全 文 ：3. 1　用 NaNO2-Al( NO3 ) 3-NaOH体系与黄酮形成
络合物的化学吸光分析法 ,线性关系好 ,简便快捷 ,
条件一致时 ,可比性强 ,结合 HPLC分析数据进行
修正可作为定量分析用 ,为探索最佳提取工艺和中
间指标控制提供了有效评价方法。
3. 2　反相高效色谱法以槲皮素为标样定量测定荷
叶酸解液的总黄酮含量分析 ,线性关系、重复性、稳
定性好 ,回收率高。
3. 3　高效液相色谱法以槲皮素为标样分析黄酮得
率 1. 183% ,分光光度法黄酮得率 4. 43% 。
参考文献:
[1 ]　江苏新医学院 . 中药大辞典 (上 ) [M ] . 上海:上海科学技术出
版社 , 1977.
[2 ]　吴吉茂 ,毛维伦 ,江向东 ,等 . 荷叶对家兔食饵性高胆固醇血症
和动脉粥样硬化影响 [ J] .江西医学院学报 , 1987, 27( 3): 5-8.
[3 ]　王宇辉 . 中药降脂研究进展 [ J] . 中国中药杂志 , 1999, 24( 3):
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[4 ]　黄阿根 ,钱建亚 ,谭道经 . 荷叶黄酮提取工艺的研究 [ J ]. 食品
与机械 , 2000, 5: 14-18.
大孔吸附树脂在延胡索生物碱提取分离中的应用
刘俊红 ,魏峻峰 ,王洪志 ,伍孝先
(天津市中西医结合急腹症研究所 ,天津　 300100)
中图分类号: R286. 02　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670( 2002) 01 0037 02
　　延胡索为罂粟科植物延胡索 Corydalis yan-
husuo W. T. Wang的干燥块茎 ,含有多种生物碱 ,
以延胡索乙素 (四氢巴马汀 )为主 ,具有明显的镇痛、
催眠和镇静作用。近年来大孔树脂在药物提取分离 ,
尤其是水溶性成分的分离中 ,显示着越来越重要的
作用。 本实验将 3种大孔吸附树脂应用于延胡索生
物碱的提取分离 ,对于优化生产工艺具有一定的参
考价值。
1　实验部分
1. 1　仪器、材料与试剂:三用紫外灯 ,日本岛津 LC-
10A高效液相色谱仪 ,美国 SSI色谱工作站 ;大孔吸
附树脂 D-101、 DA-201为天津农药厂产品 , W LD-
Ⅲ 为四川中药研究所提供 ; 薄层板: 自制含 1%
NaOH溶液的硅胶 G板 , 10 cm× 20 cm。延胡索乙
素对照品购自中国药品生物制品检定所 ;甲醇为色
谱纯 ,其它试剂均为分析纯。
1. 2　树脂的预处理及再生: 称取大孔树脂 30 g ,湿
法装柱。用 4%盐酸 -乙醇液清洗至流出液加等量水
无混浊 ,然后用自来水冲洗至中性。 用过的树脂 ,用
水洗去溶剂后 ,即再生 ,可用于同类植物的分离。经
反复使用后 ,或用于不同品种的分离 ,可用稀酸或稀
碱浸泡、洗涤 ,水洗中性即可。
1. 3　吸附容量的测定: 分别取延胡索提取液 (以
mg /mL计算 )若干毫升通过 3种已处理的树脂柱 ,
收集与重量相对应流出液体积的后 15 mL,用氨水
调 pH= 12,再用乙醚 20 mL萃取 1次 ,取乙醚液置
于蒸发皿上 ,吹风机冷风吹干 , 1 mL甲醇溶解 ,作为
吸附不同重量时的样品液。 按 2000年版《中国药
典》一部延胡索薄层鉴别方法鉴定。确定树脂吸附容
量 (树脂: 生药 , g /g )分别为 D-101( 1∶ 1) , W LD-Ⅲ
( 1∶ 1) , DA-201( 5∶ 1)。
1. 4　洗脱剂的确定:分别按吸附容量将延胡索水提
取液通过 3种已处理的树脂柱 ,用水洗至流出液无
色 ,然后分别用 30% , 40% , 50% , 60% , 70% , 80% ,
90% , 95%乙醇依次洗脱 ,收集各段洗脱液 ,同 1. 3
薄层鉴别方法。 除 30%、 40%乙醇外 ,其他乙醇浓度
在延胡索乙素对应位置均有明显斑点 ,因此选择
95%乙醇为洗脱剂。
1. 5　延胡索乙素的含量 [1 ]测定
1. 5. 1　 色 谱 条 件: 色 谱 柱: phemoenex ODS
( 4. 6 mm× 250 mm) ,流动相:甲醇 -2 mol /L磷酸盐
缓冲液 ( p H= 7. 2) ( 75∶ 25) ,检测波长: 280 nm ,流
速: 0. 8 mL /min。
1. 5. 2　样品液的制备:分别按吸附容量将延胡索水
提取液通过 3种已处理的树脂柱 (树脂 30 g ) ,用水
洗至流出液无色 ,先用 40%乙醇洗脱 ,弃去 ,再用
