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五倍子对140株肠球菌的抑菌效果观察



全 文 :生大量的 TSH (促甲状腺激素 ,简称 TSH) ,使甲状
腺肥大增生。 实验结果表明丙基硫氧嘧啶所造成的
甲状腺肿模型大鼠血清 T3 , T4水平与正常组比较有
所降低 ,但经统计学处理无显著性差异。而模型大鼠
血清 TM , TG水平明显高于正常组 ,经统计学处理
有极显著性差异。 临床上某些甲状腺疾病如桥本氏
甲状腺炎、慢性侵袭性纤维性甲状腺炎、 Graves病
(毒性弥漫性甲状腺肿 ) 及部分甲减等多伴有抗体
增高 [ 3]。 TM是一个补体结合性抗体 ,可与甲状腺作
用诱导产生抗体依赖性细胞介导细胞毒而破坏甲状
腺组织。 TG是一个非补体结合性抗体 ,其检测阳性
率虽不高但自体免疫性甲状腺炎也有患者 TG阳
性而 TM阴性者。 海藻、甘草配伍应用后能使升高
的 TM , TG降低 ,从而减轻抗体对甲状腺细胞的破
坏 ,这可能是中医临床上某些方剂中运用二者配伍
治疗一些甲状腺疑难症的物质基础。而西医常用甲
状腺制剂治疗这些疾病 ,从不良反应和负反馈抑制
TSH角度来看远不如两中药的配伍应用。
  海藻甘草属中药十八反配伍禁忌范畴 ,但历代
医家的一些名方中常可见二者合用现象 ,且每显佳
效 ,未见不良反应。 通过上述实验研究 ,说明二者配
伍用于某些甲状腺疾病是有一定道理的。
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五倍子对 140株肠球菌的抑菌效果观察
李仲兴 1 ,张立志 2 ,王秀华 1 ,时东彦 1 ,张明明 2
( 1. 河北医科大学第二医院 ,河北 石家庄  050000; 2. 河北省人民医院 ,河北 石家庄  050071)
  中药五倍子具有收敛、止血等作用 ,对肺炎球
菌、链球菌、伤寒杆菌、绿脓杆菌、猪霍乱沙门菌均有
抑制作用 [1 ]。 然而亦有报道五倍子对金葡菌无抑制
作用 [ 2 ] ,周邦靖等报道五倍子对淋球菌及小肠结肠
炎耶氏菌抗菌力强 ,其抑菌环直径≥ 27 mm[ 3, 4]。此
外 ,周邦靖等还报道五倍子对肺炎克雷伯菌的 M IC
为 1∶ 10[5 ]。以上报道多为定性实验 ,且使用菌株大
多为 1株。经初步检测 ,五倍子对金葡菌、表皮葡萄
球菌的抑菌效果均较好 ,我们曾进行五倍子等中药
对 28株肠球菌的最低抑菌浓度测定 ,因菌株太少 ,
又未进行种的区分 ,但五倍子水煎液对肠球菌的抑
菌效果较好 [6 ] ,为了弄清五倍子对粪肠球菌、屎肠球
菌和其他肠球菌的抑菌作用 ,本实验应用中药定量
抗菌实验方法 ,并采用了大批量菌株进行抑菌实验 ,
结果表明五倍子对肠球菌有很好的抑菌效果。
1 材料与方法
1. 1 仪器、培养基及药材: 微量多点接种仪 ,北京医
科大学昆仑药物发展研究所生产。 Mueller-Hinton
琼脂 (美国 BD公司生产 , BBL,简称 M-H琼脂 )。
五倍子 (购自河北省药材公司 ) ,先将五倍子按常法
制成煎液 [7, 8 ] ,即 100 g五倍子 ,文火煎后制成 200
mL煎液 (为 50% 五倍子煎液 )备用。
1. 2 菌种:从我院临床病人的血液、尿液、脓汁、痰
液等标本分离的菌株共 140株 ,其中粪肠球菌 93
株、屎肠球菌 40株、其他肠球菌 7株。
1. 3 方法: 采用琼脂稀释法 ,用 M-H琼脂对五倍
子进行定量抗菌实验 [9, 10 ]。
1. 3. 1 药液稀释: 排列无菌试管 10只 ,于 2~ 10
只管中加无菌蒸馏水 10 mL,取五倍子水煎液 20
mL,于第 1管加入 10 mL,第 2管加入 10 mL,于
第 2管混合后取出 10 mL,加入第 3管 ,再混合后
取 10 m L放入第 4管 ,如此连续稀释至第 9管取出
10 mL弃掉。第 10管只有无菌蒸馏水作对照。这样
1~ 9管只含有不同浓度药液各 10 mL。
1. 3. 2 含药平板制备: 无菌操作将已溶化的无菌
M-H琼脂 900 mL,分装于 10瓶 ,每瓶 90 mL,将第
1管含 10 m L五倍子水煎液放入含 90 mL培养基
的瓶中 ,混合后倾注 4个平板 ,每个平板有 25 mL
·56· 中草药  Chinese T raditional and Herba l Drugs 第 34卷第 1期  2003年 1月
