全 文 ：中草药 C hin e e sT r a d i ti o n a l a n d H e r b a l Dr u g s第 5 3卷第 10 期 20 0 4年 0 1月 . 6 1 1 1·
妇乐颗粒对去卵巢拟阴虚内热大鼠的影响
徐亚香 ` ,师海波 ,
(l
. 长春市妇产科医院 ,吉林 长春 13 0 0 21 ; 2 . 吉林省中医中药研究院 ,吉林 长春 1 3 0 0 21)
更年期综合征是妇女在绝经期前后由于雌激素
水平波动或下降所致的以植物神经功能紊乱为主的
一组症候群 , 中医辩证以阴虚内热最为常见 。妇乐颗
粒是在临床经验方的基础上结合现代工艺手段制成
的纯 中药制剂 , 由熟地黄 、 地骨皮 、 当归 、 淫羊霍 、 酸
枣仁等 9 味中药组成 , 具有滋阴清热功能 ,用于治疗
更年期综合征阴虚内热证 。 根据更年期综合征阴虚
内热证的临床特点 , 本实验以去卵巢结合灌服热性
中药 的方法制备了 “ 更年期 ” 阴虚 内热大鼠模型 , 观
察妇乐颗粒对模型大鼠生殖 、 内分泌 、单胺类神经递
质等的调节作用 , 为其临床应用提供依据 。
1 材料
1
.
1 药物 : 妇乐 颗粒 , 深棕 色 粉末 , 含生 药 2 . 57
g /g
, 为制粒前不含赋型剂干粉 , 本 院化学室提供 ,
批号 20 0 2 1 20 1 。 更年安胶囊 ,通化金汇药业股份有
限公司 ,批号 2 0 0 3 0 2 1 8 。
1
.
2 试 剂 : 5一经 色 胺 ( 5一 H T ) 、 5一经 叫 噪 乙 酸
( 5
一
H I A A )
,
is g m a 公 司 ;重酒石酸去甲肾上腺素注
射液 、 盐酸多巴胺注射液 , 上海禾丰制药有限公司 ;
戊 巴 比妥钠 ,北京化学试剂厂 ;雌二醇 ( E Z ) 、 促黄体
生 成 激 素 ( L H ) 、 促 卵 泡 激 素 ( F S H ) 、 催 乳 素
(P R L ) 放免试剂盒 ,美国 B ec km an 公司 ; 其他试剂
均为国产分析纯 。
1
.
3 仪器 : R F一 5 40 型荧光分光光度计 , 日本岛津
株式会社 ;化学发光仪 , 美国 B ec k m a n 公司 ; Y L S一
I A 型多功能小 鼠 自主活动仪 , 山东医学科 学院设
备站 ; 电脑数字式体 温计 , 欧姆龙 (大 连 ) 公 司产
品 ; 电子天平 ,北京赛多利斯天平有限公司 。
x
.
4 动物 : w i s t a r 大 鼠 , 1 6 0 ~ 1 7 0 9 ,雌性 , 购自长
春高新医学动物实验研究中心 ,合格证号 : S C X K一
(吉 ) 2 0 0 3 。
2 方法
2
.
1 去 卵巢 拟阴虚 内热证 大鼠模 型制备 : 用 3%
水合氯醛 i p 麻醉大鼠 ,腹位固定 , 于最末肋 骨下腋
中线上距脊柱约 2 。 m 处剪毛 ,切开皮肤和背肌 , 夹
出卵巢 ,分离脂肪团 ,结扎卵巢下输卵管后切除双侧
卵巢 ,术后第 4 、 5 、 6 、 7 天逐只进行阴道涂片检查 , 以
确定卵巢摘除完全 , 术后第 7 天选取无动情期变化
大 鼠 19 热性 中药 (附子 一干姜 1 : 1 水煎制成 50 %
煎液 ) 2 0 m L / k g , 每天 1 次 , 连续 1 4 d 。
2
.
