全 文 ：中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第10期2005年lO月·1499·
裹1不同体积分虹乙醇对总慧鼍提取率影响
Table1 EfleetIndifferentalcoholc ncentration
onextractingrateofanthraqulnone
提取溶剂 总蒽醌提取率／蹦 提取藩剂 总蒽醌提取率／％
去离子水0．91 60％乙醇 1．79
20％乙醇0．67 70％乙醇 2．95
40％乙醇 1．45 95％乙醇 2．I5
质量浓度为0．2％的不同表面活性荆，测定总蒽醌
提取率，见表2。结果表明SDS对大黄总蒽醌提取率
影响最大。
2．5不同质量分数SDS对提取率的影响：以40％
乙醇为提取溶剂，分别加入不同质量分数的SDS，
测定提取率，见表3。提取率的增加幅度是以70％乙
醇提取率为相对标准(100％)，考察加入不同质量分
数的SDS后相对提取率的增加值，结果表明0．8％
SDS提取率增加幅度最大。
衰2衰面盾性剂对提取率的影响
Table2 Effectofsurfacectiveagentonextractingrate
表面活性剂 总蒽酮提取率／％
聚山梨酯85
聚山梨醣80
十二烷基硫酸钠(SDS)
十二烷基磺酸钠
司盘40
1 28
I．31
1．63
1．56
衰3加入不I可质量分数SDS对提取率的影响
Table3 EffectofSDSconcentrationonextractingrate
2．6 SDS对游离与结合蒽醌提取率的影响：以
40％乙醇为提取溶剂，精密量取0．5mL续滤液，乙
醚萃取至无色，合并乙醚萃取液，浓缩液置5ml。量
瓶中，挥去乙醚，0．5％醋酸镁甲醇显色，测定游离葸
醌提取率。精密量取o．5ml，于具塞试管中，测定总
蒽醌的提取率。以总蒽醌提取率减去游离蒽醌提取
率即为结合蒽醌提取率。见表4。
衰4 sDS对游膏和结台慧曩提取率的影响
TabLe4 EffectofSDSonextractingrateotfree
andconjugatedanthraqulaone
3讨论
表面括性荆在溶液中形成临界胶束，对难溶性
药物产生增溶作用，因此可以提高大黄中总蒽醌的
提取率。不同的表面活性剂对不同分子结构的难溶
物质增溶作用不同。大黄中的游离蒽醌极性弱，不溶
于水，易溶于氯仿、乙醇、乙醚等有机溶剂，结合蒽醌
极性强，易溶于水。实验结果表明：SDS对游离与结
合蒽醌均有增溶作用。
SDS可以增加大黄中总蒽醌提取率，降低提取
溶剂乙醇的体积分数，降低提取成本，因此本方法有
较高的实用价值。
ReferencesI
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一步提取山楂中总黄酮和熊果酸的工艺研究
杨万运，殷殿书，蒋建兰‘，元英进
(天津大学化工学院制药工程系，天津300072)
山楂为药食两用中药，广泛用于治疗消化不良、 高血脂、冠心病等症。主要含黄酮类和三萜类等有效
收藕日期：2004—12—30
作者简介2鬟磊茬并舅：11意f冀要：：§嚣震；：，慧：噤毫2”。年毕业于天津大学生物化工专业·研究方向为萄钧制剂’药物分析、中药
*通讯作者蒋建兰Tel{(022)27400388E—mailIjian90202@126．corn
万方数据
·1500· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第10期2005年lO月
成分，熊果酸是山楂三萜类物质的主要成分。所含黄
酮类有降低高血脂模型大鼠血脂的作用o]。熊果酸
能明显降低高血脂小鼠胆固醇、调节血脂的作用”]。
目前工业提取过程仅提取总黄酮而不考虑熊果酸，
造成资源浪费，文献也只考虑总黄酮或熊果酸的提
取，而没有把两种有效成分综合考察o“]。本实验采
