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Analysis on content of polysaccharides of Semen Plantaginis

车前子多糖含量的分析



全 文 :车前子多糖含量的分析
王 东 ,林 力 ,袁昌鲁 ,徐 敏 ,王璐佳
(辽宁中医学院 中药系 ,辽宁 沈阳  110032)
摘 要: 目的 测定并比较不同产地 3种车前子多糖含量。方法 分光光度法。结果 大车前子多糖含量高于车前
子及平车前子。 结论 不同种、不同产地车前子中多糖含量差异明显。
关键词: 车前子 ;多糖 ;分光光度
中图分类号: R286. 02   文献标识码: A   文章编号: 0253 2670( 2002) 10 0896 02
Analysis on content of polysaccharides of Semen P lantaginis
WANG Dong, LIN Li , YU AN Chang-lu, XU Min, W ANG Lu-jia
( Depa rtment o f Chinese Ma teria Medica, Liaoning Co lleg e o f TCM , Shenyang 110032, China )
Abstract: Object  To determine and compare the content o f poly saccha rides in th ree species o f Semen
Plantaginis f rom dif ferent places of o rigin. Methods  Spect ropho tometry w as used. Results  The content
o f polysaccha rides in the seed of Plantago major L. w as higher than tho se in the seed o f P. asiatica L. and
P . depressa Willd. Conclusion  The content o f po lysaccharides in Semen Plantaginis of di fferent species
o r o rigins a re obviously dif ferent.
Key words: Semen Plantaginis; poly saccha rides; spect ropho tometry
  车前子是我国传统中药之一 ,具有清热利尿、渗
湿通淋、明目祛痰的功能。现代研究证明其具有致
泻、护肝、降低血清胆固醇等药理作用 [1 ]。初步实验
表明 ,车前子中多糖即为缓泻作用的主要有效成
分 [2 ]。本研究采用苯酚-硫酸法 [3 ]测定并比较国内不
同产地 3种 37个样品的多糖含量 ,为车前子药材的
品质评价提供了依据。
1 仪器与试药
7230G型分光光度计 (上海仪器三厂 )。车前子
药材经本院中药系郑太坤教授鉴定分别为车前科植
物车前 Plantago asiatica L.、平车前 P . depressa
Willd.和大车前 P . major L.干燥成熟种子。试剂均
为分析纯。
2 实验部分
2. 1 车前子多糖的提取与精制:取已干燥的车前子
适量 ,粉碎后 ,称取 50 g置索氏提取器中 ,加入石油
醚 ( 60℃~ 90℃ ) 250 m L,回流提取 1 h脱脂。药渣
挥干溶剂后加 80%乙醇 250 mL浸泡过夜后 ,回流
提取 2次 ,每次 2 h,过滤 ,药渣加水 400 mL, 80℃
搅拌提取 3次 ,每次 2 h ,离心 ,合并上清液 ,减压浓
缩至 100 mL,用 Sevag法去除蛋白质后 ,水溶液中
加 4倍量 95%乙醇 ,静置过夜 ,离心 ,沉淀以无水乙
醇、丙酮、乙醚依次洗涤多次 , 60℃减压烘干至恒
重 ,即得车前子多糖。
2. 2 标准曲线的制备
2. 2. 1  5%苯酚溶液的制备: 取苯酚 100 g,加入
0. 1 g铝片和 0. 05 g碳酸氢钠 ,在 180℃~ 182℃
常压蒸馏 ,空气冷凝 ,得白色针状苯酚结晶。 称取重
蒸馏苯酚 12. 5 g ,置 250 mL容量瓶中 ,用水稀释至
刻度 ,摇匀 ,避光保存。
2. 2. 2 葡萄糖标准溶液的制备:精密称取 105℃干
燥至恒重的葡萄糖标准品 11. 7 mg,置 100 mL容量
瓶中 ,用水稀释至刻度 ,摇匀。
2. 2. 3 标准曲线的绘制:精密吸取葡萄糖标准溶液
0. 25, 0. 50, 0. 75, 1. 00, 1. 25 mL,置 10 mL刻度试
管中 ,分别加水至 1. 5 mL,另取 1. 5 mL蒸馏水作
空白对照。每管加入 5%苯酚溶液 2. 0 m L,混匀 ,加
浓硫酸 6. 5m L,摇匀后放置 10 min,置 25℃水浴恒