2 分组与给药 : 模型大鼠随机分 5 组 ,分别为模
型对照 组 ( 2 0 m L / k g 水 ) , 更年 安胶囊 l · 2 9 / k g
( 临床等效剂量的 5 倍 ) 组 ,妇乐颗粒 5 、 2 . 5 、 1 . 25
g / k g (分别为临床等效剂量的 4 . 2 、 2 . 1 、 1 倍 ) 组 ,
另取 10 只大 鼠只行假手术 , 不去卵巢作为假 手术
对照组 , 各组大 鼠分别于末次给予热性 中药 l h 后
19 给药 , 每天 1 次 , 连续 10 d 。
2
.
3 阴道上皮细胞角化检测 : 末次给药后 l h 各组
大鼠做阴道涂片 , 9 5% 乙醇固定 , 巴氏染色 ,镜下观
察角化程度 , 其 中染色为蓝色 的细胞 , 为未角 化细
胞 ; 染色为绿色的细胞 , 为中低层角化 ; 染色为红色
的有核鳞状上皮细胞 ,为表层角化 ; 染色为红色无核
多边形鳞状上皮 , 为过角化 。 将中低层角化 、 表层角
化 、 过角化定为角化细胞 , 镜下记数 1 0 个上 皮细
胞中角化细胞和未角化细胞所占百分数 。
2
.
4 肛温测量 : 分别于给药第 4 、 6 、 8 、 10 天的药后
l h 测量大鼠直肠温度 (探头深人肛门约 3 c m ) 。
2
.
5 血清 E Z 、 L H 、 F S H 、 P R L 含量检测 : 末次给药
后 24 h , 3写 水 合氯 醛 i p 麻醉 , 腹 主动 脉 采血 ,
4 o o o r / m i n 离心 1 5 m i n ,制备血清 ,采用放射免疫
分析法测定血清中 E Z 、 L H 、 F S H 、 P R L 水平 。
2
.
6 下丘脑中单胺类递质多巴胺 ( D A ) 、 去甲肾上腺
素 ( N E ) 、 5一 H T 、 5一 H I A A 水平测定 : 大鼠处死后立即
剖取下丘脑 ,液氮保存 ,精密称量下丘脑 , 冰浴条件下
以预冷酸性正丁醇制成匀浆 ( 1 : 30 ) , 采用荧光分光
光度法川测定下丘脑中 D A 、 N E 、 5一H T 、 5一 H I A A 水
平 ,计算 5一 H T / N E 值 、 5一 H I A A 5/ 一 H T 值 。
2
.
7 子宫质量测量 : 动物处死后 ,立 即剖腹摘取子
宫 , 用电子天平称湿质量 ,计算子宫指数 ( m g / g ) 。
3 结果
收稿 日期 : 2 0 0 3一 1 2一 2 5作者简介 : 徐亚香 ( 1 9 6 5一 ) , 女 , 副主任医师 , 主要从事妇产科临床研究 。
.1 1 62
. 中草药 C h ins e e Ta rd it in oa la nd He rba lD r ug s 第 5 3卷第 1 0期 2 04 0年 1 0月
3
.
1 妇乐颗粒对去卵巢拟阴虚内热大 鼠血清性激 颗粒与 1 . 2 9/ kg 更年安胶囊接近且作用最强 ;对 N E
素水平的影响 : 见表 1 。 妇乐颗粒及更年安胶囊可使 的作用 5 9/kg 妇乐颗粒最强 。
模 型大 鼠升 高的血清 F S H、 L H、 PR L 水平 明显 降 3. 3妇乐颗粒对去卵巢拟阴虚内热大 鼠肛温的影
低 , 对 F s H 、 P R L 的作用 5 9 k/ g 妇 乐颗粒作用最 响 : 结果见表 3 。 去卵巢及给予热性 中药后模型组大
强 ,对 L H 的作用 5 9 k/ g 妇乐颗粒 与更年安胶囊 鼠肛温明显增高 , 给予受试药物后不 同时间大鼠升
(1
.
