全 文 ：2. 5　重现性试验:取同一地黄药材5 份, 平行进行提
取测定,求得地黄苷 D 的含量为 0. 337% , 0. 351%,
0. 332% , 0. 341% , 0. 345% ; RSD 为 1. 9%。
2. 6　加样回收率试验:准确称取已知含量的同一地
黄样品粗粉 6份,每份 1. 0 g ,分别加入不同浓度对
照品溶液,按样品溶液制备方法进行提取, 以“2. 1
色谱条件”进行测定, 测得地黄苷 D的加样回收率
为 100. 6% , RSD= 2. 1%。
2. 7　样品的测定:将地黄药材粉碎过二号筛,精密称
取 1. 0 g, 置圆底烧瓶中, 加100 mL80%甲醇, 水浴加
热回流 2 h, 放冷, 过滤定容于 100 mL 量瓶, 取 10
mL, 挥干,加 10%乙腈定容于 50 mL,以微孔滤膜过
滤, 滤液作为供试品溶液,进样 20
L, 测得地黄苷 D
的峰面积,按外标一点法计算含量,结果见表1。
　　　　表 1　不同产地地黄中地黄苷 D 的含量 %
Table 1　Rehmannioside D in R. glutinosa
f rom dif ferent areas %
编号 产　地 级　别 地黄苷 D
　 1 山东嘉祥县 一级品 0. 387
2 山东嘉祥县 三级品 0. 193
3 山东济宁市效 一级品 0. 344
4 山东济宁市效 二级品 0. 230
5 山西襄汾县 二级品 0. 154
6 山西襄汾县 三级品 0. 149
7 山西曲沃县 一级品 0. 345
8 山西曲沃县 二级品 0. 342
9 河南温县 二级品 0. 200
10 河南温县 三级品 0. 185
11 河南武陟县 一级品 0. 333
12 河南武陟县 三级品 0. 137
13 河南博爱县 一级品 0. 691
14 河南博爱县 二级品 0. 547
15 陕西渭南 一级品 0. 396
16 陕西渭南 二级品 0. 230
　　由上述含量测定结果可见,地黄药材中地黄苷
D 的含量为 0. 137%～0. 691%。建议地黄药材中地
黄苷 D的含量应不低于 0. 15%。
3　讨论
3. 1　在样品提取条件的筛选试验中,曾分别采用
水、20%甲醇、50%甲醇、80%甲醇、甲醇、20%乙醇、
50%乙醇、80%乙醇、乙醇回流提取,提取液过滤, 定
容, 作为供试品溶液。进样 10
L 测定地黄苷 D 的
峰面积, 结果表明 80%甲醇回流提取 2 h,地黄苷 D
的提取率较高、杂质较少,故采用本法制备样品供试
品液。另外选 1%～6%的甲醇或乙腈作为流动相,
结果表明,流动相以 4%乙腈水可获得较好的分离。
3. 2　地黄药材由于其产地及品质的不同,其地黄苷
D 含量有显著差别。从8个不同产地的16份完整药
材样品中地黄苷 D的含量测定结果显示, 以道地优
级药材地黄苷 D的含量较高,质次三级药材含量较
低。为控制地黄药材的质量,建议地黄优级药材中地
黄苷 D的含量应不低于 015%。
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HPLC法测定马先蒿属三种药用植物中桃叶珊瑚苷的含量
李发荣1, 2 ,杨建雄2,田先华2

( 1. 西安交通大学电信学院, 陕西 西安　710049; 2. 陕西师范大学生命科学学院, 陕西 西安　710062)
摘　要:目的　建立马先蒿属 3 种植物中桃叶珊瑚苷的测定方法。方法　药材用乙醚脱脂后, 甲醇提取, V arian C18
柱; 流动相:甲醇-水( 15∶85) ; 检测波长: 204 nm ;流速: 0. 5 mL / min。结果　桃叶珊瑚苷在太白参、扭盔马先蒿、短
茎马先蒿中的含量分别为 0. 90% , 1. 94% , 0. 95% ;回收率分别为 102. 3% , 98. 2% , 97. 6%。结论　马先蒿属植物具
有较好的药用开发前景, 并为其质量评价提供参考。
关键词: 马先蒿属;桃叶珊瑚苷; HPLC
中图分类号: R282. 02　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2003) 08 0000 00
·754· 中草药　Chinese T raditional and Herbal D rug s　第 34 卷第 8 期 2003年 8月

收稿日期: 2002-11-06基金项目:陕西省自然科学基金项目( 2000SM20)作者简介:李发荣( 1972- ) ,男,陕西白水人,陕西师范大学生命科学学院,讲师,西安交通大学在读博士,主要从事中药药理学研究,发表论文 10篇。T el : ( 029) 5308451, E-mail : Lifarong12@ sohu. com
Determination of aucubin in three medicinal plants of Pedicularis Linn. by HPLC
LI Fa-rong1, 2 , YANG Jian-x iong2 , T IA N Xian-hua2
( 1. Elect ric and Information Eng ineering Instit ut e of Xi an Jiaotong Univ ersit y, Xi an 710049, China
2. Institute of L ife Science, Shaanx i Normal Univ ersity , X i an 710062, China)
Abstract: Object　T o set up a determinat ion method for aucubin in three medicinal plants of P edicu-
lar is L. Methods　T he medicinal her bs w ere defat ted by Et 2O, then ex t racted by MeOH and determined
by HPLC method. Varian C18 co lumn, mobile phase: M eOH-H2O ( 15∶85) ; detect ion w avelength: 204
nm, flow r ate: 0. 5 mL/ min. Results　The content of aucubin and its recovery in three medicinal plants
w er e as follow s: aucubin in P . d ecor a, in P . dav idii and P. art selaeri were 0. 90%, 1. 94%, 0. 95%; re-
covery rates w ere 102. 3%, 98. 2% , 97. 6% in P . artelaeri . Conclusion　Medicinal plants of Pedicularis
Linn. has a good explo it ing prospect , the r esearch can prov ide the reference for evaluat ing o f these medici-
nal herbs.
