全 文 ：量,制备供试液, 每隔 20 min测定其吸光度, 在 2 h
内基本稳定, RSD 为 2148%。
216 精密性试验: 精密称取望春玉兰药材样品适
量, 制备供试液, 测定 5 次, 吸光度值 RSD 为
0137%。
217 回收率试验:称取已知含量的辛夷药材样品适
量( 5 份) , 加入芦丁对照品适量, 制备供试液, 进行
测定,平均回收率为 100165%, RSD 为 2118%。
218 样品测定:精密称取辛夷药材粉末 5 g( 3份) ,
按 21112项下方法制备样品溶液, 显色,以空白液对
照,在 510 nm 处测定, 平行测定 3次,按回归方程计
算含量,结果见表 1。
表 1 不同品种辛夷药材中总黄酮的含量测定( n= 3)
Table 1 Determination of total flavonoids for dif ferent crude
drugs of Flos Magnoliae ( n= 3)
品 种 总黄酮/ %
望春玉兰 5. 737
武当玉兰 8. 965
玉 兰 8. 792
3 讨论
311 有关辛夷药材中总黄酮的含量测定未见报道,
但文献记载含有芦丁。我们进行了辛夷药材的黄酮
类化合物的鉴别实验, 结果明显。本实验中采用了
芦丁为对照品,建立了比色法测定其总黄酮含量。
312 比色法测定辛夷中总黄酮含量的方法, 简便、
快速、稳定, 灵敏性高。首先用石油醚回流可除去脂
溶性色素等成分, 有效地消除了干扰成分的影响。
313 样品测定的结果可知,药典中收载的 3种不同
品种的辛夷药材中均含有较高的黄酮类成分,武当
玉兰与玉兰接近, 而望春玉兰稍低。提示品种不同,
其质量存在差异。
References:
[ 1] Xu G J. Category and Quali ty Cont rol of Common Chinese
Herbs (常用中药材品种整理与质量研究 ) [ M ]1 Fuzhou: Fu-
jian S cience and Technology Publishing H ouse, 19971
[ 2] Zheng H Z. Mod ern Research and App li cation of Trad it ional
Chinese Medicine (中药现代研究与应用) [ M ]1 Vol Ó . Be-i
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[ 3] Shi D W. Exp erimental G uid e of Pharmacog nosy (生药学实验
指导) [ M ]1 Shanghai: Shanghai University of M edical S cience
Publishing House, 19891
HPLC法测定补血胶囊中黄芪甲苷的含量
吴巧凤,范 英X
(浙江中医学院 药学系, 浙江 杭州 310053)
复方补血胶囊系黄芪、当归、牡蛎肉等多味中药
组成的复方制剂[ 1]。具有益气养血、健脾滋肾、活血
化瘀等功效。黄芪为君药,黄芪所含的黄芪甲苷为其
主要活性成分。采用 HPLC法测定黄芪甲苷的报道
较多,均采用紫外检测、乙腈-水为流动相, 但实验干
扰大,成本高。本实验采用HPLC-示差折光检测法,
并改用甲醇-水为流动相测定了复方补血胶囊中黄芪
甲苷的含量。该法简便准确,重现性好,灵敏度高。
1 仪器与试药
日本岛津 LC-10A 高效液相色谱仪, R1-6A 检
测器, CLASS-10A色谱工作站, CQ-250 型超声波清
洗器。甲醇为色谱纯,水为双蒸水,其他试剂均为分
析纯。黄芪甲苷(中国药品生物制品检定所) , 复方
补血胶囊由本院制剂室提供。
2 实验方法
211 色 谱 条 件: 色 谱 柱 为 Hypersil ODS2
( 200 mm @ 416 mm, 5 Lm) , 流动相为甲醇-水 ( 67B
33) ,流速为 1 mL/ min,柱温为 35 e 。
212 供试品溶液的制备:精密称取复方补血胶囊粉
末 1 g, 置 150 mL 碘量瓶中, 加水饱和的正丁醇超
声萃取 3次( 25, 15, 15 mL) , 每次 5 min, 合并正丁
醇萃取液,用氨试液(正丁醇饱和)洗涤 3次( 10, 10,
8 mL) , 再用正丁醇饱和的水洗涤 3 次 ( 10, 10, 8
mL) ,弃去洗液, 正丁醇层置水浴蒸干,残渣加甲醇
适量, 置水浴上加热使溶解, 过 0145 Lm 微孔滤膜
后,定容于 2 mL 容量瓶中,作为供试液。
213 标准曲线的制备:称取烘干至恒重的黄芪甲苷
对照品 11002 2 mg, 用甲醇溶解并定容于 2 mL 容
#425#中草药 Chinese T raditional and Herbal Drugs 第 34 卷第 5 期 2003年 5月
X 收稿日期: 2002-10- 15作者简介:吴巧凤( 1963 ) ) ,女,浙江浦江人,教授, 1986年毕业于复旦大学化学系,获理学学士学位,参与国家中医药管理局项目 1项,浙江省科委青年人才基金项目 1项,主持省卫生厅和教育厅项目 3项,发表论文 20 篇, 参编教材 5本, 主要从事中草药成分分析及中药质量标准的研究。E- mail: WQFYJM@ sina. com. cn