2 9 k/ g ) 作用相 当 ,对模型大鼠降低的 E Z水平有 高的肛温明显降低 , 给药后第 8 天 , 5 9 k/ g 妇乐颗
一定的升高趋势 ,但无统计学意义 。 粒和 1 . 2 9 k/ g 更年安胶囊降温明显 , 给药后第 10
3
.
2 妇乐颗粒对去卵巢拟阴虚内热大鼠下丘脑中单 天 5 、 .2 5 、 1 · 25 9 k/ g 妇乐颗粒和更年安胶囊均有明
胺类神经递质水平的影响 :结果见表 2 。 妇乐颗粒及更 显的降温作用 。
年安胶囊可使模型大鼠下丘脑中升高的 5一 H T 、 5一 H l 一 3 . 4 妇乐颗粒对去卵巢拟阴虚内热大 鼠子宫质量
A A 水平明显降低 , 降低的 N E 水平明显增高 , 明显降 及阴道上皮细胞角化程度的影响 : 结果见表 4 。 妇乐
低 5一H T / N E 值 ,对 D A 水平及 5一 H I A A / 5一 H T 值无 颗粒及更年安胶囊可使模型大鼠减轻的子宫质量明
明显影响 。 对 5一 H T 和 5一H IA A 的影响 , 5 9 / k g 妇乐 显增加 ,明显增加阴道上皮细胞角化程度 。
表 1 妇乐顺粒对去卵集大 鼠血清 E Z 、 F s H 、 L H 、 P R L 水 平的影响 ` 士: , n ~ 1 0)
T a b l e 1 E f f e e t o f F u l e G r a n u l e o n E Z
,
F SH
,
L H
, a n d P R L l
e v e l s i n r a t s e r u m w i th o u t o v a r y ( x 士 s , n ” 1 0 )
组 别 剂量 / ( g · k g 一 ’ ) E Z / ( p g · m l 一 ` ) F S H / ( m I U · m L 一 ’ ) L H / ( m I U · m L 一 , ) p R L / ( n g · m L 一 , )
假手术
模型
更年安胶囊
妇乐颗粒
: ;
5
2 4
.
7士 7 . 59 ` .
1 5
、
9士 2 . 2 8
1 8
`
3士 3 . 4 0
1 8 0士 3 . 5 6
1 7
,
2 士 4 . 2 3
17
.
6士 4 . 8 8
4
.
6 9士 1 . 0 96 许 衬
6
.
6 0士 1 . 4 6 8
5
.
0 2士 1 . 6 36 苍
4
.
9 5士 1 0 3 5 赞 .
5
.
2 7士 1 . 2 8 4 带
5
.
3 7士 1 . 3 11
2
.
4 1士 0 . 8 50 .
3
.
3 6士 0 . 6 18
2
.
6 1士 0 . 50 6 肠 普
2
.
6 1士 0 . 60 0 爷
2
.
8 0士 0 . 50 9 苍
2
.
9 2士 0 . 70 9
3
.
9 0士 0 , 82 3 任 苍
5
.
3 6士 0 8 7 1
4
.
1 4士 0 、 7 5 9 份 苍
4
.
0 4土 0 ` 9 9 4 . 潇
4
.
2 3士 0 , 87 8 书 甘
4
.
4 6士 0 . 8 94 “
与模 型组 比较 : ` 尸< 。 . 05 “ 尸 < 0 . 01
书
P < 0
.
0 5 否 并 P < 0
.
0 1 vs m o de l g ro u p
表 2 妇乐颗粒对去卵巢大 鼠下丘脑中 D A 、 N E 、 5 一H T 、 5 一H I A A 水平的影响 (x 士 : , n 一 1 0)
T a b l e 2 E f f e e t o f F u l e G r a n u l e o n D A
,
N E
,
5
一
H T
, a n d s
一
H IA A I
e v e l s
i n r a t h y P o t h a la m u s w i t h o u t o v a r y ( x 土 s , n 一 1 0 )
组 别 剂 量
/ (g
·
k g 一 ` )
D A
八 n g · k g 一 ’ )
N E
/ ( n g
·
k g 一 1)
5
一
H T
/ (
n g
·
k g 一 l )
5
一
H I A A
/ (
n g
·
m L 一 1 )
5一 H T / N E 5
一
H I A A / 5
一
H T
假手术 一
模型 一
更年安胶囊 1 . 2
妇乐颗粒 5
2
.