用不同体积分数的乙醇超声提取，以干粉得率、总黄
酮和熊果酸提取率为考察指标，确立一步提取，同时
提高山楂提取物中降脂成分总黄酮和熊果酸的量，
为山植单方或复方制剂生产提取提供实验依据。
l材料、试剂与仪器
山楂，产地：河北安国，经石家庄第四制药厂姚
震林高级中药师鉴定为山楂Crataeguspinnati一
矗daBunge的果实。标准品：芦丁，批号：0080～9705，
中国药品生物制品鉴定所；熊果酸，批号：110742—
20021，中国药品生物制品鉴定所。甲醇为色谱纯，
其他试剂均为国产分析纯。
SSI高效液相色谱仪(美国)，Tu一1901双光束
紫外可见分光光度计(北京普析通用)；BS210S电子
天平(德国赛多利斯)；C3860超声波清洗器；
ALPHAl—2冷冻干燥机(德国Christ)。
2方法与结果
z．1待测样品的制备o]：称取粉碎的山楂粉20g，
11份，分别加15倍体积水、10％乙醇、20％乙醇、
30％乙醇、40％乙醇、50％乙醇、60％乙醇、70％乙
醇、80％乙醇、90％乙醇、无水乙醇，超声处理45
min，滤过，滤渣再重复提2次，合并提取液，减压浓
缩到一定体积，用水定容。分为两部分。一部分为供
试品A，另一部分转移至分液漏斗中，用水饱和正丁
醇萃取5次，至正丁醇无色，合并正丁醇溶液，挥干、
残渣用乙醇溶解转移至量瓶，用60％乙醇定容，得
供试品B，备用。
2．2干粉的测定：取供试品A，加水适量稀释，转移
至烧杯，置冰箱预冻24h后，取出，冷冻干燥，制得
提取物于粉。提取物干粉经称量，计算干粉得率(于
粉质量／山楂粉质量×loo％)，以乙醇体积分数对干
粉得率作图，结果见图1。
Z．3总黄酮测定[63
2．3．1 标准曲线的绘制；精密称取干燥至恒重的芦
丁对照品9．3mg，置25m1．量瓶中，加60％乙醇溶
解至刻度．摇匀，即得对照品溶液。精密吸取对照品
溶液0．0、0．3、0．5、0．8、1．0、1．3、I．5、1．8、2．0ml。，
分别置10mL量瓶中，加60％乙醇溶液至5mL，精
密加人5％亚硝酸钠0+3ml，，摇匀，放置6rain，再
圈1 乙醇体积分戤与干粉得率的美系
Fig．1Relationshipbetweenthanolc ncentration
andrypowderextractingyields
精密加入10％三氯化铝溶液0．3mL，摇匀，放置lo
rain，再加入4％氢氧化钠溶液4mI，，最后加60％乙
醇至刻度，摇匀，放置10rain，置比色杯中。以不加
对照品的空白做参比，在510tim处测吸光度(A)
值，测3次，取平均值。以芦丁质量浓度(c)对A计
算回归方程和相关系数。回归方程；c一0．0883A+
0．0014，r=0．9998。结果表明芦丁在11．16～74．4
,ug／mL与吸光度线性关系良好。
2．3．2样品测定：取供试品B，按标准曲线项下方
法测定A值，测3次，取均值，根据回归方程计算总
黄酮的量。
2．4熊果酸测定．
2．4．1色谱条件：色谱柱：ThermoODS一2Hypersi
(250mill×4．6Film，5pm)；流动相：甲醇一15
mmol／I。磷酸盐(pH6．8)缓冲液(78：22)；体积流
量：0．5mL／min；柱温：25C；检测波长：219ilm；灵
敏度：0．5AUFS；进样量：10vL。理论塔板数以熊
果酸计不低于2000。
2．4．2标准曲线的绘制：精密称取熊果酸对照品
10．56mg于10mL量瓶中，加甲醇至刻度，制成含
熊果酸1，056mg／mL的对照品溶液。分别精密量取
对照品溶液0．15、0．3、0．6、1．2、2．4、3．6mL于5
mL量瓶中，用流动相加至刻度。按上述色谱条件，
分别吸取10pL进样，测定熊果酸的峰面积，重复3
次，取均值，以质量浓度(c)对色谱峰面积(A)计算
回归方程和相关系数。回归方程：C一6×10～A一
