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Effects of GANDENING TABLET on immunologic function in mice

肝得宁片对小鼠免疫功能的影响



全 文 :物有不同程度地减少体外 AGEs 产物的生成, 其中
以五味子、山茱萸作用较明显,其他 3 味中药川芎、
生地、太子参则无明显影响。在我们以往的实验中,
五味子、山茱萸对体外早期糖化产物(果糖胺)的生
成也有较明显的抑制作用。因此可以认为五味子、山
茱萸对非酶糖化的早期和后期均有抑制作用,而山
楂、葛根则可能影响了非酶糖化后期产物的形成。
实验中也观察到, 在同一浓度下五味子、山茱
萸、山楂、葛根对 AGEs 的抑制,以荧光产物的抑制
作用较强, 这可能是因为 AGEs 成分复杂,有的产
生荧光反应而无棕色现象等, 但两者的总趋势是一
致的,即随着中药浓度的增加, AGEs 的抑制作用增
强,呈正相关。
据现代研究山茱萸有降血糖作用 [ 7, 8]。结合本研
究观察到的结果,它还具有抑制葡萄糖与蛋白质的
非酶糖化的反应,因此为山茱萸在临床治疗糖尿病
及其慢性并发症提供了一定的参考价值。
参考文献:
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肝得宁片对小鼠免疫功能的影响
赵艳玲,肖小河,袁海龙, 张新全,贺承山
(解放军 302 医院 药学部, 北京 100039)
摘 要: 目的 观察肝得宁片对小鼠免疫功能的影响。方法 分别采用不同的小鼠免疫模型,观察肝得宁片对小鼠
免疫性肝损伤、小鼠单核巨噬细胞吞噬功能、溶血素抗体生成、小鼠淋巴细胞增殖反应的影响。结果 肝得宁片对
BCG+ LPS 所致免疫性肝损伤小鼠血清转氨酸的升高有明显的抑制作用;可激活小鼠网状内皮系统;增加小鼠血
清溶血素含量; 提高淋巴细胞的转化程度。结论 肝得宁片具有一定的机体免疫能力增强作用。
关键词: 肝得宁片;免疫功能; 血清溶血素;吞噬功能
中图分类号: R286. 95   文献标识码: A   文章编号: 0253 2670( 2002) 02 0147 03
Effects of GANDENING TABLET
*
on immunologic function in mice
ZHAO Yan-ling , XIAO Xiao-he, YU AN Hai-long , ZHANG Xin-quan, HE Cheng-shan
( Depar tment of Pharm acy , 302 Hospital of PLA , Beijing 100039, China)
Key words : GANDENING T ABLET ; immunolo gic funct ion; ser um hemolysin; phagocg t ic function
*
GANDENING T ABLET is a Chinese her bal preparat ion w ith Fructus S chisandrae Chinensis and
Fructus L igust ri L ucidi, etc . . It has the effect on relieving the depressed liver, soo thing the l iv er and
regulat ing the circulat ion of qi .
