴定其中 10个化合物:正三十四烷
酸 ( te tra triacontano ic acid,Ⅰ ) , 2-甲基 -3, 5-二羟基四氢吡喃 -4-酮 ( 5-oxyma lto l,Ⅱ ) ,α-菠菜甾醇-β -D-葡萄糖苷 (β -
D-glucopyr ano syl-α-spinaste rol,Ⅲ ) ,葡萄糖 ( g lucose,Ⅳ ) ,富马酸 ( fumaric acid,Ⅴ ) ,琥珀酸 ( succinic acid,Ⅵ ) ,尿
嘧啶 ( ur acil,Ⅶ ) ,正三十四烷 ( tet rat riacontane ,Ⅸ ) ,α-菠菜甾醇 (α-spina stero l,Ⅹ ) ,栝楼仁二醇 ( kar ounidio l,Ⅺ )。
化合物Ⅷ 和ⅩⅡ正在鉴定中。测定栝楼中α-菠菜甾醇的含量为 0. 017 1%。结论　化合物Ⅰ 、Ⅱ 、Ⅲ 、Ⅳ、Ⅶ 、Ⅸ 均首次
从该植物中分离得到。 而且该含量测定方法灵敏性高 ,稳定性和重现性较好 ,可作为栝楼生药的检测方法。
关键词: 栝楼 ;化学成分 ;含量测定
中图分类号: R284. 1　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2002) 01 0014 03
Studies on chemical constituents of Trichosanthes kir ilowii and
assay of itsα-spinasterol
SHI Yan-peng , YAO Qing-qiang , LIU Yong-jun, WEI Xing-guang , W ANG Bao-guo, LU AN Yang
( Institute o f Mate ria M edica , Shandong Academy o f Medical Science, Ji nan Shandong 250062, China)
Key words: Trichosanthes kirilowii Maxim. ; chemical constituents; assa y
　　瓜蒌为葫芦科栝楼属植物栝楼 Trichosanthes
k irilowii Maxim. 或双边栝楼 T . rosthorni i Harms
的干燥成熟果实。 其性甘味寒微苦 ,归肺胃大肠经 ,
具清热涤痰、宽胸散节、润肠滑肠之功效。 用于肺热
咳嗽、痰浊黄稠、胸痹心痛、结胸痞满等病 ,为治疗胸
痹之要药。现代药理研究表明其有降低血清胆固醇 ,
扩张微循环障碍的发生等心血管系统的药理作用。
栝楼果实化学成分的研究表明: 含有挥发油、脂肪
酸、甾醇、脂肪酸、氨基酸、蛋白质、色素等 ;种子部分
主要含有脂肪油、脂肪酸、甾醇、三萜皂苷、氨基酸、
蛋白质等化学成分。为了寻找治疗心血管疾病的有
效单体 ,为发展新药提供先导化合物 ,同时为中医临
床用药提供科学依据 ,我们对山东产栝楼的干燥成
熟果实进行系统化学成分的分离 ,从中分离得到化
合物 12个 ,鉴定了其中 10个化合物:正三十四烷酸
( tet ra triacontanoic acid,Ⅰ ) , 2-甲基 -3, 5-二羟基四
氢吡喃-4-酮 ( 5-oxymalto l,Ⅱ ) ,α-菠菜甾醇 -β-D-葡
萄糖苷 (β -D-glucopy rano sly-α-spinasterol,Ⅲ ) ,葡
萄糖 ( g lucose,Ⅳ ) ,富马酸 ( fumaric acid,Ⅴ ) ,琥珀
酸 ( succinic acid,Ⅵ ) ,尿嘧啶 ( uraci l acid,Ⅶ ) ,正三
十四烷 ( tet ra triacontane,Ⅸ ) ,α-菠菜甾醇 (α-spinas-
