全 文 ：·1852· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第12期2005年12月
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苁蓉总苷对血管性痴呆大鼠学习记忆的影响及机制研究
皋聪1，王传社2”，巫冠中1，胡梅1，屠鹏飞2“’
(1．中国药科大学药理教研室．江苏南京210009，2．北京大学中医药现代研究中心，北京100083
3．北京大学基础医学院．北京100083}4．北京大学药学院，北京100083)
人口的老龄化已使寻找安全有效的防治老年痴
呆症药物成为药物研究的热点。近年来，中医学使用
以补肾益髓为主、兼补心脾的方法治疗老年痴呆症
取得了较大的进展。肉苁蓉始载于《神农本草经》，具
有补肾阳、益精血、润肠通便之功效，现广泛用于治
疗老年性痴呆、阳痿、习惯性便秘等病症口“1。研究表
明其具有抗痴呆、抗氧化、抗缺氧、抗辐射、增强免疫
功能等作用，主要成分为苯乙醇苷类[3“]。苁蓉总苷
是从管花肉苁蓉Cistanchetubulosa(Schrenk)R．
Wight的干燥肉质茎中提取精制而成的，含苯乙醇
苷类90．7％，其中含主要成分松果菊苷(eehinaco—
side)44．3％。本实验研究苁蓉总苷对血管性痴呆大
鼠学习记忆障碍以及正常大鼠血栓形成和血小板聚
集的影响，为其开发成为促智和防治老年性痴呆症
的新药提供依据。
1材料
1．1动物：SD大鼠，雄性，体重470～570g，由上
海西普马一必凯实验动物有限公司提供，合格证号：
沪动合格字第152号。
1．2药物与试剂：苁蓉总苷，管花肉苁蓉的提取物，
含苯乙醇总苷90．7％、松果菊苷44．3％，深褐色粉
末，由北京大学中医药现代研究中心化学室提供，批
号为980601。吡拉西坦片，宜兴制药厂生产，批号为
980521。阿司匹林肠溶片，南京第二制药厂生产，批
号为000402。各药用前以蒸馏水配制。肝素钠，中国
医药(集团)上海化学试剂公司产品，批号为
F000128。戊巴比妥钠，中国医药(集团)上海化学试
剂公司进口分装，批号为971104。二磷酸腺苷二钠
(ADP)，中科院上海生化所东风生化技术公司产
品，批号为9305122，用前配成lmg／mL储备液冰
箱保存，用时以磷酸缓冲液稀释3倍。
1．3仪器：MG一3型Y型电迷宫，张家港教学实
验器械厂生产。SPA一4多功能血小板聚集仪，上海
科达测试仪器厂生产。
2方法
2．1 大鼠局灶性脑缺血一再灌注致血管性痴呆模型
制备及检测
2．1．1分组与给药：将大鼠按体重随机分为6组，
分别为假手术组、模型组、阳性对照组(吡拉西坦
300mg／kg)及苁蓉总苷高、中、低剂量(200、100、
50mg／kg)组。各组ig给药，0．5mL／100g，每日1
次，假手术组和模型组给予等体积的蒸馏水，连续给
药30d。
2．1．2模型的制备”]：于给药的第16天，大鼠以水
合氯醛360mg／kgip麻醉。正中切开颈部皮肤，分
离右侧颈部肌肉。游离颈总动脉和颈外动脉，结扎并
剪断颈外动脉分支。分离颈内动脉，直至暴露翼腭突
动脉。用动脉夹夹闭该侧颈总动脉，颈外动脉切口，
将头端钝圆、直径0．28mm的碳素渔线从大鼠颈外
动脉插入颈内动脉并进入颅内，直到有轻微阻力，这
时大脑中动脉的所有血供被阻断。缺血40min后将
渔线抽出，结扎颈外动脉，再通颈总动脉，消毒、缝
合，im青霉素防止感染。假手术组只分离和结扎颈
外动脉，不插渔线、不夹闭颈总动脉。
鉴鐾景皙：箬鬟嚣苌簖药物与中药现代化专项(96—9，。一。。一2。8)尊翥蕞雍挚蒜笔67_Tel／’男Fax漕：(师’010主)琶燥挚翟姜鬣@。E，-ma．池il：g—aoc””吨”3’⋯
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第12期2005年12月· 853·