0．0018，，=0．9996。结果表明熊果酸在0．03168～
0．76032mg／mL与峰面积线性关系良好。
2．4．3样品测定：取供试品B，用微孔滤膜(0．45
pm)滤过，精密吸取10HL，按上述色谱条件进行测
定，重复进样3次，取均值，根据回归方程计算熊果
酸的量。色谱图见图2。
2．5 乙醇体积分数与总黄酮提取率的关系：根据4
值计算各样品中总黄酮，得出总黄酮提取率(总黄酮
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第10期2005年10月·I5 1·
0 5 10 15 200 5 10 15 20
，／rain
*-熊果酸
*一urolicacid
圈2熊果酸对照品(A)和山檀提取物(B)的HPLC圈谱
Fig．2HPLCchromatogramsfu olica idreference
substance(A)andC．pinnatifidaextr ct(B)
质量／山楂粉质量×100％，以乙醇体积分对总黄酮
提取率作图，结果见图3。
《4．0
哥
哥
誊
要2。
垣
50 】00
乙醇体积分数肼
圈3 Z醇体积分数与总黄酮提取章的关系
Fig．3Relationshipbetweenthanolc ncentration
andflavonoidsextractingrate
2．6乙醇体积分数与熊果酸提取率的关系：根据峰
面积计算各样品中熊果酸，得出熊果酸提取率(熊果
酸质量／山楂粉质量×100％)，以乙醇体积分数对熊
果酸提取率作图，结果觅图4。
莲o
3
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匕醇体秘分数％
厢4乙醇体积分数与霸累簟提取率的关系
Fig．4Relationshipbetweenthanolc ncentration
andurollcacidextractingrate
2．7乙醇体积分数与干粉得率、总黄酮和熊果酸提
取率的关系：以乙醇体积分数为横坐标，相对提取率
(各指标在不同乙醇体积分数下的提取率／最大提取
率×100％)为纵坐标做图，见图5。
芝
斟
甚
鞘
嚣
璺
0 20 40 60 80 lUO
乙醉体积分数膨
l一熊粜酸2一总黄酮3一千粉
1一urolieacid2-totalitavonoids3-drypowder
圈5 乙醇体积分敷与相对攫取章的关系
Fig．5Relationshipbetweenthanolc ncentration
andrelativeextractingrate
3讨论
50％乙醇时，干粉得率最大，为35％，随着乙醇
体积分数的降低或增加，干粉得率逐渐降低，水提取
时，提取率为24％，无水乙醇提取时，于粉得率最
低，为15％。70％乙醇时，总黄酮提取率最大，达
5．376％，而水提取只得2．295％，无水乙醇时提取
率为3．475％。随着乙醇体积分数的增加，熊果酸提
取率增大。水提取率为0，当乙醇体积分数为0～
40％时提取率很低，40％～70％时剧增，80％～
100％时基本达到最大提取率，无水乙醇提取时，熊
果酸提取率最大，为0．3505％。
从中药多组分、多靶点的作用特点考虑，为能达
到山楂中降脂成分总黄酮、熊果酸的提取率相对较
高，而干粉得率相对较低的最适乙醇体积分数，将3
个指标的相对提取率与乙醇体积分数结台一起考察
作图，可直观地观察和分析各指标随乙醇体积分数
变化趋势及各指标之间的相互变化趋势。总黄酮和
熊果酸的相对提取率均较高时(93．6％)，乙醇体积
分数为78．6％，此时干粉相对提取率为85．6％，达
到了所得干粉或浸膏量少而降脂有效成分高，最终
达到一步提取，简化工艺，取精去杂、减少服用量的
中药现代化要求。
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HPLC法测定固本益肠薄膜衣片中芍药苷