  肝得宁片是根据中医药理论及多年临床经验总
结而成的中药复方制剂, 由五味子、女贞子、灵芝孢
子粉等组成。主要功能为疏肝理气, 活血清热, 具有
保肝降酶,增强机体免疫, 抗肝炎病毒等功效,临床
用于治疗慢性肝炎。本研究以小鼠为实验对象, 从不
同角度研究了肝得宁片对小鼠免疫功能的影响。
1 实验材料
1. 1 药品及试剂: 肝得宁片药粉由解放军 302 医
院药学部提供, 每克药粉含 3. 9 g 生药, 批号:
000525。护肝片,黑龙江省五常葵花药业有限公司出
·147·中草药 Chinese T raditional and Herbal Drug s 2002 年第 33卷第 2期
 收稿日期: 2001-06-11作者简介:赵艳玲( 1965-) ,女,河北人,副主任药师,硕士。1996-09~1999-07就读于哈尔滨医科大学药理专业,获医学硕士学位。现从事中药新药药理作用及其机制的研究。
品,批号: 000106。盐酸左旋咪唑,湖南洞庭制药厂出
品,批号: 971005。卡介苗( BCG) ,北京生物制品研究
所生产,批号: 001030; 脂多糖( LPS) , Sigma 公司产
品, 批号: L2688。植物血凝素 ( PHA) , Sigma 公司
产品。
1. 2 动物:昆明种小鼠, 体重 18~22 g, 雌雄各半,
由北京医科大学动物研究中心提供,动物合格证号
为医动字第 01-3056 号。
2 实验方法与结果
2. 1 肝得宁片对免疫性肝损伤的影响 [ 1] :健康小鼠
60 只,随机分为 6 组: 正常对照组、模型组、护肝片
组 ( 0. 8 g/ kg )、肝得宁片 ( 8, 4, 2 g/ kg ) 3 个剂量
组,每组 10只,小鼠 ig 给药, 2次/日, 共 10 d。给药
前除正常对照组外,每鼠尾 iv 0. 25% BCG 2. 5 mg,
10 d 后每鼠再尾 iv LPS 2. 5 g 攻击, 12 h 后眼球
后静脉丛取血测血清 ALT、AST ,结果见表 1。肝得
宁片对 BCG+ LPS 所致免疫性肝损伤小鼠血清转
氨酶的升高有明显的抑制作用, 与模型组相比有显
著性差异。
表 1 肝得宁片对小鼠免疫性肝损伤的影响( x±s)
组 别 剂 量
( g/ kg )
动物数
(只)
AL T
( m ol·s- 1/ L )
AST
( mol·s - 1/ L)
对照组 - 10 181. 20±11. 70 412. 00±16. 36
模型组 - 10 764. 40±33. 74# # 1 021. 60±29. 35# #
护肝片 0. 8 10 424. 40±33. 29* 716. 80±28. 88* *
肝得宁 8  10 392. 80±24. 47* * 657. 20±31. 07* *
4  10 478. 00±28. 99* 781. 60±29. 38*
2  10 542. 00±23. 52* 796. 40±28. 22*
  与模型组相比: * P < 0. 05 * * P < 0. 01
与对照组相比: # # P < 0. 01
2. 2 对小鼠单核巨噬细胞吞噬功能的影响 [ 2] : 小鼠
碳粒廓清法。小鼠随机分为 5组:正常对照组、阳性
对照药左旋米唑、肝得宁片 ( 8, 4, 2 g / kg) 3 个剂量
组,每组 10 只, ig 给药, 每只每次 0. 5 mL, 每天 2
次,对照组同法给蒸馏水,连续一周。末次给药后称
取体重, 尾 iv 印度墨汁稀释液 0. 1 mL/ 10 g ,注射
后 1, 5 m in用玻璃毛细吸管分别从眼眶后静脉丛取
血 20 L, 溶于 3 mL 0. 1% Na2CO3溶液中摇匀,置
分光光度计在波长 650 nm 下比色, 测定吸光度值
( A )。最后将小鼠颈椎脱臼处死, 分别称取肝、脾重
量,计算廓清指数 K 或校正廓清指数 , 进行组间 t
测验(表 2)。结果可见, 肝得宁片高、中剂量组 K 值
比对照组有显著性提高,提示肝得宁对网状内皮系
统有一定的激活作用。
2. 3 肝得宁对小鼠溶血素抗体生成的影响 [ 3] : 取健