2．1．3学习记忆测试o]：于手术后第7天，采用Y随机分为5组，分别为正常对照组、阳性对照组(阿
型电迷宫进行学习记忆训练和测试。实验在安静、暗 司匹林100mg／kg)及苁蓉总苷给药组(剂量同
环境下进行，将大鼠置于其中的一臂(固定的起步 上)。给药方法同2．2项。末次给药前禁食12h，于
区)，在灯光下适应2min，然后给予电击。在左臂设 末次给药后1h从腹主动脉取血，以3．8％枸橼酸
灯光信号，为安全区，右臂有电流无灯光，为危险区。 钠(1；9)抗凝，轻轻混匀后，以1000r／rain离心3
电击强度以大鼠受电击后能奔跑为准，电压为50～ min，吸出上层富含血小板血浆(PRP)，余血继续在
60V。大鼠受电击后逃至安全区为正确，逃至危险 3 000r／min离心10min，上清为贫血小板血浆
区为错误，每次训练后在安全区停留30S以巩固记 (PPP)。比浊管中加入200ffLPRP，并以PPP调零
忆。再次训练时在起步区灯光下休息10S，反复10 点，预保温5rain后加入50pI，ADP溶液诱导血小
次，记录正确和错误次数，计算正确反应率。每次训 板聚集，测定血小板聚集强度，计算血小板聚集抑
练均在给药后lh进行，连续测定4d。然后以左右 制率。
臂交替为安全区再测定4d，记录正确和错误次数， 聚集抑制率=(正常组最大聚集率给药组最大聚集
并计算正确反应率。 率)／正常组最大聚集率×loo％
正确反应率=正确反应数／训练次数 2．4统计处理：结果均以z±5表示，用组间比较的
2．2大鼠动～静脉旁路血栓形成及检测⋯：将大鼠t检验对数据进行统计处理。
按体重随机分为5组，分别为模型组、阳性对照组 3结果
(阿司匹林100mg／kg)、苁蓉总苷高、中、低剂量3．1对局灶性脑缺血一再灌注致血管性痴呆模型大
(200、100、50mg／kg)组。各组ig给药，0．5mI．／ 鼠学习记忆功能的影响：结果见表1。测试的前4d
(i00g)，模型组给等体积的蒸馏水，连续给药7d。 各组平均正确反应率逐日提高，第4天各组平均正
末次给药后，ip戊巴比妥钠45mg／kg麻醉，仰卧位确反应率均达到90％以上。前3d苁蓉总苷各剂量
固定，分离右颈总动脉和左颈外静脉。将一根长7 组和阳性组的平均正确反应率均高于模型组，差异
cm的4号手术丝线称质量后放人3段聚乙烯管的显著(P
素生理盐水充满整个聚乙烯管。将静脉端插入左颈 血管性痴呆大鼠迷宫训练时的正确反应率，即苁蓉
外静脉后，从动脉端准确地注入50U／kg的肝素生 总苷对该模型所致的学习记忆功能障碍有明显的保
理盐水抗凝，然后将动脉端插入右颈总动脉。给药后 护作用。第4天各组的平均正确反应率无明显的差
1 h打开动静脉旁路，开放15min后中断血流，迅 异，第5天以左右臂交替作为安全区后，各组的平均
速取出丝线置称量纸上，用电子分析天平称湿质量， 正确反应率均明显下降，但各组之间无明显差异。随
计算血栓抑制率。 后各组的平均正确反应率又逐步提高，但各组之间
血栓抑制率=(模型组血栓质量一给药组血栓质量)／模 平均正确反应率亦无显著差异。表明苁蓉总苷只能
型组血栓质量×100％ 使脑损伤大鼠学习记忆功能恢复到一定程度，且学
2．3大鼠血小板体外聚集的检测”。：将大鼠按体重 习方式的改变不影响已获得的学习记忆能力。
表1苁蓉总苷对局灶性脑缺血一再灌注致血管性痴呆大鼠学习记忆功能的影响
Table1 EfleetofeistanchisglycosidesOil arninga dmemoryfunctionofvasculardementiarats
inducedbyfoc乱cerebralisehemia—reperfttsiott
与模型组比较：’P
·1854· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第12期2005年12月
3．2对大鼠动一静脉旁路血栓形成的影响：结果见
