全 文 ：图 3　AB-8 树脂的解吸曲线
Fig. 3　Desorption curve of AB-8 resin
乙酯进行萃取。
　　溶液的 pH 值对醋酸乙酯萃取的影响的结果见
表 3。pH 为 2～3时,萃取效果较好, 萃取率高, 产品
纯度高。这是由于当 pH≤3时,菊苣酸由原来的菊
苣酸盐变为游离态, 从而改变了菊苣酸在水相和有
机相中的分配率,因此用醋酸乙酯能很好地把它从
水相中萃取出来。
表 3　pH值对醋酸乙酯萃取效果的影响
Table 3　Ef fect of pH value on extraction
with ethyl acetate as solvent
pH 萃取率/ % 萃取物中菊苣酸/ %
4. 2(原液) 7. 45 40. 32
2 93. 04 65. 71
3 96. 83 69. 28
　　当溶液的 pH 3时, 用等体积的醋酸乙酯分别
萃取 1～4 次, 菊苣酸的萃取率分别为 41. 40%、
63. 43%、80. 51%、96. 83%。即醋酸乙酯萃取 4次可
以基本萃取完全。
2 . 5　产品的检测: 经40%乙醇提取、AB-8树脂吸
附、50%乙醇洗脱、醋酸乙酯萃取最终得到产品为浅
黄色粉末,纯度达 69%以上。
3　结论
　　紫锥菊中菊苣酸提取纯化工艺为:取一定量
的紫锥菊根粉末,用 15倍的 40%乙醇溶液于 90 ℃
下加热回流提取3次,每次为2 h, 合并滤液, 浓缩至
原液体积的 1/ 10,回收乙醇,滤过, 得到的水溶液以
2 BV/ h的流速上柱床体积( BV )为 30 mL 的 AB-8
树脂柱, 吸附完成后, 用去离子水洗至流出液无色,
再用 50%乙醇溶液洗脱, 乙醇洗脱液浓缩蒸干, 可
得到菊苣酸粗品。粗品溶于水,用 6 mol/ L 盐酸调
pH 3, 醋酸乙酯萃取 4 次, 萃取液浓缩蒸干即得产
品。
　　利用乙醇水溶液提取、AB-8树脂吸附、醋酸乙
酯萃取的方法从紫锥菊根中提取纯化菊苣酸是可行
的。该工艺操作简单, 方便,成本低, 适合工业化生
产, 生产的菊苣酸可作为医药原料或添加到保健食
品中。
References:
[1]　Xiao P G. Intern at ional popu lar immunomodulator —
E chinacea p urp urea and it s preparat ions [ J] . Chin Tr adi t
H e rb Drug s (中草药) , 1996, 27( 1) : 46-48.
[2]　Liu Y B. Chemical and immune funct ions and clinic of
preparat ions of E chinacea p urp urea [ J ] . W orld Phytomed (国
外医药·植物药分册) , 2001, 16( 2) : 47.
[3]　Zhang Y, Liu K, Wu L J . Advance in studies on Ech inacea
M oench [ J] . Ch in T rad it H er b Dr ugs (中草药) , 2001, 32
( 9) : 852-855.
[4]　S oicke H, Al-Hass an G, Gorler K. Weitere Kaf fees au re Der-
ivate aus E chinacea p urp urea [ J] . P lanta Med , 1988, 54:
175.
[5]　Robins on W E J. L-ch icoric acid, a dicaf feoyltaric acid
in hibitor of HIV integrase, improves on th e in v it ro ant i-HIV
ef fect of zidovudine and a proteas e in hibitor ( AG1350 ) [ J] .
A nt iv it ral R es, 1998, 39: 101-111.
[6]　Wang H , Liu W Z, Ai T M, et al . Determ inat ion of cich or ic
acid in E chinac ea p ururea [ J] . China J Chin Mate r Med (中国
中药杂志) , 2002, 27( 6) : 418-420.
[7]　Lu o X B, Ch en B, Zhu X L, et al . Determin at ion of cich or ic
acid in E chinacea p ur urea and it s prep arat ion by HPLC [ J] .
Chin T rad it H er b Drug s (中草药) , 2002, 33( 10) : 890-891.