Key words : P edicular is Linn. ; aucubin; HPLC
　　马先蒿属( Ped icularis Linn. )是玄参科 ( Scro-
phulariaceae)中的一个大属, 共有 500余种植物,其
中在我国分布有 329种,是该属植物的分布中心,资
源十分丰富[ 1]。马先蒿属植物药用种类繁多,药用历
史悠久,在《神农本草经》、《晶珠本草》、《藏药经典》
等本草著作中皆有该属植物药用的记载[ 2]。现代药
理学和化学研究证明, 马先蒿属植物普遍含有环烯
醚萜苷或苯丙素苷类化合物,具有抗菌、保肝、降压、
利尿、清除自由基、抗肿瘤、抗氧化性溶血、DNA 碱
基修复 [ 3～7]等多种生理活性。但环稀醚萜苷在不同
植物中含量比较研究尚未见报道。本实验利用
HPLC 法对该属在民间应用较多, 疗效显著的美观
马先蒿(又称太白参、黑参 P . decor a Franch.等)及
其类同品短茎马先蒿 P . art selaer i Maxim .、扭盔马
先蒿 P . davidii Franch.中桃叶珊瑚苷的含量进行
测定,为该类药用植物的应用及开发提供依据。
1　仪器与材料
1. 1　仪器: Hitachi L-7100 高效液相色谱仪, Hi-
tachi L-7420紫外-可见检测器, Hitachi D-7000 色
谱工作站。
1. 2　材料:甲醇为色谱纯,实验用水为双蒸水,其余
试剂皆为分析纯; 桃叶珊瑚苷对照品(自制,经色谱
检测为单一峰, 并经红外光谱和质谱鉴定) ,太白参、
短茎马先蒿、扭盔马先蒿于 1999年 9月采自秦岭
梁,由田先华副教授鉴定。
2　方法与结果
2. 1　色谱条件: V ar ian C18柱( 250 mm×4. 6 mm ,
10
m) ;流动相: 甲醇-水( 15∶85) ; 检测波长: 204
nm ;流速: 0. 5 mL/ m in。在此条件下对照品及样品
的 HPLC图谱见图 1。
A-桃叶珊瑚苷　B-太白参　C-扭盔马先蒿　D-短茎马先蒿
A-au cubin　B-P . decora　C-P . ar tselaer i　D-P. davidi i
图 1　桃叶珊瑚苷及样品的高效液相色谱图
Fig. 1　HPLC chromatogram of aucubin and its samples
2. 2　标准曲线的制备:精确称取桃叶珊瑚苷对照品
3. 33 mg 置 50 mL 容量瓶中,加甲醇定容至刻度,摇
匀。精密吸取对照品溶液1, 3, 5, 7, 9
L 进样,以对照
品进样量对峰面积作图, 得回归方程: Y = 2. 385×
10- 7X + 2. 041×10- 2 ( r= 0. 999 2)表明桃叶珊瑚苷
在0. 0667～0. 599
g 和峰面积线性关系良好。
2. 3　提取条件选择: 方法 1:精确称量太白参粉末
(过 50目筛)各 1. 000 g ,置圆底烧瓶中,加入50 mL
乙醚提取 2 h,弃乙醚液,残渣用 40 mL 甲醇回流提
取 2次, 每次 1 h, 合并 2次提取液, 定容至 100 mL
·755·中草药　Chinese T raditional and Herbal D rug s　第 34 卷第 8 期 2003年 8月
摇匀,再从其中精确吸取 2. 50 mL, 用甲醇定容至
10 mL,微孔滤膜过滤即得供试品液。方法 2:太白参
经乙醚脱脂处理后,残渣用 40 mL 甲醇冷浸超声提
取 2次,每次 30 m in, 然后定容、稀释,制备供试液。
精密吸取供试液 10
L,进样分析。方法 1测得太白
参中桃叶珊瑚苷含量为 0. 902%, RSD = 1. 8% ( n=
5 ) , 方法 2 测得太白参中桃叶珊瑚苷含量为
0. 901% , RSD = 1. 4%( n= 5) , 显示两种提取方法
