全 文 ：湖北贝母镇咳、祛痰、平喘药效部位的筛选
张勇慧 1 ,阮汉利 1 ,曾凡波 1 ,皮慧芳 1 ,赵　薇 2 ,吴继洲 1
( 1. 华中科技大学同济医学院药学院 ,湖北 武汉　 430030; 2. 武汉大学化学与分子科学学院 ,湖北 武汉　 430071)
摘　要: 目的　以镇咳、祛痰、平喘为药效学指标 ,跟踪湖北贝母活性部位。 方法　以不同溶剂提取湖北贝母浸膏 ,
经药理筛选得到最佳提取溶剂的组分。 再分别以酸碱法和溶剂法对最佳提取溶剂的组分浸膏进行分离 ,得到活性
部位。 结果　 50% 乙醇是最好的提取溶剂 ;综合分析不同部位的镇咳、祛痰、平喘活性实验结果 ,样品 C即酸碱法
的氯仿部位 (主要含生物碱 )效果较好。结论　酸碱法的氯仿部位 (即总生物碱 )是其镇咳、祛痰、平喘综合活性较
好的部位 ,实验结果与文献关于贝母呼吸系统活性在生物碱部位的报道相一致。
关键词: 湖北贝母 ; 镇咳 ; 祛痰 ; 平喘
中图分类号: R286. 4　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2003) 11 1016 03
Effective part screening on antitussive, expectorant and antiasthmatic
activities of Fritillaria hupehensis
ZHANG Yong-h ui1 , RU AN Han-li1 , ZEN G Fan-bo1 , PI Hui-fang1 , ZHAO Wei2 , WU Ji-zhou1
( 1. Sch oo o f Pha rmacy o f Tong ji Medical Co lleg e, Hua zhong Univ ersity of Science and Tech no lo gy , Wuhan 430030,
China; 2. Schoo l o f Ch emical and Mo lecula r Science, Wuhan Univ ersity, Wuhan 430071, China )
Abstract: Object　 To track the ef fectiv e part of antitussiv e, expectorant and antiasthmatic activi ties
o f Fri tillaria hupehensi Hsiao et K. C. Hsia. Methods　 Different solvents were used to ex t ract the Beimu
powder , and to g et the ex traction of the best solvent acco rding to the activi ties. Af ter that , the ex t raction
w as isola ted w ith the acid-base method and so lv ent method, to obtain the ef fectiv e part. Results　 Ethanol
50% is the best ex t racting solv ent. The third sample-CHCl3 part o f acid-base method ( mainly containing
alkaloids) is bet ter acco rding to th e antitussive, expectorant and antiasthma tic activi ties.　 Conclusion
CHCl3 part of acid-base method ( mainly containing alkaloids) is the most ef fectiv e part o f anti tussiv e, ex-
pectorant and antiasthmatic. This result is coincidence wi th the li tera ture that the activ e part o f respiratory
system of the plants of Fritillaria L. is the alkaloid par t.
Key words: Frit illaria hupehensis Hsiaoet K. C. Hsia; antitussive; expecto rant; antiasthmatic
　　中药贝母系百合科贝母属 (Fri tillaria L. )多
种植物的干燥鳞茎 ,在我国有悠久的药用历史。一般
依其功效分为浙贝和川贝两大体系 ,一直为清热润