5
1
.
2 5
1 9 0
.
3 8士 8 5 . 8 1 7 8 5 . 1 9士 1 60 . 4 1 铃 ` 22 1 . 8 1士 9 1 . 4 1 协 普 2 9 4 . 8 0士 7 7 . 18 签 苍 0 . 2 8 9士 0 . 1 2 2 苍 苍 ` 1 . 5 14士 0 . 5 4 5
2 3 3
.
4 8士 1 1 2 , 1 6 6 3 9 . 9 7士 6 8 . 6 4 3 9 7 . 3 7士 1 0 9 . 14 7 74 95 士 1 6 0 . 5 9 0 . 6 1 4士 0 . 1 30 2 . 12 6士 0 . 9 0 1
1 9 3
.
2 5士 5 3 . 3 8 74 9 . 0 6 士 7 0 . 5 2 ` 件2 4 6 . 7 9士 6 5 . 0 8 创 书 5 59 . 5 7 士 1 4 8 . 4 8 僻 ` 0 . 2 4 3士 0 . 3 3 0 . 苦 , 2 . 3 3 7士 0 . 6 3 8
1 9 5
.
8 7士 4 8 . 2 6 7 5 1 2 6士 8 4 . 9 0 书 ` 2 4 9 . 10士 8 1 . 1 1 补 件 5 4 0 . 5 2士 14 2 . 2 1 书 件 0 . 3 2 9士 0 . 0 9 3 ` 苍 , 2 . 2 2 7士 0 . 3 1 3
1 9 6
.
1 3士 4 5 . 7 7 7 4 5 . 8 4 土 8 7 . 1 4 , 赞 2 7 7 . 0 8士 9 8 . 43 书 6 0 7 . 9 5士 1 7 5 . 4 5 香 0 . 3 6 8士 0 . 1 1 3 番 “ 苍 2 4 2 8士 1 . 0 1 6
2 0 4
.
0 7士 3 7 . 5 9 6 5 8 . 16 士 14 5 . 14 3 2 3 . 3 8士 1 0 1 . 1 5 6 7 3 . 15 士 2 7 2 . 1 4 0 . 4 9 5士 0 . 1 3 6 2 . 2 6 3士 1 . 0 0 9
与模型组比较 : ` 尸 < 0 . % “ 尸< 0 . 01 “ ’ 尸 < 。 · 0 01
`
P < 0 0 5
赞 件
P < 0
.
0 1
书 朴 件
P < 0
.
0 0 1 v s m o d e l g r o u p
表 3 妇乐颗粒对去卵巢大鼠肛温的影响 ` 士: , n 一 10)
aT b l
e 3 E f f e e t o f F u le G r a n “ l e o n a n u s te m p e r a t “ r e i n r a ts w i th o “ t o v a yr ( x 士 s , n一 1 0 )
组 别 剂 量 给药后不 同时间肛温 /
℃
/ ( g
·
k g 一 ` )
假手术
模型
更年安胶囊
妇乐颗粒
:
.
;
5
3 7
.
8 7士 0 . 5 9 1
3 8
.
2 3士 0 . 5 1 6
3 7
.
9 7士 0 . 5 0 3
3 8
.
0 0土 0 . 4 90
3 8
.
1 8士 0 . 5 29
3 8
.
3 5士 0 . 5 99
37
.
9 2士 0 . 4 7 3 资
3 8
.
4 1士 0 . 5 2 2
3 8
.
1 5士 0 . 4 4 5
3 8
.
1 8士 0 . 42 6
3 8
.