表2。与模型组比较，苁蓉总苷200、100mg／kgig给
药能明显抑制大鼠动一静脉旁路血栓形成，但其作用
均明显弱于100mg／kg阿司匹林。苁蓉总苷50
mg／kg对大鼠动一静脉旁路血栓形成无影响。说明
苁蓉总苷对整体动物动一静脉旁路血栓的形成有一
定抑制作用。
衰2苁蓉总苷对大鼠动一静脉旁路血栓
形成的影响“一10)
Table2 Effectofcistanchlsglycosidesoilarteriovenous
shuntthrombosisofrats(n一10)
与模型组比较：’P
结果见表3。与正常组比较：苁蓉总苷200、100、50
mg／kgig给药均能明显抑制ADP诱导的大鼠体外
血小板聚集，以200mg／kg组的抑制率最高，达到
59．48％。
裹3苁蓉息苷对ADP诱导的大鼠体外血小板
聚集功能的影响
Table3 Effectofcistanchisglycosidesonplatelet
aggregation跏vitroinducedbyADP
组别
押ltt／ 动物／ 最大聚集率／ 聚集抑制率／
(nag·kg1) 只 “ ％
与正常组比较：‘P
4讨论
老年性痴呆一般可分为4种，即阿尔茨海默病
(AD)、血管性痴呆(VD)、混合性痴果(前两者并
存)及由全身性疾病引发的老年人痴呆。流行病学
调查显示，西方国家AD的发病率高于VD，而我国
则不同，根据11个城市的普查。VD的患病率高于
AD01。VD系由脑血管因素导致脑组织损害所引起
的痴呆综合征的总称。中医认为本病多属本虚标实，
随着年龄的增加，机体肾中精气渐亏，髓海渐虚，脏
腑功能渐衰，脏衰则致机体水液输布、气血运行失
常，进而出现痰浊血瘀等病理产物堆积体内，痰瘀交
阻而致脑络受损，气血无以渗灌，窍络升降不利，神
机失统，记忆匮乏，发为痴呆。因此，本病的特点是因
虚致实、虚实夹杂，肾虚是老年性痴呆发生发展的根
本原因，痰浊停聚和脉络瘀阻后化毒为害，损伤脑络
则是该病发病过程中的基本病理环节。
肉苁蓉是传统的补益壮阳药，具有补肾填精及
润肠作用，《本草经疏》称其为补精血、滋肾之要药，
对肾虚所致倦怠、健忘、听力减退及遗尿等症状有较
好的疗效。朱志明等对治疗老年性痴呆的46个复
方的药物组成进行了分析，发现肉苁蓉是常用药物
之一“]。本实验中，大鼠在ig给药的第16天，进行
局灶性脑缺血一再灌注致vD模型制备，继续给药的
第7天开始进行学习记忆的训练和测试。在测试的
前3d，模型组的平均正确反应率明显低于假手术
组大鼠，说明脑缺血～再灌注损伤造成模型大鼠学习
记忆功能障碍；而苁蓉总苷各剂量组大鼠的平均正
确反应率明显高于模型组，与假手术组大鼠的水平
相当，说明肉苁蓉对VD太鼠的学习记忆障碍确有
预防和治疗作用，苁蓉总苷为其抗痴呆的有效成分。
VD的发病原因及发病机制相当复杂，目前尚
不十分清楚。近年研究表明，VD的危险因素包括与
卒中有关和与卒中无关的因素，总结为高血压、心脏
病、高血脂、糖尿病、血容积比容、教育水平、年龄、性
别等，而其发病机制则与多发性梗死、重要部位的单
个梗死、脑白质缺血等有关““u]。本实验中，ig给予
苁蓉总苷7d的大鼠动一静脉旁路血栓湿质量明显
低于模型组，即苁蓉总苷能明显抑制整体动物体内
血栓形成；结果还表明苁蓉总苷体内给药可明显抑
制ADP诱导的大鼠体外血小板聚集。综合两个实
验结果，可以发现苁蓉总苷预防和治疗VD的机制
可能与抑制机体血小板聚集有关。
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氧化苦参碱对豚鼠心室肌细胞动作电位和单通道钠电流的影响
陈 霞·，张文杰2，吕文伟1，李英骥2，钟国赣p
(i．吉林大学基础医学院药理教研室，吉林长春130021}2．吉林大学基础医学院生理教研室．吉林长春150021)
氧化苦参碱(oxymatrine)是从豆科植物苦参
SophoraflavescensAir．中提取的一种生物碱。氧化
