全 文 :中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第11期2005年11月·3_695·
白藜芦醇抑制C6及TJ905胶质瘤细胞生长的研究
刘宏胜1,刈洪利2,王金环1,徐新士1,祁建滨1
(1.天津市第一中心医院,天津300192}2.天津市药科中等专业学校,天津300400)
白藜芦醇是近年来发现的具有预防肿瘤发生的
天然植物成分“埘,属于非黄酮类多酚化台物,广泛
存在于种子植物中,并以新鲜葡萄皮中所含的量为
最高(50~100旭/g)。而在红葡萄酒中也可高达
1.5~3mg/L。白藜芦醇是植物在遇到真菌感染、紫
外线照射不利条件时所产生的植物补体,对植物本
身起保护作用,同时对人体也具有调节脂质代谢、抑
制血小板聚集、保护心血管、抗炎、抗肿瘤等多种生
物学活性和药理作用,具有很大的药用价值。目前的
研究表明,自藜芦醇对鼠肝细胞癌、人肝母细胞、乳
腺癌等多种肿瘤细胞均有显著抑制作用。但自藜芦
醇对脑胶质瘤作用的研究国内还未见报道。本实验
初步研究白藜芦醇对大鼠C6及人脑TJ905胶质瘤
细胞的生长抑制和杀伤作用。
1材料与方法
1.1药品、试剂与仪器:白藜芦醇购自中国药品生
物制品检定所,批号11535—200301,质量分数
100%。二甲基亚砜(DMSO,Sigma公司产品);无
水乙醇、含10“小牛血清1640培养液、含lo%小
牛血清DMEM培养液(圣东生物科技发展公司)#
0。25%胰酶一0.02%乙二胺四乙酸二钠(EDTA)、
MTT、青霉素、链霉素、96孔培养板(Sigma公司产
品);ClinioB nl28酶标仪、REVCOLindBer928804
CO。培养箱等。
1.2细胞来源:TJ905属于多形性胶质瘤母细胞瘤
体外细胞系,由天津医科大学总医院建系。C6细胞
是经Ⅳ一亚硝基甲脲诱发的大鼠胶质瘤细胞,该细
胞经一系列体外和体内培养传代生长稳定。
1.3细胞培养:C6细胞接种于含10%小牛血清的
1640培养液(含青霉素100U/mL、链霉素100pg/
mL)}TJ905细胞接种于含10%小牛血清的
DMEM培养渡中(含青霉素100U/mL、链霉素
100#g/mL),放入CO:培养箱(37℃)培养,隔日
用0.25%胰酶一0.02%EDTA消化传代。
1.4白藜芦醇对细胞生长的抑制作用:分别取对数
收稿日期:2005—02—23
生长期细胞,用胰酶一EDTA消化并计数,C6按1×
10s/mL,TJ905按2x105/mL将90pL的细胞混
悬液分别接种于96孔培养板的各孔中。24h后,待
细胞融合达70%左右时,分别加入不同浓度的白
黎芦醇(白藜芦醇先用无水乙醇溶解,再用1640和
DMEM培养液稀释成不同浓度),终浓度为500、
250、125、62.5、31.25,umo|/I。。每孔分别加入10“L
自藜芦醇,每个浓度设3个复孔。对照组加1640或
DMEM培养液(含醇量与实验组相等),置CO。培
养箱(37℃)培养24、48和72h后,加入MTT
(临用前用PBS溶解,pH7.4,5g/L)振荡均匀,置
37℃培养箱培养4h后,弃去液体,每孔加入100
gLDMSO,室温振荡10min,用ClinioBi0128酶标
仪于492nm波长处测吸光度似)值,作为反映细
胞代谢状况的参数。
1.5统计学方法:采用SPSSIO.0统计软件进行方
差分析。
2结果
2.1 自藜芦醇对C6和TJ905细胞的生长抑制作
用:结果见表1。可见随着白藜芦醇浓度的增加、作
用时间的延长,细胞的以值在减少,即对细胞生长
的抑制程度与剂量、时间呈依赖性。
2.2白藜芦醇作用浓度、时间与C6、TJ905脑胶质
瘤细胞存活率的关系:见图1。随着药物浓度的增
加、作用时问的延长,细胞的存活率呈下降趋势。
3讨论
胶质瘤是常见的原发性颅内肿瘤,其中恶性胶
质瘤约占60%。其传统的治疗方式(手术治疗、化学
疗法、放射疗法)疗效很不理想。文献报道,近90%
恶性胶质瘤患者的平均生存时间在1.5年以内,是
