全 文 ：HPLC法测定蒙药那如-8中胡椒碱的含量
贾福群 1 ,白 炜 2
( 1. 内蒙古医学院第一附属医院 ,内蒙古 呼和浩特 010050; 2. 内蒙古药品检验所 ,内蒙古 呼和浩特 012000)
蒙药那如 -8为常用的蒙成药 ,是由诃子、草乌、
荜茇等 8味药组成的复方制剂 ,具祛寒、消“粘”等功
效 ,临床用于胃寒食积、消化不良、肾虚、肾寒、腰腿
酸痛等。方中荜茇具有温中散寒 ,下气止痛等作用。
本实验采用 HPLC法测定方中主药荜茇的主要成
分胡椒碱的含量 ,具有操作简便 ,分析快速 ,灵敏度
高 ,准确性好等优点。
1 试药与仪器
那如 -8由库伦蒙药厂提供 ;无水乙醇、甲醇均
为分析纯 ,水为高纯水 ;胡椒碱对照品由中国药品生
物制品检定所提供 (批号 0775-9702)。
Beckman 332型液相色谱仪 , 110型双泵和高
压动态溶剂混合器 , 163型可变紫外检测器 , JC-3型
超声处理仪 (通化市超声设备厂 )。
2 方法与结果
2. 1 色谱条件: Ul traspseretm ODS色谱柱 ( 250
mm× 4. 6 mm );流动相: 甲醇 -水 ( 72∶ 28) ;流速:
1. 1 mL /min;检测波长: 343 nm;柱温: 28℃。
2. 2 标准曲线的制备: 精密称取胡椒碱对照品
18. 9 mg于 25 mL量瓶中 ,用无水乙醇溶解并稀释
至刻度 ,摇匀。精密量取 2. 0 mL于 25 mL量瓶中 ,
加入无水乙醇稀释至刻度 ,摇匀 ,作为对照品溶液。
分别精密量取对照品溶液 1, 3, 5, 7, 9μL进样。以峰
面积为纵坐标 ,浓度为横坐标进行线性回归 ,回归方
程为 A= 122 457. 1C- 493. 6, r= 0. 999 9。 结果表
明对照品在 0. 006～ 0. 54μg与峰面积呈良好的线
性关系。
2. 3 精密度试验: 精密吸取对照品溶液 5μL,重复
进样 6次 ,胡椒碱峰面积 RSD值为 1. 03%。
2. 4 稳定性试验: 精密吸取对照品溶液 5μL,每隔
1 h进样 1次 ,结果 4 h内峰面积基本保持不变。胡
椒碱峰面积的 RSD为 0. 89% (n= 5)。
2. 5 加样回收试验:精密称取样品约 0. 8 g于 50
m L量瓶中 ,共取 5份 ,分别加入对照品溶液 2. 0
m L,加无水乙醇 20 mL,超声处理 10 min,放冷 ,再
加无水乙醇稀释至刻度 ,摇匀 ,滤过 ,取续滤液进样。
读取峰面积 ,以外标法计算 ,结果平均回收率为
98. 29% , RSD为 1. 69% (n= 5)。
2. 6 样品测定:取本品粉末 1. 2 g ,精密称定 ,置 50
mL量瓶中 ,加无水乙醇适量 ,超声 10 min,冷却至
室温 ,用无水乙醇稀释至刻度 ,摇匀 ,微孔滤膜滤过 ,
取续滤液进样 ,色谱图见图 1,按外标法计算胡椒碱
含量 ,结果见表 1。
图 1 胡椒碱对照品 (A)、那如-8样品 (B)和
空白对照 (C)的 HPLC图谱
Fig. 1 HPLC chromatograms of piperine reference sub-
stance (A) , Naru-8 sample (B) and blank (C)
表 1 那如-8中胡椒碱含量测定结果 (n= 5)
Table 1 Results of piper ine in Naru-8 (n= 5)
批 号 胡椒碱 / ( mg· g- 1) R SD /%
950110 3. 25 1. 61
960201 3. 65 1. 35
950322 3. 53 1. 98
3 讨论
本品为多组份复方制剂 ,加入内标对二甲氨基
苯甲醛 [2 ] ,受杂质峰干扰 ,故直接采用外标法计算。
曾比较超声时间对样品含量的影响 ,试验证明超声
10 min处理 ,可充分溶出被测成分 ,且较振摇省时
省力。
文献报道胡椒碱含量测定方法有薄层色谱 -紫
外分光法 [1 ]和薄层扫描法 [2 ]。 本方法具有简便、快
速、重现性好等优点 ,可作为多组份制剂中胡椒碱含
量测定的一种常规检验方法。
References:
[1 ] Li H S, Jia Z C, Zh ang Z M , et a l. Determination of piperine
in Piper lon gum b y HPLC [ J ]. Chin J Pharm Anal (药物分
析杂志 ) , 1986, 6( 6): 346.
[2 ] Wang B Q. The Research of Qual ity Stan dard and Standard
Mater ial of Chinese Trad itional Patent Medicine (中成药质量
标准与标准物质研究 ) [M ] . Bei jing: China Medico-Pharma-
ceutical Sciences& Technolog y Publi shing House, 1994.
·527·中草药 Chinese T raditional and Herbal Drug s 第 34卷第 6期 2003年 6月
收稿日期: 2002-11-08