苦参碱对心血管系统的作用较为显著，具有强心、抗
心律失常、抑制细胞凋亡、清除自由基及抑制豚鼠心
室肌全细胞钠电流等多方面的药理作用“。23。但关于
氧化苦参碱对豚鼠心室肌单细胞动作电位及单通道
钠电流的影响尚未见报道，因此本实验拟在细胞和
单通道水平观察氧化苦参碱的作用，为探讨氧化苦
参碱抗心律失常作用机制提供理论依据。
1材料
豚鼠，雌雄兼用，体重300～350g，由吉林大学
实验动物部提供。氧化苦参碱(质量分数>99％)
由中国药品生物制品检定所提供。CEZ--2400型膜
片钳放大器为日本产品。
2方法
2．1单细胞动作电位的记录方法：应用胶原酶常规
分离豚鼠心室肌细胞o]。将尖端直径为0．8～1．5
“m的微电极抛光后冲灌电极液，电阻为1～3Mn。
将已加正压的微电极缓缓插人浴液，直至接触心肌
细胞，去除正压，用注射器抽吸以形成0．98～1．96
kPa的负压。当电极尖端与细胞膜表面形成l～5
GI)封接电阻时，用力吸破电极尖端上的膜片，形成
全细胞记录。应用电流钳方法，给予时程10riis、每
秒1次，幅度为1～2nA的内向电流脉冲，引导出
豚鼠心室肌细胞的动作电位，并输入计算机分析动
作电位的各项指标“]。在细胞外液中加入1mmol／L
氧化苦参碱3rain后，同样的方法引导动作电位，测
量静息膜电位(RMP)、动作电位幅值(APA)、动作
电位上升最大速率(y～)、动作电位复极50％时
程(APD；。)和动作电位复极90％时程(APD。。)
等指标。
2．2单通道钠电流的记录方法：用记录单通道钠电
流的电极液充灌电极后，在显微镜下进行抛光处理，
一般电极电阻为1～1．5M12。将玻璃微电极置于细
胞的表面，通过负压吸引作用形成10Gn以上的高
阻封接，使电极尖端下的细胞膜片在电学上与周围
膜片相隔离，形成细胞贴附式的记录方式。
2．3记录动作电位及单通道钠电流所需溶液：记录
动作电位所用灌流液(mmol／I。)：NaCI137、KCI
5．4、MgCl21．0、CaCI2 1．8、HEPES5、葡萄糖10，用
5mol／LNaOH将pH值调至7．4；记录动作电位的
电极内液(mmol／L)：KCI140、MgCI22、EGTA2、
CaClz1．8、HEPES5、NazATP10，用1tool／I。KOH
将pH值调至7．2。记录单通道钠电流所用的细胞
外液(mmol／L)：KCl140、NaCI4．s、MgCl。·
6H200．5、EGTA1．0、葡萄糖5．5、HEPES5．0，用
KOH将pH值调至7．3。记录单通道钠电流所用的
电极液(mmol／L)：NaCl140．0、KCI4．0、MgCIz·
6H201．o、CaCl20．1、葡萄糖5．5，用NaOH将pH
值调至7．3。
2．4 数据的采集和统计处理：在实验中应用
Pclamp6．01程序记录出原始的单通道钠电流图形，
应用Fetchan和Pstat程序分析单通道钠电流记录
中得到的64条原始曲线，用单指数曲线拟和统计
瓣嚣鬻糍愁篡薯饕曼煮莲骥铡怒，慧紫药槲。脑血管系坑的影响及其机制研究作者筒介2襞1：宅譬器?磊j巍j吉营烹嚣煮毫垒：景志喾ij§篓’毒摹鉴事药物对心脑血管系坑的影响及其机制研究
万方数据
苁蓉总苷对血管性痴呆大鼠学习记忆的影响及机制研究
作者： 皋聪， 王传社， 巫冠中， 胡梅， 屠鹏飞
作者单位： 皋聪,巫冠中,胡梅(中国药科大学,药理教研室,江苏,南京,210009)， 王传社(北京大学,中
医药现代研究中心,北京,100083;北京大学,基础医学院,北京,100083)， 屠鹏飞(北京大学
,中医药现代研究中心,北京,100083;北京大学,药学院,北京,100083)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(12)
被引用次数： 7次
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