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Determination of resveratrol glucoside and resveratrol in radix and rhizome of Polygonum cuspidatum yielded in Hanzhong Region

汉中地区虎杖中白藜芦醇苷及苷元含量的测定



全 文 :图 1 柴胡属植物北柴胡 (A)和柴胡 (B)的 HPLC图谱
性成分的影响 ,易使环氧醚键开环 ,转化为柴胡皂苷
b1、 b2 ,因而通常采用弱碱性溶剂提取原生柴胡皂苷
a、 c、 d。本实验通过提取方法比较 ,选择了 5%氨水 -
甲醇溶液为提取溶剂 ,超声提取 60 min的提取
方法。
3. 2 由于柴胡皂苷 a、 c、 d的极性差异较大 ,且不同
品种柴胡的化学组分差异很大 ,用固定流动相进行
洗脱时不能使全部样品的柴胡皂苷 a、 c、 d得到良好
分离。因而本实验采用梯度洗脱 ,在上述梯度条件下
各样品中的 3种皂苷成分得到了良好分离。
3. 3 以柴胡皂苷 a、 c、 d为检测指标进行含量测定
结果表明:不同品种的柴胡 ,其柴胡皂苷含量差异悬
殊 ,以有效成分柴胡皂苷 a、 d含量之和计 , 23种柴
胡的含量从痕量到 6. 62% ,其中川滇柴胡、空心柴
胡、小柴胡的含量极低 ,其药用价值值得商榷 ;而多
枝柴胡、韭叶柴胡、汶川柴胡、丽江柴胡、四川柴胡的
含量均明显高于 2000年版《中华人民共和国药典》
规定使用的南、北柴胡 ,堪称为柴胡属植物中的上
品 ,其中多枝柴胡皂苷含量高达 6%以上 ,因此可考
虑扩大柴胡药用品种的范围 ,增加这些品种的栽培 ,
以满足市场需求。
参考文献:
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化学成分的研究 [ J] . 上海第一医学院学报 , 1984, 11( 1 ): 1-
13.
[2 ] 潘胜利 ,大桥裕 . 中国柴胡属药用植物の种类と分布——中国
药用柴胡の研究 (第 1报 ) [ J] . 药用植物研究 , 1996, 19( 1): 1-
17.
汉中地区虎杖中白藜芦醇苷及苷元含量的测定
周建军 ,张宏杰 ,杨培君 ,李会宁
(陕西省资源生物重点实验室 陕西理工学院 ,陕西 汉中  723000)
摘 要: 目的 测定汉中地区虎杖中白藜芦醇苷及苷元的含量。 方法 采用 HPLC法直接测定 ,色谱柱为 Eclipse
XDB C8柱 ,流动相为乙腈 -水 ,流速为 1 m L /min,检测波长为 303 nm。结果 虎杖中白藜芦醇苷的含量为 2. 5% ,
白藜芦醇的含量为 0. 43%。 结论 汉中地区虎杖中白藜芦醇的含量为首次报道 ,白藜芦醇苷的含量高于文献报道
的结果。
关键词: 虎杖 ;汉中地区 ;白藜芦醇苷 ;白藜芦醇 ; HPLC
中图分类号: R286. 02   文献标识码: A   文章编号: 0253 2670( 2002) 05 0414 03
Determination of resveratrol glucoside and resveratrol in radix and
rhizome of Polygonum cuspidatum yielded in Hanzhong Region
ZHOU Jian-jun, ZHANG Hong-jie, YAN G Pei-jun, LI Hui-ning
( Bio resources Key Labo rato ry of Shanxi Province, Shanxi Science
and Enginee ring Co lleg e, Hanzhong Shanxi 723000, China)
Abstract: Object  To determine the content of resv erat rol g lucoside and resv erat rol in radix and rhi-
zome o f Polygonum cuspidatum Sieb. et Zucc. yielded in Hanzhong Region. Methods  The HPLC method
w as used to assay resverat rol g lucoside and resv era tro l directly , using Eclipse XDB C8 column and acetoni-
trile-w ater as the mobile phase, the UV detection waveleng th was 303 nm, with a f low rate of 1 mL /min.
Results  The content of resv erat rol g lucoside w as 2. 5% and resverat rol was 0. 43% in the radix and rhi-
zome. Conclusion  The content of resv erat rol g luco side is higher than that in the former refernece. The
·414· 中草药  Chinese T raditional and Herbal Drug s  2002年第 33卷第 5期
收稿日期: 2001-08-14基金项目:陕西省教育厅专项科研基金资助 ( 01 JK094)作者简介:周建军 ( 1953-) ,男 ,陕西城固县人 ,副教授 ,硕士 , 1987年获西安医科大学医学硕士学位 ,现任陕西省资源生物重点实验室分析测试分室主任 ,主要研究方向为秦巴山区生物资源开发利用 ,已发表学术论文 20余篇。   Tel: 0916-2641835( H)
content of resv erat rol in the radix and rhizome o f P. cuspidatum in Hanzhong Region is fi rst reported.
