全 文 ：异无显著性, 且两两交互作用影响差异也不显著。
21214　配伍规律: 麻黄汤各组方配伍, 对佐药苦杏
仁的主要效应成分苦杏仁苷的影响具有一定的规律
性。从表 2 可以看出: 当麻黄与苦杏仁配伍时, 麻黄
可增加汤剂中苦杏仁苷的含量, 但影响不显著, 相应
苦杏仁亦增加麻黄碱的含量[1 ] , 提示麻黄与苦杏仁
的配伍可增强药效, 佐药苦杏仁与君药麻黄配伍是
合理的, 与中医组方理论的相须、相使配伍一致; 当
甘草与苦杏仁配伍时, 甘草可降低汤剂中苦杏仁苷
的含量, 但影响差异不显著, 提示甘草可通过降低苦
杏仁苷的含量而降低苦杏仁的毒性, 从而起到调和
药性, 降低毒性的作用; 而桂枝与苦杏仁配伍, 对苦
杏仁苷几乎没有影响。统计分析结果表明: 麻黄、桂
枝、甘草对麻黄汤中苦杏仁苷含量影响差异没有显
著性, 且两两交互作用不显著。
21215　关于新物质: 在本实验条件下, 各组合配伍
没有发现新物质色谱峰。
3　讨论
311　测定方法选择:《中华人民共和国药典》2000
年版一部采用滴定方法间接测定苦杏仁中苦杏仁苷
含量, 操作烦琐, 灵敏度低。针对中药复方汤剂中成
分复杂的情况, 本实验采用反相高效液相色谱法有
效地分离了复方中的各成分, 复方中其他成分对苦
杏仁苷测定无干扰, 该法简便、准确、灵敏, 可作为苦
杏仁药材及其制剂的质量监控方法。
312　流动相选择: 曾以不同比例的甲醇2水、乙腈2
水、甲醇2乙腈2水作为流动相, 结果发现流动相中加
入乙腈峰形变差, 而甲醇2水体系中苦杏仁苷的峰形
好, 故选择甲醇2水为流动相。
313　柱温选择: 曾将柱温设置为 25 ℃, 30 ℃, 35
℃, 发现柱温在 25 ℃时, 缺苦杏仁阴性对照溶液干
扰严重, 提高柱温, 可改变苦杏仁苷和干扰成分的选
择性, 当柱温为 35 ℃, 苦杏仁苷和干扰成分可达到
基线分离, 复方中其他成分对苦杏仁苷测定无干扰。
314　药材与取样: 针对中药材粗细大小不一、组份
在药材中含量不均的情况, 本实验除了对药材进行
剪切、捣碎等必要的处理, 鉴于单付处方剂量小, 引
入误差大, 还采用了每次煎煮 3 付药, 增加了取样
量, 降低了药材不匀的误差, 使取样更具代表性, 水
煎液制备的平行性更高, 使测定结果更准确地反映
出配伍因素引起的化学变化。
References:
[ 1 ]　L i J L , Chen F L , L iu C M , et a l. D eterm ination of ephedrine
and p seudoepherdrine in M A HUAN G TAN G by GC2M S and
effect of compatib le m edicinal herbs on concen tration of com 2
ponen ts in decoction [J ]1 Ch in T rad it H erb D rug s (中草药) ,
2002, 33 (4) : 30723091
阿克苏黄芪中多糖成分的分析
赵　文1, 黄亚东1, 任永凤2, 许　华1, 郑　青1Ξ
(11 暨南大学 医药生物技术研究开发中心, 广东 广州　510632;
21 新疆维吾尔自治区药物研究所, 新疆 乌鲁木齐　830002)
摘　要: 目的　分析阿克苏黄芪中多糖的组份及含量。方法　利用纸色谱分析了多糖组份并采用分光光度法测定
了多糖含量。结果　阿克苏黄芪多糖的组成为葡萄糖, 生药中多糖含量为 2110%。结论　阿克苏黄芪中所含多糖为
葡聚糖。同时测得其相对分子质量为 517×104。
关键词: 阿克苏黄芪; 多糖; 分光光度法
中图分类号: R 28411; R 286102　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670 (2004) 03 0271 03
Ana lysis of polysacchar ide in A straga lus aksuens is
ZHAO W en1, HUAN G Ya2dong1, R EN Yong2feng2, XU H ua1, ZH EN G Q ing1