温 15 min,取出放置至室温 ,加水至刻度 ,混匀 ,在
490 nm处测定吸光度值。得标准曲线回归方程:
A= 61. 23C- 0. 001 5, r= 0. 999 95。
2. 3 换算因子的测定:精密称取 60℃干燥至恒重
·896· 中草药  Chinese Traditiona l and He rbal Drug s  2002年第 33卷第 10期
收稿日期: 2001-12-24基金项目:辽宁省教育厅高等学校科学研究资助项目 ( 20213309)作者简介:王东 ( 1967-) ,男 ,辽宁葫芦岛人 ,副教授 ,博士 ,现为江苏扬子江药业集团公司博士后 ,主要从事中药新品开发。
Tel: ( 024) 86252092( H) , ( 0523) 6961998-6358( O)  E-mail: w d1967@ sohu. com
的车前子多糖 12. 37 mg ,置 100 mL容量瓶中 ,用水
稀释至刻度 ,摇匀。精密吸取此液 1. 0 mL,按标准曲
线项下方法操作 ,测定吸光度 ,从回归方程中求出多
糖供试液中葡萄糖浓度 ,按下式计算换算因子 f ,测
得 f = 1. 83。
f = W /(C×D ) ,
式中 W 为多糖的质量 ( mg ) ; C为多糖稀释液中葡萄糖
浓度 ( mg /mL ); D为多糖的稀释因素。
2. 4 样品溶液的制备:精密称取各车前子样品粗粉
0. 2 g,加入 100 mL 80%乙醇 ,回流提取 2次 ,每次
1 h。过滤 ,挥干溶剂后 ,药渣用 20 mL水在沸水浴中
搅拌提取 2次 ,每次 1 h。 趁热过滤 ,药渣用热水洗
涤 ,合并滤液 ,加 95%乙醇 ,至含醇量 80% ,沉淀 2
次 ,离心 ,将沉淀用水溶解 ,置 50 mL容量瓶中 ,用
水定容至刻度 ,摇匀 ,备用。
2. 5 稳定性试验: 取样品溶液 ,照样品测定方法操
作 ,每隔 1 h测定吸光度值 ,连续 24 h,结果吸光度
值基本无变化。
2. 6 加样回收率测定:称取车前子粗粉 0. 1 g ,精密
加入车前子多糖约 7 mg ,按样品液制备与含量测定
方 法操作。 计算得回收率为 98. 15% , RSD 为
1. 31% (n= 5,已乘换算因子 )。
2. 7 样品含量的测定:精密吸取样品溶液 1. 0 mL,
置 10 mL刻度试管中 ,照标准曲线下方法操作 ,测
定供试液中葡萄糖含量 ,按下式计算样品中多糖含
量 ,结果见表 1。
  多糖含量 (% )= C× D× f /W× 100
  式中 C为供试液中葡萄糖浓度 ( mg /m L) ; D为供试液
的稀释因素 ; f为换算因子 ;W为供试品质量 ( mg )。
3 讨论
  苯酚 -硫酸比色法测定多糖含量 ,方法简便可
靠 ,稳定性良好。从测定结果可以看出 ,不同种、不同
产地车前子多糖含量差异显著。总的来看 ,大车前子
中多糖含量高于车前子和平车前子。 本研究结果对
车前子品质评价和进一步开发利用其多糖成分提供
表 1 车前子中多糖含量测定结果
种 名 产地或来源 多糖含量 (% )
车前子 云南昆明 3. 08
山东荷泽 2. 27
辽宁小市 1. 98
内蒙古通辽 1. 76
黑龙江尚志市一面坡 4. 60
辽宁本溪碱厂 2. 98
江苏南京 3. 85
河北赤城 1. 91
山西壶关县镇南元村 1. 19
河北赤城县三道川 2. 19
辽宁沈阳龙康大药房 2. 10
辽宁大连 3. 25
河南林洲市南洼村 2. 74
广西柳州药材店 3. 30
沈阳苏家屯 0. 31
河北安国 4. 01
中国中医研究院 2. 83
大车前子 沈阳市宁山路药房 5. 96
辽宁省国药堂七分店 6. 01
内蒙古赤峰药材公司 3. 08
济南药材站 5. 83
山东德州 6. 49
河南郑州 2. 95
辽宁北票 3. 36
河南郑州药材公司 2. 84
河北安国 6. 27
中国中医研究院 5. 35
沈阳北陵 4. 82
平车前子 北京怀柔 2. 95
内蒙古通辽双泡子镇 2. 52
辽宁兴城 1. 82
吉林龙台市龙家堡镇 3. 78
沈阳北陵 3. 79
辽宁义县 1. 96
河北赤城 3. 67
哈尔滨市太阳岛 3. 14
辽宁绥中 2. 76
了一定的依据。
参考文献:
[1 ] 胡润生 .车前子壳制剂 [ J]. 中成药研究 , 1981, ( 11): 15.
[2 ] 郑太坤 ,王 华 ,王秀荣 . 中药车前子的研究概况 [ J ]. 辽宁中
医杂志 , 1985, 9( 8): 41-42.
[3 ] 屠鹏飞 ,徐国钧 ,徐珞珊 ,等 .沙参类的研究Ⅲ . 多糖的含量测
定 [ J] .中草药 , 1992, 23( 7): 355-356.
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·897·中草药  Chinese Traditiona l and He rbal Drug s  2002年第 33卷第 10期