terol,Ⅹ ) ,栝楼仁二醇 ( karounidio l,Ⅺ )。化合物Ⅰ 、
Ⅱ 、Ⅴ、Ⅵ 、Ⅶ 、Ⅸ 均首次从该植物中分离得到。 化合
物Ⅷ和ⅩⅡ正在鉴定中。另外 ,我们通过测定栝楼中
α-菠菜甾醇的含量 ,建立了栝楼生药质量的检测方
法 ,为进一步研究含有该生药的复方制剂打下基础。
1　仪器和材料
熔点用 X PR-2型偏光显微熔点仪测定 (温度计
未校正 ) ;红外光谱用 Perkin-Elmer 783红外光谱仪
测定 , KBr压片 ;核磁共振光谱用 INOV A-500型核
磁共振仪测定 ;质谱用 DMS-DX300型质谱仪测定 ;
提取用中药 100 L多功能提取器 (武汉制药设备机
械公司 ) ;岛津 9301型双波长薄层扫描仪 ;薄层层析
及柱层析用硅胶均为青岛海洋化工厂产品 ;实验用
栝楼购自山东省药材公司并鉴定为 Trichosanthes
kirilowii Maxim.。
2　提取与分离
栝楼 15 kg用 95%乙醇回流提取 3次 ,减压回
收乙醇 ,得到浓浸膏约 8 500 mL。 加入适量水混悬
后分数次分别用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇进
行萃取 ,各萃取液浓缩后 ,分别得到石油醚部分约
1 200 mL、氯仿部分约 500 mL、乙酸乙酯部分约 50
mL,正丁醇部分约 300 mL。
氯仿部分经多次硅胶柱层析 ,石油醚-丙酮梯度
洗脱 ,薄层层析检识 ,得化合物Ⅰ 、Ⅱ、Ⅲ 。
正丁醇部分经多次硅胶柱层析 ,氯仿-甲醇梯度
洗脱 ,薄层层析检识 ,得化合物Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ 、Ⅶ 、Ⅷ 。
石油醚部分经多次硅胶柱层析 ,石油醚 -乙酸乙
酯梯度洗脱 ,薄层层析检识 ,得化合物Ⅸ 、Ⅹ 、Ⅺ。
3　鉴定
化合物Ⅰ :白色粉末 , mp 82℃～ 84℃ (石油醚
-丙酮 )。 IR和 EI-M S谱数据与文献 [1 ]报道的该化合
物的光谱数据一致 ,因此鉴定化合物Ⅰ 为正三十四
烷酸。
化合物Ⅱ :淡黄色针晶 , mp 136℃～ 137℃ (石
油醚 -丙酮 )。 IR, EI-M S1 HNM R谱数据与文献 [ 2]报
道的 5-oxymal tol数据一致 ,因此化合物Ⅱ为 2-甲
基-3, 5-二羟基-四氢吡喃-4-酮。
化合物Ⅲ :白色粉末 , mp 274℃～ 276℃ (石油
醚-丙酮 ) , Libermann-Burchard反应及 Molish反应
阳性。 IR, 1 HNM R及 13 CNMR谱数据与文献 [3 ]报道
的该化合物的光谱数据一致 ,因此鉴定化合物Ⅲ为
·15·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 1期
α-菠菜甾醇 -β -D-葡萄糖苷。
化合物Ⅳ : 白色结晶 , mp 180℃ (甲醇 ) ,从其
IR、 EI-M S、 1HNMR及 13 CNMR数据推定化合物Ⅳ
为葡萄糖 ,并且与文献 [4 ]报道的该化合物的光谱数
据一致 ,因此鉴定化合物Ⅳ为葡萄糖。
化合物Ⅴ : 白色针晶 , mp 183℃～ 184℃升华
(氯仿 -甲醇 )。 IR与 EIM S与文献 [5 ]报道的该化合
物的光谱数据一致 ,因此鉴定化合物Ⅴ为富马酸。
化合物Ⅵ : 白色针晶 , mp 185℃升华 (氯仿-甲
醇 )。 IR, EIM S数据与文献 [ 5]报道的该化合物的光
谱数据一致 ,因此鉴定化合物Ⅵ 为琥珀酸。
化合物Ⅶ : 黄色粉末 , mp 228℃～ 230℃ (氯仿
-甲醇 )。 IR、 EIM S、 1H, 13 CNMR数据与文献 [6 ]报道