Key words: Polygonum cuspidatum Sieb. et Zucc. ; Hanzhong Region; resv era tro l gluco side; resv era-
trol; HPLC
  虎杖 Polygonum cuspidatum Sieb. et Zucc.又
名斑根紫金龙、活血龙、阴阳莲 ,为蓼科多年生草本
植物 ,主要分布于华东 ,中南、辽宁、陕西、甘肃、四
川、贵州、云南等地 [1 ]。 虎杖的根和根茎具有多方面
的药理作用 [1~ 3 ]。
虎杖中的主要化学成分有蒽醌类、二苯乙烯类、
黄酮类、萘醌、多糖、氨基酸及微量元素等 ,其中二苯
乙烯类包括白藜芦醇苷及白藜芦醇 [1 ]。 王丹等 [4 ]用
甲醇提取 ,薄层层析 -紫外分光光度法和薄层扫描法
测定了虎杖中白藜芦醇苷含量约为 1. 2%左右 ,吴
叶等 [5 ]用 HPLC法测定虎杖中白藜芦醇苷的含量
仅为 0. 96%。 近几年 ,我们在白藜芦醇苷提取工艺
的研究中发现 ,汉中地区虎杖中白藜芦醇苷的含量
远远高于上述文献报道的结果 ,并且发现虎杖中不
仅有白藜芦醇苷 ,而且有白藜芦醇存在 ,但白藜芦醇
的含量尚未见报道。因此本实验采用 HPLC法对汉
中地区虎杖中白藜芦醇苷及白藜芦醇的含量进行了
测定。
1 仪器与试药
Series-1100型高效液相色谱仪 (美国惠普公
司 ) ,美国惠普化学工作站。溶剂过滤器 (奥特塞恩斯
仪器公司 ) ,样品过滤器 (西安惠恒科技有限公司 ) ,
电子天平 (瑞士梅特利公司 )。
白藜芦醇苷 (北京迪尔塔金生物工程公司 ,含量
99% ) ,白藜芦醇 (美国 Sigma公司 ,含量 99% ) ,甲
醇 (分析纯 ) ,乙腈 (色谱醇 ) ,重蒸水。
虎杖购自汉中地区药材公司 ,产地为秦岭南坡
中段陕西汉中地区 ,经汉中师范学院植物学教研室
杨培君副教授鉴定。 用植物粉碎机磨成细粉备用。
2 方法
2. 1 色谱条件: 色谱柱为 Eclipse XDB C8 ( 4. 6
mm× 150 mm, 5μm) ,白藜芦醇苷流动相为乙腈-水
( 15∶ 85) ,白藜芦醇流动相为乙腈 -水 ( 25∶ 75) ,流速
为 1 m L /min,检测波长为 303 nm ,进样量为 10μL。
2. 2 标准曲线的绘制: 精密称量白藜芦醇苷 6. 2
mg ,用甲醇溶解 ,定容至 100 mL,分别取 1. 25,
2. 50, 5. 00, 7. 50 mL,用流动相稀释至 25 mL,进
样 ,测定 ,将峰面积对应的白藜芦醇苷含量建立四级
校正曲线 ,其浓度对峰面积的直线回归方程为: Y=
0. 031 5X , r= 0. 996,其浓度在 0~ 18. 6μg /mL范
围内线性关系良好。精密称取白藜芦醇 10. 1 mg ,用
甲醇溶解 ,定容至 25 mL,分别取 0. 5, 1. 0, 2. 0, 4. 0
mL,用流动相稀释至 25 mL,进样 ,测定 ,以峰面积
对应的白藜芦醇含量建立四级校正曲线 ,其直线回
归方程为: Y= 0. 015 5X , r= 0. 999,其浓度在 0~
64. 64μg /mL范围内线性关系良好。 HPLC色谱图
见图 1-A, B。
2. 3 供试品的制备:精密称取虎杖粉 0. 500 g,用滤
纸包裹置于索氏提取器中 ,加甲醇 100 mL,置 67℃
恒温水浴中回流提取 8 h ,回收溶剂 ,转入 50 mL容
量瓶中 ,用甲醇定容至刻度 ,过滤 ,测定白藜芦醇苷
时取 0. 5 mL,测定白藜芦醇时取 1. 0 mL,用各自的
流动相稀释至 25 mL,作为供试品。 HPLC图谱见图
1-C, D。
A-白藜芦醇苷对照品  B-白藜芦醇对照品  C-样品中白藜芦醇苷  D-样品中白藜芦醇
图 1  HPLC图谱
2. 4 精密度试验:分别精密吸取白藜芦醇苷和白藜
芦醇对照品溶液 10μL ( 3. 10μg /mL, 3. 20μg /
m L) ,各进样 5次 ,分别测定。 白藜芦醇苷含量的
RSD为 1. 569% ,白藜芦醇的 RSD为 1. 558% 。
2. 5 重现性试验:精密吸取同一批提取液 10μL,
各进样 5次 ,分别测定 ,白藜芦醇苷含量的 RSD为
0. 297% ,白藜芦醇的 RSD为 0. 138% 。
2. 6 稳定性试验:白藜芦醇苷和白藜芦醇溶液避光
·415·中草药  Chinese T raditional and Herbal Drug s  2002年第 33卷第 5期