[8]　Nu sslein B, Kurzm ann M , Bauer R, et al . E nzymat ic
degradat ion of cich or ic acid in E chinacea p urp urea
preparat ions [ J ] . J N at P rod, 2000, 63: 1615-1618.
超临界CO2流体萃取椒目仁油的工艺研究
王捷频1 ,王四旺1,蒋永培2,党碧艳1X
( 1. 第四军医大学药物研究所, 陕西 西安　710032; 2. 第四军医大学西京医院 药剂科, 陕西 西安　710032)
　 　 椒 目 为 芸 香 科 植 物 青 椒 Zanthoxy lum
schinif ol ium Sieb. et Zucc. 或花椒 Z. bungeanum
Max im . 的干燥成熟种子。秋季果实成熟时采收, 晒
干,除去果皮、果柄及杂质。椒目是一种内外含油的
·997·中草药　Chinese T raditional and Herbal D rug s　第 35 卷第 9 期 2004年 9月
X 收稿日期: 2003-11-31作者简介:王捷频( 1978—) ,女,江苏扬州人,药剂学硕士。T el : ( 029) 83373265
油脂加工资源, 其表皮层含油 13%左右, 酸价高,品
质差,易析层,可作为工业性用油。内仁含油 15%左
右,不饱和脂肪酸约占总量的 90% (以 A-亚麻酸为
主)。A-亚麻酸是人体必需脂肪酸, 具有调血脂、抗
癌、提高机体免疫力等多种作用[ 1]。另外,椒目仁油
中含有丰富的 Ca、Mg、Fe、Zn、Sr、Mn 等人体必须
的矿物质元素[ 2] ,因此椒目仁油可成为稀有的功能
性食用油及新型的中药原料。超临界流体萃取具有
无毒、无污染、快速廉价、操作简便等优点, 并可通过
对提取温度和压力的调节来改变其溶解性能,达到
将不同成分分离的效果[ 2]。本实验就椒目仁油的超
临界CO 2流体萃取工艺进行了研究。
1　材料与仪器
椒目购自陕西盛华药业有限公司,为陕西韩城
产大红袍花椒晒干,除去果皮、果柄及杂质; CO 2 (西
安兴华 BOC 气体有限公司)。
　　FY221-50-06型超临界萃取装置(南通市飞宇
石油科技开发有限公司) , CSF—1A 超声波发生器
(上 海超声波仪 器厂 ) , 气相 色谱仪 ( Agilent
4899D)。
　　A-亚麻酸 ( 250 mg/ mL, Cayman Chemical,
No. 90210) ; 十七酸( E. Merck. Darmstadt , M ol. -
Gew . 270, 46) ,甲醇、浓硫酸、正己烷等试剂均为分
析纯。
2　方法与结果
2. 1　因素水平的确立:根据多种技术条件及试验比
较的结果,选择提取温度( A)、提取压力( B)和药材
粒度( C) 3个因素,见表 1。
表 1　因素水平表
Table 1　Factors and levels
水　平 因　　素
A/℃ B/ MPa C
1 35 30 1
2 40 35 2
3 45 40 3
　　药材粒度: 1为基本通过 1号筛; 2为完全通过; 3为部分可通过
2号筛
　　Granularity of drugs : 1 m eans to almost pas s th rough No. 1
medicinal sieve; 2 means to pass totally No. 1 medicinal sieve; and 3
means to pas s par tly throu gh No. 2 medicinal sieve
2. 2　GC法测定 A-亚麻酸
2. 2. 1　色谱条件: 色谱柱: HP-5 石英毛细管柱
( Cr osslinked 5% PH ME Silox ane, 15 m×0. 53
mm×1. 5 Lm) ; 载气: 高纯氮, 体积流量: 20 mL/
min; 燃气: 氢气,体积流量 25 mL/ min; 空气, 体积
流量 300 mL/ m in; 检测器: 氢焰离子化检测器
( FID) , 温度 240 ℃;进样口温度: 240 ℃; 柱温: 185
℃;进样量: 3 LL。
2. 2. 2　对照品溶液的配制: 精密量取 A-亚麻酸
0. 04 mL,以十七酸作为内标, 称取约 7 mg 加 4 mL
甲醇溶解后, 加 1 mL 硫酸-甲醇( 1∶5)溶液, 通入
氮气保护下, 80 ℃水浴回流 30 min,取出,用流水使
冷却后,加 4 mL 蒸馏水, 再加正己烷萃取 3次, 每
次 3 mL。合并上层液,置 10 mL 量瓶中, 加正己烷
至刻度,即得。
2. 2. 3　供试品溶液的制备:取椒目仁油一滴(约 15
mg) ,精密称定,加 2 mL 甲醇超声使分散,加入十七
酸约 7 mg、1 mL 甲醇、1. 5 mL 硫酸-甲醇( 1∶5)溶