95%乙醇洗脱 ,以每 5毫升逐段收集洗脱液 ,分别用
乙醇稀释不同的倍数 ,过膜 ,作为样品液备用。
1. 5. 3　标准曲线的制备:精密称取延胡索乙素对照
品 5. 7 mg ,用甲醇溶解 ,定容于 10 mL容量瓶 ,从中
·37·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 1期
收稿日期: 2001-05-14
精取 5. 0 mL,甲醇定容至 10 mL,按上述色谱条件 ,
分别进样 20, 15, 10, 5, 2. 5μL,由数据处理机计算
各峰面积 ,以峰面积与对照品浓度进行线性回归 ,得
回归方程: Y= 4. 791× 10- 5X , r= 0. 999 9。
1. 5. 4　含量测定:分别精密吸取样品液 20μL,按上
述色谱条件测定 ,按外标二点法计算浓度。
1. 6　洗脱曲线的绘制:根据 1. 5. 4测定的结果计算
出每 5毫升洗脱液中延胡索乙素的含量 ,绘制 3种
型号树脂的洗脱曲线 ,见图 1。
图 1　 3种型号树脂的洗脱曲线
2　结果
根据测定结果分别计算出从 3种型号树脂上洗
脱下来的延胡索乙素占总生药 量 , D-101为
0. 069% , WLD-Ⅲ 为 0. 072% , DA-201为 0. 053%。
从洗脱曲线图上可以看出 , D-101和 W LD-Ⅲ洗脱
效果较好。不同之处是若洗脱下 0. 069%的延胡索乙
素 , D-101型树脂用乙醇 75 mL,而 WLD-Ⅲ型树脂
用乙醇 55 mL,再加乙醇可继续洗脱至 0. 072% 。因
此 ,两种树脂都可以参考 ,以 WLD-Ⅲ为佳。 吸附的
生药量为树脂的 1倍 ,用两倍树脂量的 95%乙醇能
基本洗脱完全。
3　讨论
3. 1　本实验采用大孔吸附树脂吸附样品后 ,先用
40%乙醇洗脱是为了除去干扰成分 ,便于 HPLC测
定 ,结果分离度好且保护了色谱柱。但是 , 40%乙醇
有可能洗脱下其它生物碱 ,因此 ,在实际生产中可根
据需要对这一步骤进行取舍。
3. 2　延胡索乙素在空气中不稳定 ,易受阳光照射或
温度的影响 ,脱氢氧化为结构稳定的巴马汀 [2 ]。在实
验操作中应尽量避免受热。
3. 3　经大孔吸附树脂提取分离的延胡索生物碱 ,成
品体积小 ,相对含量高 ,产品质量稳定 ,具有良好的
生理活性。
参考文献:
[1 ]　原永芳 ,李修禄 ,柳正良 ,等 . 超临界流体萃取及高效液相色谱
法分析延胡索中延胡索乙素的含量 [ J ] . 药学学报 , 1996, 31
( 4): 282-286.
[2 ]　周玲英 ,吴　晓 . 薄层扫描测定调经止痛胶囊延胡索乙素含量
[ J ]. 中成药 , 2000, 22( 3): 194-195.
HPLC法测定海洋胃药中胡椒碱的含量
戚宝婵 1 ,郭汉文 1 ,陈发奎 2
( 1. 辽宁省药品检验所 ,辽宁 沈阳　 110023; 2. 沈阳药科大学中药学院 ,辽宁 沈阳　 110016)
中图分类号: R286. 02　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670( 2002) 01 0038 02
　　海洋胃药由海星、陈皮、黄芪、胡椒等 9味中药
组成 ,为国家中药保护品种。 中华人民共和国药典
2000年版一部胡椒项下也有高效液相色谱法测定
胡椒碱的含量 ,但其采用内标法测定 ,需加内标物 ,
不适合成方制剂。 本文采用外标法测定海洋胃药中
胡椒碱的含量 ,操作简便、快速、重复性好 ,为控制产
品质量提供了依据。
1　仪器与试剂
日本岛津 LC-10A高效液相色谱仪 , Class-vp色
谱工作站 ;胡椒碱对照品购自中国药品生物制品检定
所 ,批号为 0775-9702,纯度为 98. 9% ;海洋胃药由大
连海洋药业有限公司提供 ,批号为 20000410。
2　方法与结果
2. 1　提取条件的选择: 以无水乙醇为提取溶剂 ,采
用超声提取 ,并对不同提取时间的样品含量进行了
考察 ,根据考察结果确定超声时间为 40 min。
2. 2　供试品溶液的制备: 取本品 10片 ,除去包衣 ,
研细 ,精密称取 0. 6 g ,置 50 mL棕色量瓶中 ,加无水
·38· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 1期
收稿日期: 2001-04-09作者简介:戚宝婵 ( 1963-) ,女 ,山东省济宁市人 ,副主任药师 , 1986年毕业于沈阳药科大学 ,主要从事中药检验及质量标准研究 ,发表科研论文 8篇。 Tel: 024-25854645