的尿嘧啶的光谱数据一致 ,因此鉴定化合物Ⅶ 为尿
嘧啶。
化合物Ⅸ : 白色粉末 , mp 81℃～ 82℃ (石油醚
-乙酸乙酯 ) ,其 IR及 EIM S数据与文献 [1 ]报道的正
三十四烷数据一致 ,因此鉴定化合物Ⅷ 为正三十四
烷。
化合物Ⅹ : 白色针晶 , mp 172℃～ 173℃ (石油
醚 -乙酸乙酯 ) , Libermann-Burchart反应阳性。 其
IR, EI-M S,
1
HNMR及 13 CNMR谱数据与文献 [ 7]报
道的该化合物的光谱数据一致 ,因此鉴定化合物Ⅹ
为α-菠菜甾醇。
化合物Ⅺ: 白色针晶 , mp 213℃～ 215℃ (石油
醚 -乙酸乙酯 ) , Libermann-Burchart反应阳性。 其
IR, EI-M S,
1
H,
13
CNM R及 DEPT数据推定化合物
Ⅺ为栝楼仁二醇 ,并与文献 [8 ]报道的光谱数据基本
一致 ,因此鉴定化合物Ⅺ为栝楼仁二醇。
4　栝楼中α-菠菜甾醇的含量测定方法研究 [9, 10 ]
4. 1　扫描分析条件:点样后的硅胶 G板于石油醚 -
乙酸乙酯-甲酸 ( 8∶ 2∶ 1)中展开 , 5%硫酸乙醇溶液
显色 ,在 100℃烘烤 5 min,检测波长 400 nm,参比
波长 600 nm,锯齿扫描反射法 , SX= 3,狭缝 0. 4×
0. 4。
4. 2　标准曲线和样品测定
4. 2. 1　标准曲线的绘制:精密称取α-菠菜甾醇 ,以
三氯甲烷配成 1. 0 mg /mL的标准对照品溶液 ,分别
取 1, 2, 3, 4, 5μL点样于硅胶板 ,在石油醚 -乙酸乙
酯 -甲酸 ( 8∶ 2∶ 1)中展开 , 5%硫酸乙醇溶液显色 ,
110℃烘烤 5 min,锯齿扫描反射法测定 ,以峰面积
为纵坐标 ,点样量为横坐标 ,绘制标准曲线为 Y=
1 960. 2 X - 667. 88, r= 0. 996。以 S /N为 2计算 ,
检出限为 0. 04μg。
4. 2. 2　样品的预处理及含量测定:精密称取栝楼
5 g ,加入 50 mL甲醇 , 2 g氢氧化钠 ,回流提取 2 h,
加水 100 mL,过滤 ,挥去甲醇 ,用 50、 25、 25 mL乙
醚提取 3次 ,合并提取液 ,无水硫酸钠干燥。回收乙
醚 ,浓缩定容为 3 mL,作为待测定溶液。精吸待测溶
液 2、 3、 4、 5、 6μL分别点样 ,依上法测定结果见下表
1。
表 1　样品测定结束 ( g /g)
No. 含量 平均含量 R SD%
1 1. 84× 10- 4
2 1. 65× 10- 4
3 1. 66× 10- 4 1. 71× 10- 4 4. 43
4 1. 72× 10- 4
5 1. 70× 10- 4
4. 2. 3　稳定性实验:将显色后的薄层板室温下放置
1、 2、 3、 4、 5 h后扫描 ,结果 3 h内峰面积值无显著变
化。
4. 2. 4　精密度实验:在同一薄层板上点 5个 2μL
的标准品溶液点 ,按以上定量条件测定峰面积 ,
RSD为 3. 05% 。
4. 2. 5　加样回收试验: 取已知含量 ( 1. 71× 10- 4
g /g )样品 1 g ,加入 200μL 1. 0 mg /mL的标准品溶
液 ,按上法提取 ,最后定容为 1 mL,测得α-菠菜甾醇
浓度为 0. 358 mg /mL,得加样回收率为 93. 5%。
5　结果与讨论
5. 1　化合物Ⅰ 、Ⅱ、Ⅴ、Ⅵ 、Ⅶ 、Ⅸ 均为首次从该植物
中分离得到。
5. 2　首次用双波长薄层扫描法建立 α-菠菜甾醇的
含量测定方法 ,该方法灵敏性高 ,稳定性和重现性较
好 ,可作为栝楼生药的质量控制方法。
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