康小鼠,按体重随机分为 7组:正常对照组、环磷酰
表 2 肝得宁片对小鼠单核巨噬细胞
吞噬功能的影响( x±s)
组 别 剂 量
( g /k g)
动物数
(只) K 
对照组 - 10 0. 036±0. 016 6. 43±1. 53
肝得宁 8   10 0. 053±0. 017* 7. 61±0. 85*
4   10 0. 053±0. 019* 7. 17±0. 79
2   10 0. 045±0. 010 6. 73±0. 91
左旋咪唑 0. 04 10 0. 064±0. 022* * 7. 77±0. 90*
  与对照组相比: * P< 0. 05 * * P < 0. 01
胺模型对照组、阳性对照药左旋咪唑组、护肝片组、
肝得宁片 ( 8, 4, 2 g/ kg ) 3 个剂量组, 每组 10只。每
日 ig 给药 2 次(正常对照组 ig 相同体积的蒸馏
水) ,连续 9 d,药后第 5天每鼠 ip 3∶5 稀释的绵羊
红细胞 ( SRBC) 悬液 0. 2 mL 进行免疫, 1 h 后, 除
正常对照组外,各组小鼠 ip 环磷酰胺 15 mg / kg 体
重 ( 0. 2 mL/ 20 g) ,次日再以同剂量注射 1 次。免疫
4 d 后,摘除小鼠眼球取血 1 mL, 分离血清,用生理
盐水将血清稀释 500 倍, 取 1 mL 稀释血清加入
10% SRBC 0. 5 mL,置冰浴中, 每管加入 1 mL 以
生理盐水 1∶10 稀释过的豚鼠血清, 随即移至 37
℃ 恒温水浴中,保温 10 m in, 即放入冰浴以终止反
应, 2 000 r/ m in离心 10 m in, 取上清 1 mL,加 3 mL
都氏试剂混匀, 放置 10 min 后, 用分光光度计在
540 nm 下测定各样品的吸光度( A )值,并计算半数
溶血值 ( HC50) , 结果见表 3。
HC50=
样品的 A 值羊红细胞半数溶血时 A 值×稀释倍数
肝得宁片能明显增加小鼠血清溶血素含量, 对
环磷酰胺所致免疫抑制有较强的拮抗作用。
表 3 肝得宁片对小鼠溶血素抗体生成的影响
组 别 剂 量
( g / kg)
动物数
(只)
HC50
( x±s)
对照组 - 10 122. 76±23. 45
模型组 - 10 25. 21±14. 26# #
护肝片 0. 8 10 44. 23±24. 78
肝得宁 8 10 83. 44±26. 68* *
4 10 68. 86±21. 04* *
2 10 44. 34±20. 41*
左旋咪唑 0. 04 10 74. 14±20. 41* *
  与模型对照组比较: * P < 0. 05 * * P< 0. 01
  与对照组相比: # # P < 0. 01
2. 4 肝得宁对小鼠淋巴细胞增殖反应的影响 [ 2] : 取
雄性小鼠, 随机分成 6 组: 对照组、护肝片 ( 0. 8 g /
kg ) 组、左旋咪唑组、肝得宁片 ( 8, 4, 2 g / kg ) 3 个
剂量组,每组 10只。每鼠每天 im PHA 8 mg / kg, 共
3 d,给药组在给 PHA 当天开始 ig 等体积不等浓度
的不同药液, 正常对照组 ig 相同体积的蒸馏水, 每
·148· 中草药 Chinese T raditional and Herbal Drug s 2002 年第 33卷第 2期
天给药 2 次,连续 9 d,第 9 天剪尾, 取血推片,瑞氏
染色,油镜下计数 100 个淋巴细胞中淋巴母细胞及
过渡态细胞数,计算它们分别占的百分率, 结果见表
4。肝得宁片大、中剂量组可使小鼠对 PHA 刺激的
转化反应增强,淋巴母细胞百分率与对照组比有显
著提高,说明肝得宁片能提高淋巴细胞的转化程度,
提高 T 细胞免疫和细胞免疫功能。
表 4 肝得宁片对小鼠淋巴细胞转化反应的影响( x±s)
组 别 剂 量
( g/ kg)
动物数
(只)
淋巴母细胞
( % )
过渡态细胞
( % )
对照组 - 10 15. 9±7. 8 28. 1±8. 2
护肝片 0. 8 10 25. 4±8. 5* 34. 2±8. 3