液, 摇匀, 同 2. 2. 2项下方法配制, 酯化后加 3 mL
正己烷萃取 1次, 收集上层液, 置 3 mL 量瓶中, 加
正己烷至刻度, 即得。
2. 2. 4　测定法 [ 4] :分别精密吸取对照品溶液与供试
品溶液各 3 LL,注入气相色谱仪,测定,按内标法计
算峰面积,并计算 A-亚麻酸的含量。
2. 3　工艺的优选
2. 3. 1　综合评分的计算: 按主次指标, 规定 A-亚麻
酸含量满分为 70分,试验值 71. 60%为 70分;出油
量满分为 30 分, 根据试验结果规定 80 mL 为 30
分, 35 mL 为 0分。计算公式分别为:
　　A-亚麻酸含量评分= X
71. 6
×70　出油量评分= Y
80
×30
X 为每份样品中 A-亚麻酸含量; Y 为每份样品中的出油量
2. 3. 2　正交试验的结果:结果见表 2, 方差分析见
表 3。3个因素影响的主次顺序为 C> A> B, A 3B3C1
为最佳工艺条件。由于 A 因素的改变对试验结果影
响不显著,且温度高于CO 2临界点( 31. 1℃)即可满
足需要,故在实际提取时选用的条件为 A 1B3C1 , 即
萃取釜: 40 M Pa / 35 ℃; 分离Ⅰ: 8 M Pa / 35℃; 分
离Ⅱ: 6 MPa / 35 ℃,药材粒度为用打粉机粉碎, 基
本可通过一号筛,萃取时间为 70 min。
2. 4　验正试验: 按上述条件进行 3批中试放大试
验, 每批投料总药材量 56. 93 kg, 出油量分别为
10. 27、10. 30、10. 36 kg , A-亚麻酸体积分数分别为
70. 88%、69. 98%、70. 83%。表明本工艺重现性好,
简便、易行。
3　讨论
3. 1　可作为超临界流体的物质很多,如二氧化碳、
一氧化碳、水、乙烷、庚烷、氨、六氟化硫等,以二氧化
碳最为常用,因为它有以下特点: 临界点较低( t=
31. 1 ℃, Pc= 7. 4 M Pa ) , 容易达到;化学性质不活
泼, 且无色,无味, 无毒, 安全性好; 价格便宜, 纯度
·998· 中草药　Chinese T raditional and Herbal D rug s　第 35 卷第 9 期 2004年 9月
　　　　　　表 2　L9 ( 34)正交试验结果
Table 2　Results of L9( 34) orthogonal test
实验
号 A B C D(空白)
出油量
/ (m L)
A-亚麻
酸/ %
综合
评分
1 1 1 1 1 64 66. 29 　3. 81
2 1 2 2 2 50 66. 07 - 1. 66
3 1 3 3 3 40 63. 18 - 8. 23
4 2 1 2 3 56 67. 08 　1. 58
5 2 2 3 1 45 64. 25 - 5. 31
6 2 3 1 2 60 71. 60 　7. 50
7 3 1 3 2 40 63. 35 - 8. 07
8 3 2 1 3 75 69. 92 11. 49
9 3 3 2 1 60 69. 20 　5. 15
K 1 - 6. 08 - 2. 68 22. 80 　3. 65
K 2 　3. 77 4. 52 　 5. 07 - 2. 23
K 3 　8. 57 4. 42 - 21. 61 　4. 84
R 14. 65 7. 20 　44. 41 　7. 07
表 3　方差分析表
Table 3　Variance analysis
方差来源 离差平方和 自由度 均方 F值 显著性
A 38 2 19 4. 75
B 12 2 　6 1. 5
C 334 2 167 41. 75 P< 0. 05
D(误差) 　8 2 　4
总和 392 8
　　F0. 05( 2, 2) = 19　F0. 01( 2, 2) = 99
高,容易获得。
3. 2　采用超临界萃取技术进行中药的研究开发及
产业化具有许多独特的优点:对提取温度和(或)压
力的改变可改变溶解度, 可选择性的进行中药中多
种物质的分离, 从而可减少杂质,使有效成分高度富
集, 便于减小剂量和质量控制,产品外观大为改善;
操作温度低,可较好地保存有效成分不被破坏,不发
生次生化。因此,特别适合于对热敏感性强、容易氧
化分解破坏的成分的提取; 提取时间快、生产周期
短, 一般 2～4 h 便可完全提取;流程简单, 操作方
便,污染小等。
References:
[1]　Wang Y Q, Lai B S, Yan X L , e t al . Quant itat ive
determ inat ion of A-linolenic acid f rom P eri lla F rutesc ens s eeds
oil [ J ] . Ch in J Biochem P harm (中国生化药物杂志) , 1998,
19( 2) : 91-92.