神经外科中难治性疾病之~。近年来,恶性胶质瘤的
治疗效果未能得到明显改善。因此,开发或研制治疗
脑胶质瘤新药、新方法、新途径至关重要。
Jang等研究结果指出白藜芦醇具有抗癌作用。
它可以降低小鼠皮肤癌的发生率达98蹦。自藜芦醇
万方数据
·1696· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第11期2005年11月
对熙 一 9.260士o.o。72 9.4060士0.0085 0 5193士90965
自藜芦醇 31.25 9.2367士0.012l0 300士0.0327 0.371o士0.Ol6 3‘’
62.5 0.2313士0013++0.2447士0.0161。。0.2523士9.005B‘。
125 0.2160士O.∞95。。02040士0.0036。+01963士0.0049。’
250 0.2043士D.0081。。0.1997士00026’。0.18l9士0.0l80。’
500 0.1823士0.005l’’0.1690±0.0049‘。0.1456士0.0076‘。
0.ZZ60士9,0075 0,2477土0—0210 0.2787±0-0147
0.2143士0.0900 0.231l土0.0030 m253土0,013Z’’
0.2023士0.0156。。0.1897士0t0105。。0.1790士0.0095’’
0.1880士0,0072’‘0.1753土0.0145。。0.1560士0-0095。。
0.1847士0005l。。0.1540士0,0072。。仉1240土0-0106’’
0.165O士o.0095’’m1413土0.0035。。0.1127士0·0136。。
与对照组比较:一P
i|||哿40
l1誊
§:4:0
48 72
r川h
l~5—31.25、62·5、125、250、500pg/L
圈1 自尊芦醇作用浓度短时间与C6(A)、
TJgOS(B)细胞存活率的关系
Fig.1Relationshipbetweenco centrationand me
ofresveratroltreatmentandviabilityof
C6(A)andTJ90$(B)cells
的抗癌作用已引起人们的广泛关注。如对鼠肝细胞
癌、人肝母细胞瘤、乳腺癌等多种肿瘤均有抑制作
用。但其抗癌机制不太清楚。有学者认为:环氧化物
酶(cOx)能刺激肿瘤细胞生长和抑制免疫监视。
而白藜芦醇可能通过抑制cox活性起到抗癌作
用‘”“。本实验通过观察体外白藜芦醇对大鼠C6胶
质瘤细胞和TJ905人脑恶性肿瘤细胞的抑制作用,
探讨白藜芦醇抗胶质瘤的作用。结果表明白藜芦醇
具有抑制脑胶质瘤细胞的作用,但其机制有待进一
步研究。
Referenc№s:
E1]WoherFtAkogluB,ClausnlterA.“a1.Downregulationof
theyclinDl/Cdk4complexoceursduringresveratrolin—
ducedcellcycleargestincoloncanc盯celllines[J].JⅣ“妒-
2001.131(8):2197·2203.
[2]TinhoferI.BernhardDtSeniterM,eta1.Resveratrolt
tumorsuppressivecompound{tomgrapes,inducesapoptoeis
via novelmitoehond,ialpathwaycontrolledhyBe[·2[J].
FASEBJ.2001。15(9),1613—1615.
[3]KozukiY,MiuraY.YagasakiN,雕a1.Resveratrolsup-
pressesh —patomacellinvasionindependentlyafitsanti—pro-
lilerativeaction[J].CancerLett,2001,167(2):151一156.