(1. B iopharm aceu tical R esearch and D evelopm ent Cen ter of J inan U niversity, Guangzhou 510632, Ch ina;
2. X in jiang Inst itu te of M ateria M edica, U rum qi 830002, Ch ina)
Key words: A strag a lus aksuensis Bunge; po lysaccharide; spectropho tography
·172·中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 3 期 2004 年 3 月
收稿日期: 2003206220
基金项目: 国家自然科学基金资助项目 (39660082)
作者简介: 赵　文 (1962—) , 女, 副研究员, 主要从事植物化学、天然药物和药物化妆品的研究。
　　阿克苏黄芪A strag a lus aksuensis Bunge 为豆
科紫云英属植物, 产于我国新疆境内的阿克苏地区,
取其根入药[1 ] , 具有补气固表、托疮生肌等功能。以
往的研究发现它具有一定的抗病毒及增强免疫力作
用[2, 3 ]。本实验研究了其中多糖成分, 测定了阿克苏
黄芪中多糖的含量、相对分子质量, 为阿克苏黄芪的
药用提供一定的科学依据。
1　仪器与材料
UV —200 紫外分光光度计, UV —1 型三用紫
外分析仪,UV 2501 (PC)。
DN S 溶液 (称取 666 m g 重结晶的 3, 52二硝基
水杨酸溶解于 200 mL 1 mo löL 氢氧化钾溶液) , 所
用试剂均为分析纯。葡萄糖、鼠李糖、岩藻糖、半乳
糖、甘露糖、木糖、阿拉伯糖对照品由华中科技大学
药物研究所提供。阿克苏黄芪采自新疆阿克苏, 经新
疆药物研究所张彦福研究员鉴定系阿克苏黄芪A 1
aksuensis Bunge。 蒙 古 黄 芪 A 1 m em branaceus
(F isch. ) Bge. var. m ong olicus (Bge. ) H siao 由大
同市药品检验所中药室提供。
2　多糖的提取分离及纯化
　　取粉碎后的阿克苏黄芪粗粉 10 g, 依次用石油
醚、乙醚脱脂, 晾干, 加水浸泡过夜, 100 ℃水浴, 提
取 3 次 (3×100 mL ) , 合并滤液, 浓缩至药材与药液
质量体积比为 1∶2, 离心, 上清液加 5 倍体积乙醇,
冰箱内静置 24 h, 离心, 沉淀用少量水溶解, 用 Se2
vag 试剂去除游离蛋白, 溶液加 5 倍体积乙醇, 静置
过夜, 滤过, 沉淀用少量水溶解, 经 Sephadex G2200
凝胶柱色谱分离, 检测为单一峰, 收集样品, 真空干
燥, 得一黄白色多糖。
3　多糖鉴定
311　相对分子质量的测定: 称取 01100 3 g 多糖放
入试管, 加DN S 溶液 15 mL , 在 65 ℃恒温水浴中保
温 1 h, 并不断搅拌使溶解。冷却至室温后, 将反应
液定量移入 50 mL 量瓶, 用蒸馏水加至刻度, 同时
以DN S 液为空白, 以乳糖为参比物, 于 490 nm 处
测定吸光度[2 ] , 由公式相对分子质量= 多糖质量ö单
位吸光度对应质量计算得其相对分子质量约为
517×104。
312　组成分析: 称取 10 m g 多糖, 溶于 2 mL 110
mo löL 硫酸溶液, 封管, 100 ℃水解 6 h, 切开封管,
用碳酸钡中和, 滤过, 滤液浓缩后供点样用。所得供
试品溶液与葡萄糖、鼠李糖、岩藻糖、半乳糖、甘露
糖、木糖、阿拉伯糖对照品溶液同时进行纸色谱分
离, 展开剂分别为正丁醇2醋酸2水 (4∶1∶5) 和异丙
醇2浓氨水2水 (6∶415∶015) , 以苯胺2邻苯二甲酸
为显色剂。由纸色谱图可看出样品为单一的葡萄糖。
4　多糖含量测定
411　苯酚溶液的制备: 取苯酚 100 g, 加铝片 011 g
和碳酸氢钠 0105 g, 蒸馏, 收集 182 ℃馏份。称取此
馏份 5 g, 加 95 mL 蒸馏水, 置棕色瓶中, 得 5% 苯酚