2 6士 0 . 38 9
3 8
.
3 4士 0 . 4 8 4
3 7
.
8 1士 0 . 4 5 0 . 朴
3 8
.
5 7士 0 . 5 9 4
3 8
.
0 6士 0 . 4 5 3 蕊
3 8
.
0 6士 0 . 3 8 9 各
3 8
.
1 4士 0 . 5 3 4
3 8
.
2 6士 0 . 3 78
3 7
.
90士 0 . 5 5 0 . 苍
38
.
72士 0 . 4 5 4
3 8
.
22士 0 . 4 3 7 势
38
.
0 6士 0 . 3 6 6 拓 带
38
.
18士 0 . 4 0 5 倪
3 8
.
2 6士 0 . 4 7 2 苍
与模型组 比较 : . 尸 < 0 . 05 , , P < 。 . 01
份
P < 0
.
0 5 怜
怪
P < 0
.
0 1 v s m o d e l g r o u p
中草药 C h i n e s e T r a d i t io n a l a n d H e r b a l D r u g s 第 3 5 卷第 1 0 期 2 0 0 4 年 1 0 月 . 1 1 6 3 .
表 4 妇乐顺粒对去卵集大 鼠子宫质 t 及 阴道
上皮细胞角化程度的影响 ` 士 s , n ~ 10)
T a b l e 4 E f f e c t o f F u le G r a n u l e o n w e ig h t o f w o m b a n d k e r a
-
it ul z a t i o n Of
v a g i an e p玉t h e l ial cel ls ( x 士 s , . = 10 )
组 别 剂 量 子宫指数
/ ( g
·
k g一 1 ) / ( m g
·
g 一 ’ )
阴道上皮细胞 ( 10。 个 )
角化细胞 /%
7 4
.
5士 8 15
3 1
.
7士 1 0 . 39
未角化细胞 /%
假手术
模型
更年安胶囊
妇乐颖粒
1
.
9 3士 0 . 38 1 赞 .
1
.
4 0士 0 . 35 7
1
.
7 8士 0 34 7 香
1
.
8 3土 0 . 2 62 圣 .
1
.
7 5士 0 . 24 0 任
1
.
6 7士 0 . 3 65
4 5 2士 15 . 4 5 .
4 7
.
3士 1 7 . 07 任
4 5
.
3士 16 . 07 份
4 2 7士 1 5 . 78
25
.
5士 8 . 1 5 . 苍 份
68
.
3士 10 . 3 9
54
.
8士 15 . 4 5 .
52
.
7士 17 . 0 7份
54
.
7士 16 . 0 7甘
57
.
3士 15 . 7 8
与模型组比较: . 尸< 0 . 05 “ P < 0 . 01 “ “ ` 尸< 0 . 0 1
赞
P ( 0
.
0 5
份 任
P ( 0
.
0 1
. , “
P ( 0
.
