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白藜芦醇抑制C6及TJ905胶质瘤细胞生长的研究



全 文 :中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第11期2005年11月·3_695·
白藜芦醇抑制C6及TJ905胶质瘤细胞生长的研究
刘宏胜1,刈洪利2,王金环1,徐新士1,祁建滨1
(1.天津市第一中心医院,天津300192}2.天津市药科中等专业学校,天津300400)
白藜芦醇是近年来发现的具有预防肿瘤发生的
天然植物成分“埘,属于非黄酮类多酚化台物,广泛
存在于种子植物中,并以新鲜葡萄皮中所含的量为
最高(50~100旭/g)。而在红葡萄酒中也可高达
1.5~3mg/L。白藜芦醇是植物在遇到真菌感染、紫
外线照射不利条件时所产生的植物补体,对植物本
身起保护作用,同时对人体也具有调节脂质代谢、抑
制血小板聚集、保护心血管、抗炎、抗肿瘤等多种生
物学活性和药理作用,具有很大的药用价值。目前的
研究表明,自藜芦醇对鼠肝细胞癌、人肝母细胞、乳
腺癌等多种肿瘤细胞均有显著抑制作用。但自藜芦
醇对脑胶质瘤作用的研究国内还未见报道。本实验
初步研究白藜芦醇对大鼠C6及人脑TJ905胶质瘤
细胞的生长抑制和杀伤作用。
1材料与方法
1.1药品、试剂与仪器:白藜芦醇购自中国药品生
物制品检定所,批号11535—200301,质量分数
100%。二甲基亚砜(DMSO,Sigma公司产品);无
水乙醇、含10“小牛血清1640培养液、含lo%小
牛血清DMEM培养液(圣东生物科技发展公司)#
0。25%胰酶一0.02%乙二胺四乙酸二钠(EDTA)、
MTT、青霉素、链霉素、96孔培养板(Sigma公司产
品);ClinioB nl28酶标仪、REVCOLindBer928804
CO。培养箱等。
1.2细胞来源:TJ905属于多形性胶质瘤母细胞瘤
体外细胞系,由天津医科大学总医院建系。C6细胞
是经Ⅳ一亚硝基甲脲诱发的大鼠胶质瘤细胞,该细
胞经一系列体外和体内培养传代生长稳定。
1.3细胞培养:C6细胞接种于含10%小牛血清的
1640培养液(含青霉素100U/mL、链霉素100pg/
mL)}TJ905细胞接种于含10%小牛血清的
DMEM培养渡中(含青霉素100U/mL、链霉素
100#g/mL),放入CO:培养箱(37℃)培养,隔日
用0.25%胰酶一0.02%EDTA消化传代。
1.4白藜芦醇对细胞生长的抑制作用:分别取对数
收稿日期:2005—02—23
生长期细胞,用胰酶一EDTA消化并计数,C6按1×
10s/mL,TJ905按2x105/mL将90pL的细胞混
悬液分别接种于96孔培养板的各孔中。24h后,待
细胞融合达70%左右时,分别加入不同浓度的白
黎芦醇(白藜芦醇先用无水乙醇溶解,再用1640和
DMEM培养液稀释成不同浓度),终浓度为500、
250、125、62.5、31.25,umo|/I。。每孔分别加入10“L
自藜芦醇,每个浓度设3个复孔。对照组加1640或
DMEM培养液(含醇量与实验组相等),置CO。培
养箱(37℃)培养24、48和72h后,加入MTT
(临用前用PBS溶解,pH7.4,5g/L)振荡均匀,置
37℃培养箱培养4h后,弃去液体,每孔加入100
gLDMSO,室温振荡10min,用ClinioBi0128酶标
仪于492nm波长处测吸光度似)值,作为反映细
胞代谢状况的参数。
1.5统计学方法:采用SPSSIO.0统计软件进行方
差分析。
2结果
2.1 自藜芦醇对C6和TJ905细胞的生长抑制作
用:结果见表1。可见随着白藜芦醇浓度的增加、作
用时间的延长,细胞的以值在减少,即对细胞生长
的抑制程度与剂量、时间呈依赖性。
2.2白藜芦醇作用浓度、时间与C6、TJ905脑胶质
瘤细胞存活率的关系:见图1。随着药物浓度的增
加、作用时问的延长,细胞的存活率呈下降趋势。
3讨论
胶质瘤是常见的原发性颅内肿瘤,其中恶性胶
质瘤约占60%。其传统的治疗方式(手术治疗、化学
疗法、放射疗法)疗效很不理想。文献报道,近90%
恶性胶质瘤患者的平均生存时间在1.5年以内,是
神经外科中难治性疾病之~。近年来,恶性胶质瘤的
治疗效果未能得到明显改善。因此,开发或研制治疗
脑胶质瘤新药、新方法、新途径至关重要。
Jang等研究结果指出白藜芦醇具有抗癌作用。