试液。
412　测定波长的选择: 精密称取一定量多糖样品置
小烧杯中, 加水溶解, 定量转移至 100 mL 量瓶中,
加水至刻度, 混匀。吸取该样品 2 mL 于具塞试管
中, 加 5% 苯酚试液 1 mL , 摇匀, 迅速加 5 mL 浓
H 2SO 4, 振摇后, 置沸水浴加热 15 m in, 取出置冷水
中冷却, 以苯酚2硫酸溶液为空白, 于UV 2501 (PC)
上 400～ 800 nm 扫描, 结果选择测定波长 488 nm。
413　标准曲线的绘制: 精密称定 105 ℃干燥至恒重
的葡萄糖 25 m g 于小烧杯中, 加水溶解并定量移至
100 mL 量瓶中, 稀释至刻度, 混匀, 得 0125 m gömL
的对照品溶液。分别精密吸取该溶液 110, 210, 310,
410, 510, 610 mL 于 50 mL 量瓶中, 加蒸馏水至刻
度, 得到一系列浓度的对照品溶液。分别吸取上述对
照品溶液各 2 mL 于具塞试管中, 加 5% 苯酚试液 1
mL , 摇匀, 迅速加浓硫酸 5 mL , 振摇后, 放置于沸水
浴中加热 15 m in, 取出置冷水中冷却。以苯酚2硫酸
溶液为空白, 于 488 nm 处测吸光度, 经回归得线性
方程A = 01006 344 2C - 01001 302 3, r= 01998 8,
线性范围 1125～ 715 ΛgömL。
414　换算因素的测定[4 ]: 精密称取多糖 5 m g 于 10
mL 量瓶中, 加水溶解并稀释至刻度, 精密吸取该溶
液 2 mL 置 50 mL 量瓶中, 按标准曲线项下自“吸取
溶液 2 mL 于具塞试管中”起测定吸光度, 按下式计
算换算因素, 测得换算因素 f = 11089。
　　f = m öC
　　m 为多糖质量 (Λg) , C 为多糖溶液中葡萄糖的量 (Λg)
415　样品中多糖的含量测定: 精密量取 20 mL 样
品定量转移至 100 mL 量瓶中, 加水稀释至刻度, 混
匀, 得供试品溶液。吸取该溶液 210 mL 于 100 mL
量瓶中, 加水至刻度, 吸取该溶液 2 mL 于具塞试管
中, 按标准曲线项下方法操作, 以苯酚2硫酸溶液为
空白, 在 490 nm 处进行测定, 按下式计算多糖含
量, 结果见表 1。同法测定了蒙古黄芪中多糖, 含量
为 4101% (n= 3)。
　　多糖含量= f C ödm ×100%
　　f 为换算因素, C 为供试品溶液中葡萄糖含量, m 为供
试品质量, d 为稀释倍数
·272· 中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 3 期 2004 年 3 月
　　表 1　阿克苏黄芪中黄芪多糖含量测定结果 (n= 3)
Table 1　Con ten t of polysacchar ide in A. aksuens is (n= 3)
样　品 多糖含量ö%
1 2. 29
2 2. 27
3 2. 31
4 2. 26
5 2. 27
5　讨论
511　本实验采用端基法来测定样品中所含可测端
基数, 由质量计算出样品的相对分子质量。
512　本实验中所提取的阿克苏黄芪多糖, 经检定为
葡聚糖, 含量仅 2128% (n= 3) , 显著低于蒙古黄芪 中多糖含量。References:[ 1 ]　X in jiang Institu te of B io logy So il and D esert, Ch inese A cade2m y of Sciences. X inj iang F lora of M ed icam en t and P lan t (新疆药用植物志) [M ]1 3rd ed. U rum qi: X in jiang Peop le’sP ress, 19841[ 2 ]　Zhang W J. R esearch T echn ique of Comp ound P oly saccharid e(复合多糖生化研究技术) [M ]1 Shanghai: Shanghai Scien tificand T echn ical Pub lishers, 