鲁曼华1，李洪侠2，孙玫3，粱娟4
(1．沈阳军区总医院。辽宁沈阳 110015；2．沈阳市医药学校，辽宁沈阳110013；3．沈阳绿洲制药有限责任公司
辽宁沈阳 110016E 4．沈阳军区总医院动物实验科．辽宁沈阳 110015)
固本益肠片是由白芍、黄芪、延胡索、党参等14
味中药制成的中药制剂，具有健脾温肾、涩肠止泻之
功效，临床用于治疗脾肾阳虚所致的慢性腹泻。芍药
苷是其中的主要有效成分，具有抗炎、镇痛作用C⋯。
本实验采用RP—HPLC对固本益肠片中的芍药苷测
定方法进行了研究，结果表明，该法简便、快捷、重现
性好，可用于固本益肠片的质量控制。
1仪器与试药
日本岛津Lc一】0A高效液相色谱仪，sPD一
10AVP紫外检测器，Anastar工作站；KQ2200超声
波清洗器。
固本益肠薄膜衣片(沈阳绿洲制药有限责任公
司)；芍药苷对照品(中国药品生物制品检定所)；甲
醇、乙腈为色谱纯，磷酸为分析纯，水为重蒸馏水。
2方法与结果
2．1色谱条件：色谱柱：DisCoveryC，。色谱柱(200
1Tam×4．6InN，5ym)；流动相：甲醇一乙腈一0．025
mol／I，磷酸溶液(含0．18％三乙胺)(2，13t 85)；
体积流量：lml。／min；检测波长：230rim。理论板数
按芍药苷峰计算，不低于4500。
2．2芍药苷对照品溶液：取芍药苷对照品适量，精
密称定，加甲醇溶解并稀释使成80。599／mL，摇匀，
即得。
2．3供试品溶液的制备：取本品20片，精密称定、
研细、混匀，取约lg．精密称定。加水30mI。，超声处
理30rain，滤过，置50mL量瓶中，加水稀释至刻
度，摇匀，即得。
2．4色谱行为：按固本益肠片处方称取除白芍外的
各药，与样品相同工艺制备空白片剂，制备溶液，通
收稿日期：2005一ol06
过比较，确证16．711rain色谱峰为芍药苷色谱峰
空白制剂中其他组分不干扰测定，结果见图1。
过选
o lo 20o 10 20o 10
*一芍药苷
*一paeoniflorin
围l蚨白芍阳性对厢(A)、圃本益肠薄膜衣片
(B)和芍药苷对照品(c)的HPLC圈谱
Fig-1HPLCchromatogramsfnegativeample
withoutRadixPaeonileAIba(A)．Guben
YiehangTahlels(B)，andpaeonlflorln
referenceSUbstanee(C)
2．5标准曲线的绘制：精密吸取芍药苷对照品溶液
2．0、4．0、5．0、8．0、10．0mL，置10mL量瓶中。加甲
醇稀释至刻度，摇匀．依次吸取20pI。，注入高效液
相色谱仪。以峰面积对质量浓度进行线性回归计算，
得标准曲线回归方程为Y=852389X一9677．2，
r=0．9993．说明芍药苷在16．1～80．5yg／mL与色
谱峰的峰面积积分值呈良好的线性关系。
2．6精密度试验：取样品批号为20031001的供试
品溶液，建续进样5次，攫4定芍药苷峰面积，计算得
其RSD为0．95％。
2．7重现性试验：取批号为20031001样品，5份，
制备供试品溶液，分别进样分析，测定芍药苷峰面积
积分值，计算方法精密度RSD为0．71％。
万方数据
一步提取山楂中总黄酮和熊果酸的工艺研究
作者： 杨万运， 殷殿书， 蒋建兰， 元英进
作者单位： 天津大学化工学院,制药工程系,天津,300072
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(10)
被引用次数： 3次

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中南药学 2010(2)

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