ECAhmadN.AdhamiVM.AfaqF.吖a1.ResveratroIcauaes
WAF一1/P21一mediatedG(1)一phaseargestofcellcycleand
inductionofapoptosisinhumanepidermoidcarcinomaA431
cell[J].ClinCancerRes,2001,7(5):1466—1473·
r”⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”⋯”⋯”⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。;
l ;
; ;
; 欢迎订阅《中单喃》杂志2004年增刊 ;
; i
: }
; 为了加速中药现代化进程,促进中药产业的技术创新,我部编辑出版了以“新技术在中药现代化l
;中的应用”为主要内容的增刊。该增刊共收栽论文120篇,总字数约50万字,每本定价60元,另加;
;5.00元邮费。欢迎广大读者直接向《中草药》杂志编辑部/T阅,款到寄刊。
7
i
; 鳊辑部地址:天津市南开区鞍山西道308号 邮编:300193网址:WWW.tjipr.corni
i 电话:(022)2747491323006821传真:(022)23006821E—mail:zcyzzbjb@tjipr.corni
: :
:⋯。⋯口.o⋯。⋯.。。⋯.oo⋯.oo⋯⋯⋯⋯⋯一⋯⋯.⋯。⋯⋯⋯⋯⋯o⋯⋯⋯.⋯⋯⋯oo⋯.o⋯。⋯.oo⋯·⋯⋯⋯⋯。o⋯.⋯⋯o。2
万方数据
白藜芦醇抑制C6及TJ905胶质瘤细胞生长的研究
作者: 刘宏胜, 刘洪利, 王金环, 徐新女, 祁建滨
作者单位: 刘宏胜,王金环,徐新女,祁建滨(天津市第一中心医院,天津,300192), 刘洪利(天津市药科
中等专业学校,天津,300400)
刊名: 中草药
英文刊名: CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年,卷(期): 2005,36(11)
被引用次数: 3次
参考文献(4条)
1.Wolter F;Akoglu B;Clausniter A Downregulation of the cyclin DI/Cdk4 complex occurs during
resveratrol induced cell cycle arrest in colon cancer cell lines 2001(08)
2.Tinhofer I;Bernhard D;Senfter M Resveratrol,a tumor suppressive compound from grapes,induces
apoptosis via a novel mitochondrial pathway controlled by Bcl-2 2001(09)
3.Kozuki Y;Miura Y;Yagasaki N Resveratrol suppresses he-patoma cell invasion independently of its
anti-proliferative action[外文期刊] 2001(02)
4.Ahmad N;Adhami V M;Afaq F Resveratrol causes WAF-1/P21-mediated G (1)-phase arrest of cell cycle
and induction of apoptosis in human epidermoid carcinoma A 431 cell 2001(01)
本文读者也读过(10条)
1. 张又平.徐新女.王金环.鲁格.刘萍.苏同芳.刘宏胜.祁建滨.高波 脑胶质瘤缓释化疗剂3H-BCNU聚乳酸的体内外
释药研究[期刊论文]-中国危重病急救医学2003,15(9)
2. 王广秀.浦佩玉.康春生.贾志凡.张志勇 白藜芦醇对U251人胶质瘤细胞抑制生长作用的研究[期刊论文]-中华实
验外科杂志2006,23(3)
3. 王金环.房欣.史国利.蔡宝立 AdCMV-TK和AdCMV-P53联合治疗胶质瘤的体外实验[期刊论文]-中国神经精神疾病
杂志2002,28(3)
4. 郭雪红 白藜芦醇的制备及药理作用概述[期刊论文]-天津药学2008,20(3)
5. 刘宏胜.王金环.徐新女.王淑杰.祁建滨.刘洪利.LIU Hong-sheng.WANG Jin-huan.XU Xin-nü.WANG Shu-jie.QI
Jian-bin.LIU Hong-li 白藜芦醇抑制人脑胶质瘤U251细胞增殖及诱导其凋亡的实验研究[期刊论文]-中草药
2006,37(9)
6. 庞杰.栾新红.薛娜.张雷雷.何凤艳.袁亚琦 白藜芦醇离子通道药理作用研究进展[期刊论文]-华北煤炭医学院学
报2008,10(3)
7. 李蓟龙 虎杖中白藜芦醇的药理学活性[期刊论文]-河北北方学院学报(医学版)2007,24(3)
8. 常洪波.章翔.甄海宁.费舟.周杰.章薇.高大宽.宋蕾 白藜芦醇抑制SHG-44胶质瘤细胞生长实验研究[期刊论文]-
中华神经外科疾病研究杂志2006,5(2)
9. 王金环.张成祥.陈茹玉.史国利.蔡宝立.陈德风.Wang Jinhuan.Zhang Chengxiang.Chen Ruyu.Shi Guoli.Cai
Baoli.Chen Denfeng 磷脂替加氟缀合物抑瘤作用的研究[期刊论文]-南开大学学报(自然科学版)2000,33(2)
10. 刘萍.王金环.刘宏胜.祁建滨.徐新女 不同给药方法对胶质瘤细胞抑制作用的体外实验[期刊论文]-神经疾病与
精神卫生2002,2(4)
引证文献(3条)
1.李永涛.费洪新.沈雷.姜杨.郭志鸿.高磊.石小芳.刘文华 白藜芦醇对衰老昆明小鼠肝细胞作用机制的探讨[期刊
论文]-中国医药导报 2010(6)
2.刘宏胜 白藜芦醇抗肿瘤作用机制的研究进展[期刊论文]-中草药 2007(2)
3.詹奇.胡韶山.郑永日.杨宝峰 中药治疗胶质瘤作用机制的研究现状[期刊论文]-哈尔滨医科大学学报 2007(5)
本文链接:http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200511040.aspx