19871[ 3 ]　Yang F Z, X ie H M. D eterm ination of po lysaccharide inch rist ina loo sestrife herb by spectropho tography [J ]1 Ch inT rad it H erb D rug s (中草药) , 1996, 27 (Supp l) : 972981[ 4 ]　Cheng Y X, Zhang Z S. P rob lem and so lu tion of determ inationof po lysaccharide in A strag a lus [J ]1 R es T rad it Ch in M ed (中医药研究) , 1993 (5) : 562581
茯苓萜类的高效液相色谱指纹图谱研究
杨　冉1, 李建军1, 屈凌波1, 相秉仁2, 安登魁2Ξ
(11 郑州大学 化学系, 河南 郑州　450052; 21 中国药科大学 分析中心, 江苏 南京　210009)
摘　要: 目的　建立茯苓三萜化合物的指纹图谱。方法　反相高效液相色谱法。结果　道地药材茯苓及不同地区收
集的市场商品具有相当稳定的、相似程度很高的指纹图谱。结论　可利用液相色谱的特征峰控制茯苓及其制剂的
质量。
关键词: 茯苓; 高效液相色谱; 指纹图谱
中图分类号: R 28411　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670 (2004) 03 0273 03
Stud ies on f ingerpr in t of terpeno id in P or ia cocos by HPLC
YAN G R an1, L I J ian2jun1, QU L ing2bo 1, X IAN G B ing2ren2, AN D eng2ku i2
(1. D epartm ent of Chem istry, Zhengzhou U niversity, Zhengzhou 450052, Ch ina; 2. Cen ter of A nalysis,
Ch ina Pharm aceu tical U niversity, N an jing 210009, Ch ina)
Key words: P oria cocos (Schw. ) W o lf; H PL C; fingerp rin t ing
　　茯苓为多孔菌科植物茯苓 P oria cocos (Schw. )
W o lf 的干燥菌核, 具有渗湿利尿、和胃健脾、宁心安
神、增强机体抗病能力的功效。其主要化学成分为多
糖、三萜、脂肪酸、甾醇、酶等。中外学者对茯苓的化
学成分及生物活性进行研究, 发现其所含的大量三
萜类物质具有免疫调节、抗肿瘤、拮抗醛固酮, 诱导
分化白血病细胞系HL 260 等很好的药理活性[1～ 4 ]。
建立茯苓三萜类的分析测定体系对于茯苓药材内在
质量的控制具有重要意义, 但鉴定单一的化学成分
不能代表其特有的功效, 也不能全面地反映其内在
质量。研究表明, 其甲醇提取物具有很好的药理活
性。本实验着重对不同产地茯苓的甲醇提取物进行
了液相色谱指纹图谱的比较研究, 以探求其呈现的
特征峰群, 为茯苓中药材的鉴定和质量控制提供科
学依据。
1　材料与仪器
茯苓药材为安徽、湖北、河南、四川、浙江等市场
商品, 共 9 个样品, 经鉴定均为多孔菌科真菌茯苓
P. cocos (Schw. ) W o lf 的干燥菌核。
W ater 1100 型液相色谱仪, DAD 检测器, 数据
处理工作站。
2　方法
211　色谱条件: 色谱柱: T SKgel OD S—80 C18 (150
mm ×4 mm , 415 Λm ) ; 流动相: 甲醇水溶液进行梯
·372·中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 3 期 2004 年 3 月
Ξ 收稿日期: 2003206210
作者简介: 杨　冉 (1976—) , 女, 河南西峡县人, 郑州大学化学系研究生, 主要进行中药质量控制和分析研究。