肺、止咳化痰之要药 ,临床上有以贝母入药的多种中
药制剂在发挥着防治疾病的良好作用。湖北贝母原
野生于鄂西自治州 ,俗称“板贝”或“窑贝” ,民间习作
川贝药用 ,历史悠久。 1991年湖北贝母被《中华人民
共和国卫生部药品标准》收载 [1 ] ,现已收载于《中华
人民共和国药典》 2000年版中 ,发展成为仅次于浙
贝母的第二大主流品种。吴继洲等运用现代分离方
法和波谱技术对湖北贝母的化学成分作了较为全面
的研究。本研究从新药开发的角度 ,以镇咳、祛痰、平
喘为药效学指标 ,跟踪其活性部位 ,期望能寻找到天
然、高效、低毒的镇咳、祛痰、平喘药物。
1　材料
1. 1　动物: 昆明种小鼠 ,雌雄各半 ,体重 ( 20± 2)
g; SD大鼠 ,体重 150～ 220 g;豚鼠 ,雌雄兼用 ,体重
( 170± 20) g ,均由本校实验动物中心提供。
1. 2　仪器及试剂: RE— 52A型旋转蒸发仪 ,上海亚
荣生化仪器厂 ;各种化学试剂 ,分析纯。
1. 3　药物的提取与分离: 取湖北贝母鳞茎研粉 ,过
20目筛 ,称取贝母粉 5份 ,分别用 95% , 75% ,
50% , 30% 乙醇和 50% 丙酮水溶液各提取 3次 ,每
次 1. 5 h ,提取液合并后浓缩至膏状。将各提取浸膏
配成相当于生药材 2 g /100 mL的水混悬液 ,分别
编号为 Ⅰ ～ Ⅴ 。Ⅲ号分别以酸碱法和溶剂法进行分
离 ,得到酸碱法正丁醇组、溶剂法水提组、酸碱法氯
·1016· 中草药　 Chinese T raditional and Herba l D rugs　第 34卷第 11期 2003年 11月
收稿日期: 2003-03-18基金项目: 湖北省科技厅重大社会发展基金项目 ( 972P1102)作者简介: 张勇慧 ( 1972— ) ,男 ,湖北浠水人 ,华中科技大学同济医学院药学院讲师 ,博士 ,主要从事天然活性成分及中药新药开发研究。 Tel: ( 027)
83657870　 E-mail: zhangyh@ mails. t jmu. edu. cn
仿组、酸碱法氯仿盐酸盐组 ( p H 5)、溶剂法醋酸乙
酯组、酸碱法氯仿硫酸盐组 ( p H 4. 5)、溶剂法正丁
醇组 7个不同部位 ,编号为 A～ G,分别配成相当于
生药材约 20 g /100 mL水混悬液 ,备用。
2　实验方法
2. 1　镇咳实验:取体重 ( 20± 2) g小鼠 ,雌雄各半 ,
随机分组 ,各组 ig给药 , 1 h后 ,将小鼠置于倒置的
500 mL烧杯内 ,用 1 mL注射器吸取氨水 0. 15 mL
注入烧杯内放的棉球中 ,观察咳嗽潜伏期和 3 min
内咳嗽次数。
2. 2　祛痰实验
2. 2. 1　酚红标准曲线的测定:分别配制标准浓度酚
红溶液 ,以分光光度计测定吸光度 ( A ) ,以 A对酚
红含量 C回归 ,得回归方程 A= 0. 042+ 1. 105 C ,
r= 0. 99。
2. 2. 2　方法:取体重 ( 20± 2) g小鼠 ,雌雄各半 ,随
机分组 ,实验前禁食不禁水 12 h, ig给药 ,给药后
0. 5 h ip 0. 5% 酚红溶液 0. 5 m L, 30 min后处死小
鼠 (尽量不损伤气管 ) ,仰位固定于手术板上 ,剪开
颈正中皮肤 ,分离气管 ,于喉头下将平头针头插入气
管内 0. 3 cm,用丝线结扎固定后以 1 mL注射器吸
取 5% NaHCO3溶液 0. 5 mL,通过针头来回灌洗呼
吸道 3次 (每次不作停留 ) ,将灌洗液注入一比色管
中 ,重新吸取 5% NaHCO3溶液 0. 5 mL如上再灌洗
3次 ,再同样灌洗 3次 ,如此共抽洗 9次 ,合并洗出
液 ,用分光光度计在波长 546 nm处测 A值。
2. 3　平喘实验: 取 ( 170± 20) g豚鼠 (幼年豚鼠 ) ,
雌雄均可 ,逐一测定引喘潜伏期 ,挑选合格者。 将豚
鼠放入 402型超声雾化器中 ,以 53 kPa ( 400
mmHg )的恒压喷入 2% 氯化乙酰胆碱和 0. 4% 组
胺的等量混合液 15 s,密切注意豚鼠的反应 ,观察 6
min内豚鼠出现喘息性抽搐的潜伏期即引喘潜伏期
(从喷雾停止到出现喘息性抽搐的时间 ) 与发生抽
搐的动物数。 如见到豚鼠跌倒应立即取出 ,以免死
亡 ,并记录引喘潜伏期 ,若引喘潜伏期大于 150 s则
认为不敏感而不予选用 ,次日将合格豚鼠按体重随
机分组 , ig给药 ,用药 30 min后以同样条件引喘并
测定引喘潜伏期与发生抽搐动物数的变化。
3　结果
3. 1　不同溶剂提取物的镇咳、祛痰、平喘活性: 见表
1～ 3。 镇咳作用: 各样品均显示不同程度镇咳作用 ,
与生理盐水对照组比较差异显著 ,其中样品Ⅲ显示
非常显著的镇咳作用 ,与对照组比较差异非常显著。