保存一周 ( 4℃~ 10℃ ) ,重复测定结果无差异。
2. 7 回收率试验:各取 3份已知白藜芦醇苷和白藜
芦醇含量的虎杖提取液 ,前者每份 0. 5 mL,后者每
份 1. 0 mL,分别加入白藜芦醇苷和白藜芦醇对照
2. 0 mL( 0. 1 mg ) ,用各自的流动相稀释到 25 mL,
分别测得白藜芦醇苷的回收率为 96. 7% , RSD为
0. 285% ; 白藜芦醇的回收率为 98. 4% , RSD为
0. 129% 。
2. 8 样品测定: 取虎杖粉 0. 500 g ,按 2. 3项下方法
制备 ,进样测定 ,结果见表 1。
表 1 汉中地区虎杖中白藜芦醇及
  白藜芦醇苷的含量 (n= 5)
批号 白藜芦醇 (% ) R SD(% ) 白藜芦醇苷 (% ) R SD (% )
1 0. 426 7 0. 27 2. 490 3 0. 38
2 0. 432 0 0. 67 2. 544 3 2. 14
3 0. 431 7 0. 29 2. 566 3 2. 56
3 讨论
结果表明 ,用甲醇提取、 HPLC法直接测定汉中
虎杖中白藜芦醇苷的含量为 2. 50% ,白藜芦醇的含
量为 0. 43% 。该结果可能与以下几个因素有关: ( 1)
本实验取用 0. 500 g原料 ,加入 200倍甲醇连续提
取 8 h,直接用 HPLC法测定 ,既保证了提取完全 ,
又减少了许多中间环节可能造成的流失 ,从而提高
了收率。 ( 2)采用 HPLC法测定 ,在反复试验的基础
上 ,白藜芦醇苷的流动相选用 15%的乙腈水溶液 ,
白藜芦醇的流动相选用 25%的乙腈水溶液 ,使苷的
出峰时间保持在 6~ 7 min,白藜芦醇的出峰时间保
持在 7~ 8 min,既可取得较短的保留时间 ,又不受
杂质峰的影响 ,具有灵敏度高、重复性好的优点。
( 3)本实验所用虎杖产自汉中地区 (秦岭南坡 ) ,文献
报道不同地区虎杖中蒽醌类含量差别较大 [1 ] ,但不
同地区虎杖中白藜芦醇苷含量的差别尚未见报道 ,
是否汉中地区虎杖中白藜芦醇苷的含量高于其它地
区 ,有待进一步作比较研究。
王丹等 [4 ]在薄层上也观察到白藜芦醇的斑点 ,
但没有对白藜芦醇含量进行测定。本实验结果证明 ,
虎杖中不仅有大量的白藜芦醇苷 ,而且有 0. 43%左
右的白藜芦醇存在 ,为虎杖在医药、保健品等方面的
开发利用提供了实验依据。
参考文献:
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北京:学苑出版社 , 1998.
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醇苷、陈皮苷的含量 [ J ]. 中成药 , 1999, 21( 5): 226-228.
延胡索生物碱溶出规律的研究
邹节明 ,王力生 ,云 强
(桂林三金药业股份有限责任公司 ,广西 桂林  541004)
摘 要: 目的 考察延胡索药材在醇提、水煮、人工胃液浸出三种情况下炮制与否对总生物碱溶出的影响。 方法 
紫外分光光度法。结果 醋制品较生品有利于总生物碱的溶出 ,醇提对总生物碱的溶出明显优于其它两种方法。结
论 传统的醋制工艺对延胡索的制剂具有较广泛的合理性 ,并且在条件允许的条件下 ,对延胡索尽可能采用醇提
工艺。
关键词: 延胡索 ;醋制 ;总生物碱 ;紫外分光光度法
中图分类号: R286. 02   文献标识码: B   文章编号: 0253 2670( 2002) 05 0416 02
Studies on dissolubility rule of alkaloids inCorydalis ambigua
ZOU Jie-ming , WANG Li-sheng , Yun Qiang
( Guilin Sanjin Pha rmaceutical Group Co . , Ltd. , Guilin Guangx i 541004, China )
Key words: Corydalis ambigua Cham. et Schlech t. ; vinegar t reatment; tota l alkaloids; UV spec-
trophotometry
·416· 中草药  Chinese T raditional and Herbal Drug s  2002年第 33卷第 5期
收稿日期: 2001-10-31