收稿日期: 2002-03-06基金项目:河北省科学技术厅计划内资助项目 ( 01276-2111D)作者简介:李仲兴 ( 1938— ) ,男 ,河北玉田人 ,教授 , 1958年毕业于张家口医专检验专业 ,一直从事临床微生物检验工作 ,研究方向为“机会致病菌生理、生化特性研究 ;机会致病菌对抗生素、中草药敏感及耐药谱型研究”。在国内外发表论文 80余篇 ,著有《临床细菌学》及《诊断细菌学》 ,获省部级科技进步奖 8项。
含药琼脂 ,第 2管以后的平板制备同第 1管 ,凝固
后备用。这样第 1组的琼脂平板实际含五倍子 5%
( 1∶ 20) ,第二组为 1∶ 40,第三组为 1∶ 80,依此
类推。
含药培养基的药物浓度计算: 将一定量 ( 50或
100 mL) 、一定比例 ( 1∶ 2或 1∶ 4)的生药水煎液
于 37℃ 温箱中烘干 ,称重 ,求出每毫升水煎液的实
际质量 ,就可算出每毫升培养基中水煎药液干重。如
每 100 mL五倍子煎液干重为 13 400 mg,第 1组每
100 mL含药培养基中有煎液 10 mL,那么每毫升培
养基含煎液干重则等于:
13 400
100
× 10
100
= 134× 1
100
= 13. 4 mg
所以第 1组含药培养基实际含煎剂干重为
13. 4 mg /mL,因倍量稀释 ,故第 2组含药培养基为
第 1组数被 2除即可。即 1∶ 2相当于 13. 4 mg /
m L, 1∶ 40相当于 6. 7 mg /mL, 1∶ 80相当于 3. 35
mg /m L……。
1. 3. 3 菌液制备:将肠球菌等新鲜培养物 (菌落 )制
成菌液 ,浓度相当于 0. 5麦氏比浊管。
1. 3. 4 用多点接种仪分别吸取菌液 ,并将菌液点种
于含不同药物浓度的琼脂平板上。 于 35℃ 培养
18~ 24 h,观察最低抑菌浓度 ( M IC) ,并统计出
M IC50和 M IC90的药物浓度和累积抑菌百分率。
2 结果
  通过五倍子煎剂对 140株肠球菌的抑菌实验 ,
结果表明五倍子对粪肠球菌、屎肠球菌和其他肠球
菌的抑菌 效果均较好。 其 M IC90均为 0. 105
mg /mL, M IC50粪肠球菌为 0. 052 mg /mL、屎肠球
菌和其他肠球菌为 0. 105 mg /mL。结果见表 1,其
累积抑菌率见表 2。
表 1 五倍子对 140株肠球菌的抑菌情况  mg· mL- 1
Table 1  Inhibit ion of Galla Chinensis against
140 strains of Enterococcus  mg· mL- 1
菌种 菌株数 M IC范围 MIC50 MIC90 M IC众数
粪肠球菌 93 0. 052~ 0. 105 0. 052 0. 105 0. 105
屎肠球菌 40 0. 052~ 0. 105 0. 105 0. 105 0. 105
其他肠球菌 7 0. 052~ 0. 105 0. 105 0. 105 0. 105
表 2 五倍子对粪肠球菌、屎肠球菌和其他肠球菌的累积抑菌率
Table 2  Cumulat ive inh ibition rate of Galla Chinensis against E . faecalis , E . f aecium and otherEnterococcus
菌种  菌株数
MIC / ( mg· mL- 1 )
3. 35
1∶ 80
1. 675
1∶ 160
0. 838
1∶ 320
0. 419
1∶ 640
0. 209
1∶ 128 0
0. 105
1∶ 256 0
0. 052
1∶ 512 0
粪肠 生长菌株数    0    0    0    0    0    0    19. 0
球菌 93 抑制菌株数 93 93 93 93 93 93 74. 0
累积抑菌率 (% ) 100 100 100 100 100 100 52. 9
屎肠 生长菌株数 0 0 0 0 0 0 26
球菌 40 抑制菌株数 40 40 40 40 40 40 14
累积抑菌率 (% ) 100 100 100 100 100 100 35
其他 生长菌株数 0 0 0 0 0 0 5. 0
肠球菌 7 抑制菌株数 7 7 7 7 7 7 2. 0
累积抑菌率 (% ) 100 100 100 100 100 100 28. 6
3 讨论
  实验结果表明 ,五倍子对肠球菌 ,无论是粪肠球
菌还是屎肠球菌均有强大的抑菌力 ,对粪肠球菌的