[2]　Zhuang S H, Li M L. The ingr edients analysis of the seeds oil
of Zanthoxy lum bung eanum Maxim. [ J] . A cta A gri c Boreali-
occid ental is S in (西北农业学报) , 2002, 11( 2) : 43-45.
[3]　Zhen Q, Zh an g H. Th e technology of supercrit ical-CO 2 fluid
ext ract ion of herb al medicin e an d it s is sues of indus tr ial izat ion
[ J ] . L ishiz hen Med Mater Med Res (时珍国医国药) , 2000,
11( 12) : 1137-1138.
[4]　Wang J D, Li X Y, Xu Z C, et al. Determinat ion of A-lin olen ic
acid in th e Zanthoxylum bungeanum M axim . seeds oil by GC
[ J ] . China N ew Med (中国新医药) , 2003, 2( 10) : 17-18.
RP-HPLC法测定大鼠血浆中苦参碱的含量
何盛江1, 2 ,宋　力2,栾立标2X
( 1. 南京海陵中药制药工艺技术研究有限公司,江苏 南京　210049; 2. 中国药科大学 药剂学教研室,江苏 南京　210009)
　　苦参碱类生物碱以苦参碱为代表,来源于豆科
植物苦 参 S op hora f lavescens Ait .、苦豆子 S.
alop ecuroides L. 及广豆根 S . subp r ostrata Chun et
T . Chen中 [ 1]。苦参碱有多方面的药理作用和功效,
如抗菌、抗炎、抗肿瘤、抗过敏、抗心律失常、消肿利
尿、免疫及生物反应调节作用等 [ 2]。本实验建立了
RP-HPLC 法测定大鼠血浆中苦参碱含量的方法,
为进行苦参碱的药动学研究提供了一个灵敏、可靠
的检测手段。
1　仪器与试药
岛津 LC—10AT 高效液相色谱仪, SPD—10A
紫外检测器(日本岛津公司) ; N—2000 双通道色谱
工作站(浙江大学智能信息工程研究所) ; BS110S 型
电子天平(北京赛多利斯天平公司) ; KQ—250DE
型超声处理仪(昆山市超声仪器有限公司)。
苦参碱对照品(宁夏盐池制药厂提供, 批号:
020711,纯度为 98. 9%) , 乙腈(江苏双邦科技有限公
司,色谱纯) ,其他试剂均为分析纯,水为重蒸水。苦参
碱氯化钠注射液( 5 mL∶50 mg)由本实验室自制。
　　SD大鼠, 200～250 g, 由中国药科大学实验动
物中心提供。
2　方法与结果
2. 1　色谱条件: 色谱柱: ODS C18柱( 250 mm×4. 6
mm, 5 Lm,大连依立特公司, 5 cm 预柱) ;流动相: 乙
腈-水( 10∶90,磷酸盐缓冲液调 pH 至 2. 7) ; 体积流
量: 0. 7 mL/ min;检测波长: 220 nm;柱温: 25 ℃; 灵
·999·中草药　Chinese T raditional and Herbal D rug s　第 35 卷第 9 期 2004年 9月
X 收稿日期: 2003-12-13作者简介:何盛江( 1975—) ,男,硕士研究生。T el : ( 025) 83505999-2888　E-mai l: h erbs j@ elong. com