肝得宁 8 10 26. 3±8. 0* * 35. 7±7. 6*
4 10 23. 1±6. 9* 32. 9±8. 0
2 10 22. 0±5. 2 33. 3±6. 4
左旋咪唑 0. 04 10 31. 7±6. 9* * 36. 3±7. 9*
  与模型对照组比较: * P < 0. 05 * * P < 0. 01
3 讨论
乙型肝炎的临床表现与机体免疫功能状态密切
相关。乙肝易导致慢性迁延性过程,一个重要的原因
是机体免疫功能不足。祖国医学在肝炎的中药治疗
过程中,充分发挥其保肝降酶、抗病毒作用的同时,
非常注意提高机体的抗病能力, 减轻致病因素对机
体的损伤。
本研究采用不同的免疫功能低下动物模型来评
价肝得宁片对免疫功能的影响, 旨在通过胃肠道吸
收后观察其对免疫系统的作用,了解肝得宁片对乙
型肝炎的疗效与其增强免疫功能的相互关系, 从而
探讨肝得宁片在治疗乙型肝炎中的免疫药理效应。
试验结果表明, 肝得宁片可使 BCG+ LPS 诱导升高
的小鼠血清转氨酶明显降低, 表明肝得宁对小鼠免
疫性肝损伤有明显的保护作用。在碳粒廓清法实验
中, 肝得宁片可提高廓清率 K 值,提高小鼠单核吞
噬细胞的吞噬指数和吞噬活性,说明肝得宁片对网
状内皮系统吞噬功能具有明显的激活、增强作用。提
示肝得宁片对小鼠非特异性免疫功能具有增强作
用。并且, 肝得宁片可明显改善环磷酰胺所致的小鼠
血清溶血素含量降低,提高小鼠半数溶血素含量。可
使小鼠对 PHA 刺激的转化反应增强, 提高淋巴细
胞的转化率。提示肝得宁片亦可提高小鼠特异性体
液免疫和细胞免疫功能。
本实验通过观察肝得宁片对多项免疫指标的影
响, 证明肝得宁片可增强小鼠的体液免疫和细胞免
疫, 提高机体免疫机能, 并呈一定的剂量依赖关系,
提示肝得宁片具有较好的免疫功能增强作用。
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百草降糖片降血糖作用机制研究
茅彩萍,徐乃玉, 顾振纶
(苏州大学医学院 药学系药理教研室、苏州中药研究所, 江苏 苏州 215007)
摘 要: 目的 探讨百草降糖片的降血糖作用机制。方法 观察了百草降糖片对正常小鼠血糖、血清胰岛素、胰高
血糖素、肝糖原、肌糖原的影响, 并且观察了百草降糖片对糖尿病大鼠的血清胰岛素、C 肽、超氧化物歧化酶
( SOD )、过氧化脂质( LPO )的影响。结果 百草降糖片在降糖的同时能刺激胰岛素的分泌,降低胰高血糖素的含
量, 而且能增加肝糖原、肌糖原的含量; 对四氧嘧啶糖尿病大鼠在降糖的同时也能增加胰岛素、C 肽水平, 而且能显
著增加血清 SOD 的活性, 降低 LPO 含量。结论 百草降糖片的降血糖作用可能是既通过影响糖代谢,又通过改善
胰岛功能, 促进胰岛素分泌来实现的。
关键词: 百草降糖片;作用机制; 血糖
中图分类号: R286. 72   文献标识码: A   文章编号: 0253 2670( 2002) 02 0149 03
Studies on hypoglycemic mechanism of BAICAO JIANGTANG TABLET
*
MAO Cai-ping , XU Nai-yu, GU Zhen-lun
( Depar tment o f Pharm acy , Medical Co llege o f Suzhou U niver sity , Suzhou Institute of T CM , Suzhou Jiangsu 215007, China )
·149·中草药 Chinese T raditional and Herbal Drug s 2002 年第 33卷第 2期
 收稿日期: 2001-08-11基金项目:江苏中医药管理局资助项目,编号 9948作者简介:茅彩萍( 1968-) ,女,江苏苏州人,现苏州大学攻读心血管内科学博士学位,讲师。研究方向:中药药理学及生药学。主持省级课题
2 项,发表科研论文 10篇。T el : 0512-5125270 E-mail : s zzys@ publicl. sz . js. cn.