抑菌作用更强。说明五倍子是极具有研究和开发价
值的抗感染中药。
关于五倍子的抗菌作用 ,以往报道很少 ,有人报
道对金葡菌有抑制作用 [1 ] ,然而亦有人报告 100%
五倍子水煎剂对金葡菌则无抑菌作用 [2 ] ,上述报道
对同一种中药同一种菌的抑菌作用 ,则有两种完全
相反的实验结果 ,这是由于所用菌种虽然相同 ,但其
对同一种中药的耐药程度不同 ,所以结果也有差异。
因此 ,中药抑菌实验也与抗生素一样 ,必须采用大批
量菌种 ,而且应以定量实验进行检测 ,其结果才有代
表性。
关于五倍子对肠球菌的体外抗菌作用 ,无论是
定性 ,还是定量 ,迄今尚无报道。肠球菌属 ( Enter-
coccus ) 细菌为革兰阳性球菌 ,是人类肠道的正常菌
群。 肠球菌有 15个种别 ,主要有粪肠球菌、屎肠球
菌、鸟肠球菌、鸡肠球菌、孤立肠球菌和坚韧肠球菌
等 ,除坚韧肠球菌以外 ,均曾从人体标本中分离出
来。所以曾认为肠球菌感染均为内源性的 ,但现在报
道说明 ,多重耐药肠球菌多从医务人员的手、皮肤以
及体温表等器械中分离到。此外 ,诱发肠球菌感染还
与使用多种抗生素 ,特别是三代头孢菌素、亚胺配南
和氨曲南等有关 [11 ]。 肠球菌引起人类感染性疾病 ,
包括泌尿系统感染、胆囊炎、心内膜炎、下呼吸道感
染、脑膜炎、手术切口部位及烧伤感染等。20世纪 80
年代首次发现耐万古霉素肠球菌以来 ,尤其是应用
·57·中草药  Chinese T raditional and Herba l Drugs 第 34卷第 1期  2003年 1月
第三代头孢菌素后 ,导致肠球菌感染增加 [13 ] ,且呈
现不断增长的趋势 ,在美国已成为医院感染的最主
要的病原菌之一 ,在西方一些国家住院患者中的分
离率在 10% 以上。在我国北京地区一些资料显示
1995年耐万古霉素的肠球菌达 7% ,上海地区报告
1994年耐万古霉素的肠球菌已达 8% [12 ] ,肠球菌对
多种抗菌药物天然耐药 ,耐万古霉素的菌株出现和
增多为临床治疗肠球菌属引起的感染提出了新的课
题 ,因此我们必须认真对待。
经我们对 140株肠球菌进行体外抑菌实验表
明 ,五倍子对其有强大的抗菌力 ,五倍子水煎液对粪
肠球菌的 M IC50为 0. 052 mg /mL,对屎肠球菌的
M IC50为 0. 105 mg /m L,前者相当生药作 1∶ 5 120
稀释 ,后者相当于生药作 1∶ 2 560稀释。 尤其对粪
肠球菌的抑菌效果最好 ,从表 2可以看出 0. 052
mg /m L,也就是每毫升含煎液干重 52μg ,即可抑制
93株粪肠球菌的 52. 9% 菌株。 说明五倍子对治疗
肠球菌感染有很好的应用开发前景。 如能开发出新
的剂型 ,则为肠球菌感染的治疗开拓出一条新路。
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清疡宁抗实验性胃溃疡作用的研究
芮 菁 ,华晓东 ,唐元泰
(天津市药品检验所 药理室 ,天津  300070)
  清疡宁是含有党参、黄芪、白术等成分的新的中
药复方制剂 ,具有健脾益气、理气止痛的功效 ,临床
上主要用于胃及十二指肠溃疡的治疗。为了验证该
制剂的药理作用并探讨其作用机制 ,本实验对该方
的抗实验性胃溃疡作用进行了研究。
1 材料
1. 1 药物:清疡宁 ( Qingyangning , QYN) ,浅棕色
干粉 ,批号 2001032。每克干粉含有 4. 65 g生药 ,由
天津市现代医药开发研究所提供。临用前用蒸馏水
配制成不同浓度的溶液 ,备用。 西米替丁片 ,批号
990501,天津太平洋制药有限公司生产。
1. 2 动物: 昆明种小鼠 ,购自中国医学科学院实验
动物研究所繁育场 ,合格证号 SCXK11-00-0003。
Wistar大鼠 ,购自中国医学科学院实验动物研究所
繁育场 ,合格证号 SCX K11-00-0008。
1. 3 实验室条件: 二级动物实验室 ,温度 ( 23± 3)℃ ,
湿度 50%± 10% , 12 h明暗交替照明。大小鼠均在
动物洁净柜中饲养 ,饮用经净化器净化的洁净水 ,饲
料购自中国医学科学院实验动物研究所繁育场。
1. 4 统计学处理: 计量资料以 x± s表示 ,实验结果
·58· 中草药  Chinese T raditional and Herba l Drugs 第 34卷第 1期  2003年 1月
收稿日期: 2002-03-14