量瓶中,得黄芪甲苷对照品溶液。精密吸取此溶液
2, 6, 10, 14, 18, 20 LL, 分别进样各 3次, 以浓度 C
对峰面积平均值A 求出线性回归方程: A = 21868
@ 104C+ 1 174, r= 01999 6,线性范围为 1~ 10 Lg。
214 精密度试验:以浓度为 21010 mg / mL 的黄芪
甲苷溶液连续 5 次进样 4 LL, 测定黄芪甲苷的含
量, RSD = 0132%。
215 重现性试验: 对同一批样品平行分析 5次, 黄
芪甲苷平均含量为 15132 Lg / g, RSD= 1125%。
216 稳定性试验:对同一样品, 在 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7,
8 h进样, 测得黄芪甲苷峰面积 RSD = 1148% ( n =
9)。该样品于冰箱内保存,每天进样一次,连续6 d,
样品稳定,黄芪甲苷峰面积 RSD= 1138%。
217 加样回收试验:精密称取复方补血胶囊样品 6
份,每份约 1 g,各加入黄芪甲苷对照品溶液( 21010
mg/ mL) 100 LL。按样品测定项下进行操作, 结果
平均回收率为 98175% , RSD= 013%( n = 6)。
218 样品的含量测定: 取 20 LL 供试品进样, 测定
结果见表 1。
3 讨论
311 黄芪的主要有效成分为黄芪甲苷,药典采用薄
层扫描法测定其含量[ 2] ,样品需经上柱处理,操作烦
表 1 复方补血胶囊中黄芪甲苷的含量测定结果( n= 5)
Table 1 Astragaloside I in Fufang Buxue Capsule ( n= 5)
批 号 黄芪甲苷含量/ ( mg#g- 1) R SD / %
20010815 11. 05 1. 83
20010626 12. 60 2. 50
20010417 13. 51 1. 53
20001205 15. 43 2. 73
20001008 15. 68 2. 50
琐。本实验采用 HPLC 法测定, 前处理简便, 其他
杂质的干扰被消除, 方法可行, 测定结果准确可靠,
从而能有效地控制该成药的质量。
312 本研究曾用紫外检测器在 203 nm 处检测黄
芪甲苷的含量,但结果显示紫外检测法由于黄芪甲
苷的最大吸收波长靠近紫外区末端, 因此要求乙腈
在 200 nm 处的透光率应大于 90%, 否则无法测定。
而示差折光检测法则消除了该问题, 且灵敏度高,同
时可以使用价廉的甲醇作流动相。
References:
[ 1] Wu Q F, LG Y. Study on preparation procedure for Compound
Buxue Capsule [ J]1 Chin T radi t Pat Med (中成药) , 1997, 19
( 5) : 3-51
[ 2] Ch P (中国药典) [ S ]1 2000 ed. Vol Ñ1
HPLC法测定双黄连滴丸中黄芩苷的含量
金 华,宋新波,李 彦,刘 X
(天津中医学院, 天津 300193)
双黄连制剂为目前抗菌、抗病毒、退热的有效成
药,对呼吸道感染、肺炎、扁桃体炎等疾病治疗有非
常理想的效果。双黄连滴丸系根据双黄连注射液改
剂型而得, 由金银花、黄芩、连翘组成。黄芩苷是其
主要有效成分。为了控制产品内在质量, 本研究采
用HPLC 法测定其中黄芩苷的含量。
1 仪器与试药
日本 Shimadzu-10A高效液相色谱仪; 甲醇为色
谱纯,冰醋酸为分析纯,水为去离子水。黄芩苷对照
品由中国药品生物制品检定所提供;双黄连滴丸自
制,批号 970929, 971029, 971129。
2 方法与结果
211 色谱条件:色谱柱为 CLC-ODS ( 250 mm @ 416
mm, 10 Lm) , 流动相为甲醇-冰醋酸-水( 48B1B52) ,
检测波长为 276 nm, 流速为 1 mL/ min, 柱温为 25
e 。理论塔板数按黄芩苷峰计应大于 4 500。
212 对照品溶液的制备: 精密称取黄芩苷对照品
215 mg ,置 100 mL 容量瓶中,加 50%甲醇溶解并稀
释至刻度,摇匀,即得。
213 样品溶液的制备:取滴丸 10粒于乳钵中, 研细
混匀后, 精密称取 15 mg, 置 50 mL 容量瓶中,精密
加入 50%甲醇适量,超声提取 20 min,加 50%甲醇
稀释至刻度, 摇匀, 取上清液作为样品溶液。用
0145 Lm 微孔滤膜过滤,弃去初滤液, 续滤液备用。
214 色谱行为:分别取对照品溶液、供试品溶液 10
LL, 按上述色谱条件进样分析, 黄芩苷与双黄连滴
丸中其他组分分离良好。色谱图见图 1。
215 标准曲线的绘制:精密量取对照品溶液 110,
#426# 中草药 Chinese T raditional and Herbal Drugs 第 34 卷第 5 期 2003年 5月
X 收稿日期: 2003-01- 09