00 1 vs m o de l g r o u p
4 讨论
女性进人更年期 , 由于卵巢功能减退 , 下丘脑 -
垂体一卵巢轴 (性腺轴 )平衡失调 ,生殖 、 内分泌系统
性激素分泌紊乱 ,卵巢对促性腺激素的应激能力减
弱 ,分泌 的雌激素大 幅度降低 ,反馈性 的引起下丘
脑 、 垂体分泌亢进 ,促性腺激素分泌过多 , 引起植物
神经功能失调 ,进而出现潮热 、 多汗 、 烦躁不安 、 失眠
等多种植物神经紊乱症状 。
本实验采用去卵巢并灌服热性 中药的方法模拟
人类更年期阴虚 内热证 ,结果可见大 鼠造模后阴道
上皮角化细胞明显减少 ,未角化细胞明显增多 ,肛温
明显升高 ,血清中 E Z水平明显降低 , L H 、 F SH 、 P R L
水平 明显增高 ,子宫质量 明是减轻 ,下丘脑中单胺类
神经递质 N E 水平 明显降低 , 5一 H T 、 5一 H I A A 水平
明显增高 , 5一 H T / N E 值明显提高 ,表明血清性激素
及下丘脑 中神经递质水平 已经明显紊乱 , 拟更年期
阴虚内热模型已明显形成 。 妇乐颗粒可明显降低模
型大 鼠血清促性腺激素 F S H 、 L H 、 P R L 水平 , 对血
清 E Z水平有一定增加作用 , 同时可明显增加模型大
鼠子宫质量 , 明显增加阴道上皮细胞角化程度 ,表明
其对拟更年期阴虚 内热大鼠紊乱 的生殖 、 内分泌系
统有明显的正向调节作用 , 同时可以直接作用于子
宫 ,对子宫有直接营养作用 ,降低子宫的萎缩老化进
程 ;对模型动物升高的肛温有明显 的降低作用 ,表明
其对阴虚内热症状有明显的抑制作用 ; 明显降低下
丘脑 中 5一 H T 、 5一 H IA A 水平 , 提高 N A 水平 , 降低
5一 H T / N E 比值 , 表明其有部分纠正拟更年期 阴虚
内热大鼠中枢单胺类神经递质紊乱 的作用 , 进而改
善植物神经系统紊乱症状 。 结果表明妇乐颗粒对拟
更年期 阴虚内热大鼠紊乱的植物神经系统 ,生殖 、 内
分泌系统具有明显的正向调节作用 。
R e f e r e n C e
:
[ z〕 L i Y K . 人介 t h o d o l o翻 Of P h a , a c o l o g i c a z E xP e万 m e n t o n
hC in se
。 拟“ et ir “ 对` d ic a (中药药 理 实验 方 法学 ) 仁M」.
S h a n g h a i
:
Sh a n g h a i cS i
e n t i fi e a n d T e e h n i e a l P u b li s h e r s
,
1 9 9 1
.
芦荟含药血清对内毒素的体外抑制作用
崔 桅 , 卜一珊 , 高笑舫
(天津市第一中心 医院 药学部 , 天津 3 0 0 1 9 2 )
芦荟为百合科芦荟属多年生 肉质草本植物 ,其
种和变种共有 50 0 多种 。 主要的药用芦荟有库拉索
芦荟 A loe ve ar L . 、 好望角芦荟 A . fe or x M il e r 、 索
科 特芦 荟 A . : oc ot ir an L a m . 和芦 荟 A . v e ar L
v a r
·
c h i n e n s i s ( H a w
.
) B e r g e r
。 芦荟作为中药被应
用已近千年 ,具有致泻 、 抗菌 、 抗炎 、 保肝 、 抗肿瘤 、 抗
组织损伤等作用 。 本实验通过含药血清与内毒素体
外作用后测定内毒素残留量观察芦荟体外抑制内毒
素的作用 。
1 材料
1
.
1 实验动物 : W i s t a r 大鼠 2 0 只 ,体重 2 0 0一 2 4 0
g
,雌雄各半 (北京市实验动物研究所提供 ) 。
1
.
2 药物与试剂 :库拉索芦荟 (由天津吉媛芦荟种
植园提供 ) ; 细菌 内毒素 (批号 2。。 1一 1 1 , 中国药品生
物制品检定所 提供 ; 鳖试剂 (批号 0 1 12 28 , 湛江海
洋生物制品厂提供 ) ; K T 一 2 0 血浆前处理液 (天津
一瑞化学试剂有限公司提供 ) 。
1
.
3 仪器 : E D S一” 细菌内毒素测定系统 、 T 01 智
能恒温仪 (湛江经济技术开发区正杰科学仪器有限
公司产品 ) 。
收稿 日期 : 2 0 0 3一 1 2一 22
甚金项 目 : 天津市卫生局基金 ( 2 00 02 4)作者简介 : 崔 桅 ( 19 6 5一 ) ,女 ,副主任药师 , 现于天津市人民医院工作 , 研究方向为临床药理学 。 T e l : ( 0 22 ) 8 7 7 2 9 5 2 0