提取效果相当,本实验中提取方法选用方法 1。
2. 4　精密度试验: 分别取桃叶珊瑚苷对照品溶液 5

L,连续进样 6次,结果 RSD= 0. 38%。
2. 5　稳定性试验:按照 2. 3项下方法 1制备太白参
供试液, 室温放置, 在 1 周内每隔一定时间测定 1
次, 共测定 7 次, 结果测得桃叶珊瑚苷含量为
0. 902% , RSD = 2. 6% , 说明供试品溶液在 1 周内
基本稳定。
2. 6　加样回收率试验:分别精确称取3 种药材粉末各
0. 5 g, 每种药材各称3份,分别加入不同量对照品, 依样
品的制备及测定项下处理,计算平均回收率, 太白参为
102. 3% , RSD = 3. 0%; 扭盔马先蒿为 98. 2%,
RSD= 2. 6% ;短茎马先蒿为 97. 6% , RSD= 3. 4%。
2. 7　重现性试验:精确称量太白参、短茎马先蒿、扭
盔马先蒿根粉末(过 50目筛)各 1. 000 g, 每种样品
称量 5份,按照 2. 3项下方法 1分别制备太白参、扭
盔马先蒿、短茎马先蒿供试液,各精确吸取 10
L 进
样测定, 结果太白参 RSD = 1. 2% , 扭盔马先蒿
RSD = 0. 9% ,短茎马先蒿 RSD= 1. 4% ( n= 5) ,证
明此方法重现性良好。
2. 8　样品的制备及测定: 精确称量太白参、短茎马
先蒿、扭盔马先蒿根粉末(过 50目筛)各 1. 000 g ,照
2. 3项下方法 1 分别制备样品供试液, 各精确吸取
10
L 进样测定,结果见表 1。
　　表 1　马先蒿属 3 种药用植物中桃叶珊瑚苷的
含量测定结果( n= 5) %
　　Table 1　Result of aucubin in three plants
ofPedicularis L. %
植物种类 桃叶珊瑚苷含量 RSD
太白参 0. 90 1. 2
扭盔马先蒿 1. 94 0. 9
短茎马先蒿 0. 95 1. 4
3　讨论
3. 1　桃叶珊瑚苷是从太白参中分离得到并鉴定,在
扭盔马先蒿、短茎马先蒿样品液中分别加入少量桃
叶珊瑚苷对照品固体, 分别进样,两种样品色谱图显
示,与对照品保留一致的峰的面积上升,而其它峰未
见升高, 未见新峰出现, 从而确定扭盔马先蒿、短茎
马先蒿中桃叶珊瑚苷的存在。
3. 2　桃叶珊瑚苷属环烯醚萜苷类化合物,该类化合
物易被水解,尤其是在酸性条件下加热时可引起分
解, 产生的苷元性质活泼, 可以迅速聚合,产生难溶
物质,影响提取效果 [ 3] , 本实验提取条件研究显示,
甲醇回流提取与冷浸超声提取效果相当,说明样品
在甲醇回流提取条件下比较稳定,可用于分析测定
时的提取。
3. 3　桃叶珊瑚苷的测定方法有比色法等方法 [ 8] , 比
色法测定操作简单, 但由于显色反应特异性不高, 常
导致结果较实际值偏高, 不适用于精确定量测定, 用
HPLC 对其进行测定可以较好的克服这一缺点; 本
实验在流动相选用甲醇-水= 15∶85时, 3种药材中
桃叶珊瑚苷皆可以达到较好的基线分离、本方法简
便、重现性好,为上述 3种药材质量标准的建立提供
了可行的方法。
3. 4　桃叶珊瑚苷在玄参、车间、地黄、杜仲等中药中
存在,是其中的活性成分之一,是评价该类中药质量
的一个重要指标。本实验结果显示,太白参、短茎马
先蒿、扭盔马先蒿皆含有较多量的桃叶珊瑚苷,其中
扭盔马先蒿含量最高,太白参与短茎马先蒿含量相
近,所以民间将其作为类同品应用是有一定道理的,
在我们进行的相关药效学研究中也证明, 3者药效
相似,扭盔马先蒿作用效果更好,提示扭盔马先蒿是
更具开发前景的民间草药。
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·756· 中草药　Chinese T raditional and Herbal D rug s　第 34 卷第 8 期 2003年 8月