它可以降低小鼠皮肤癌的发生率达98蹦。自藜芦醇
万方数据
·1696· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第11期2005年11月
对熙 一 9.260士o.o。72 9.4060士0.0085 0 5193士90965
自藜芦醇 31.25 9.2367士0.012l0 300士0.0327 0.371o士0.Ol6 3‘’
62.5 0.2313士0013++0.2447士0.0161。。0.2523士9.005B‘。
125 0.2160士O.∞95。。02040士0.0036。+01963士0.0049。’
250 0.2043士D.0081。。0.1997士00026’。0.18l9士0.0l80。’
500 0.1823士0.005l’’0.1690±0.0049‘。0.1456士0.0076‘。
0.ZZ60士9,0075 0,2477土0—0210 0.2787±0-0147
0.2143士0.0900 0.231l土0.0030 m253土0,013Z’’
0.2023士0.0156。。0.1897士0t0105。。0.1790士0.0095’’
0.1880士0,0072’‘0.1753土0.0145。。0.1560士0-0095。。
0.1847士0005l。。0.1540士0,0072。。仉1240土0-0106’’
0.165O士o.0095’’m1413土0.0035。。0.1127士0·0136。。
与对照组比较:一P—Pl1i
i|||哿40
l1誊
§:4:0
48 72
r川h
l~5—31.25、62·5、125、250、500pg/L
圈1 自尊芦醇作用浓度短时间与C6(A)、
TJgOS(B)细胞存活率的关系
Fig.1Relationshipbetweenco centrationand me
ofresveratroltreatmentandviabilityof
C6(A)andTJ90$(B)cells
的抗癌作用已引起人们的广泛关注。如对鼠肝细胞
癌、人肝母细胞瘤、乳腺癌等多种肿瘤均有抑制作
用。但其抗癌机制不太清楚。有学者认为:环氧化物
酶(cOx)能刺激肿瘤细胞生长和抑制免疫监视。
而白藜芦醇可能通过抑制cox活性起到抗癌作
用‘”“。本实验通过观察体外白藜芦醇对大鼠C6胶
质瘤细胞和TJ905人脑恶性肿瘤细胞的抑制作用,
探讨白藜芦醇抗胶质瘤的作用。结果表明白藜芦醇
具有抑制脑胶质瘤细胞的作用,但其机制有待进一
步研究。
Referenc№s:
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r”⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”⋯”⋯”⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。;
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; 为了加速中药现代化进程,促进中药产业的技术创新,我部编辑出版了以“新技术在中药现代化l
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;5.00元邮费。欢迎广大读者直接向《中草药》杂志编辑部/T阅,款到寄刊。
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万方数据
白藜芦醇抑制C6及TJ905胶质瘤细胞生长的研究
作者: 刘宏胜, 刘洪利, 王金环, 徐新女, 祁建滨
作者单位: 刘宏胜,王金环,徐新女,祁建滨(天津市第一中心医院,天津,300192), 刘洪利(天津市药科
中等专业学校,天津,300400)
刊名: 中草药
英文刊名: CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年,卷(期): 2005,36(11)
被引用次数: 3次

参考文献(4条)
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验外科杂志2006,23(3)
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