祛痰作用:样品Ⅳ显示显著性祛痰作用 ,与生理盐水
对照组比较差异显著 ;样品Ⅰ 和Ⅲ也显示较好的祛
痰活性。平喘作用:各样品用药前后引喘潜伏期差值
都有较大的增加 ,其中样品Ⅰ 和Ⅲ用药前后引喘潜
伏期差值与生理盐水对照组比较差异显著。 各样品
均显示较好的镇咳、祛痰、平喘活性 ,综合分析各样
品 3种活性实验结果 ,样品Ⅲ效果最佳 ,故对样品
Ⅲ进行进一步的药理筛选与追踪。
表 1　湖北贝母不同溶剂提取物镇咳作用 ( x± s, n= 10)
Table 1　 Antitussive eff ect of extracts of F . hupehensis
with dif ferent solvents (x± s, n= 10)
组　别 剂　量
/ ( g· kg- 1)
咳嗽潜伏期
/ s
咳嗽次数
/(次· 3 min- 1)
生理盐水 　　 - 47. 46± 6. 87 72. 89± 15. 54
福尔可定 　　 0. 040 98. 34± 34. 17* * 31. 33± 16. 09* * *
Ⅰ 0. 8 66. 63± 21. 73* 61. 80± 14. 03
Ⅱ 0. 8 56. 05± 15. 64 48. 70± 24. 98*
Ⅲ 0. 8 75. 74± 18. 40* * 35. 00± 19. 82* *
Ⅳ 0. 8 61. 92± 17. 95* 56. 70± 14. 64*
Ⅴ 0. 8 56. 00± 22. 57 37. 80± 23. 05* *
　　与生理盐水组比较: * P < 0. 05　* * P < 0. 01　* * * P < 0. 001
　　* P < 0. 05　* * P < 0. 01　* * * P < 0. 001 vs NS group
表 2　湖北贝母不同溶剂提取物祛痰作用 ( x± s, n= 10)
Table 2　 Expectorant eff ect of extracts of F . hupehensis
with dif ferent solvents ( x± s, n= 10)
组　别 剂量 /( g· kg- 1 ) A值
生理盐水 - 　 0. 171± 0. 066
愈创木酚甘油醚 0. 1 0. 295± 0. 104*
Ⅰ 0. 8 0. 276± 0. 104
Ⅱ 0. 8 0. 153± 0. 030
Ⅲ 0. 8 0. 275± 0. 093
Ⅳ 0. 8 0. 309± 0. 127*
Ⅴ 0. 8 0. 210± 0. 034
　　与生理盐水组比较: * P < 0. 05
　　* P < 0. 05 vs N S group
表 3　湖北贝母不同溶剂提取物平喘作用 (x± s, n= 6)
Table 3　 Antiasthmatic ef fect of extracts of F . hupehensis
with diff erent solvents (x± s , n= 6)
组　别 剂　量
/( g· kg- 1)
引喘潜伏期 /s
用药前 用药后 差值
生理盐水 　- 60. 00±11. 53 65. 33± 15. 18 5. 33±　4. 72
盐酸麻黄碱 　 0. 025 57. 66± 5. 50 195. 66±142. 86 138. 00±137. 36
Ⅰ 0. 25 50. 00±11. 78 76. 33± 10. 02 26. 33±　5. 86* *
Ⅱ 0. 25 43. 00± 4. 58 69. 00± 19. 00 26. 00± 14. 22
Ⅲ 0. 25 54. 66±14. 01 79. 33±　7. 76 24. 67±　6. 66*
Ⅳ 0. 25 52. 00± 9. 54 64. 33± 10. 50 12. 33±　1. 15
Ⅴ 0. 25 44. 33± 7. 02 78. 66± 26. 50 34. 33± 19. 50
　　与生理盐水组比较: * P < 0. 05　* * P < 0. 01
　　* P < 0. 05　* * P < 0. 01 vs N S g rou p
3. 2　不同分离部位的镇咳、祛痰、平喘活性: 见表
4～ 6。镇咳作用:样品 B, C, D, F, G显示显著的镇咳
作用 ,与生理盐水组比较差异显著。祛痰作用:各样
·1017·中草药　 Chinese T raditional and Herba l D rugs　第 34卷第 11期 2003年 11月
品与生理盐水组比较未显示显著性祛痰作用 ,此结
果可能与样品剂量有关。平喘作用:各组均显示一定
的平喘活性 ,其中样品 A显示显著的平喘活性 ;样
品 C, F, G用药前后引喘潜伏期差值也有较大的增
加 ,但由于个体之间差异较大 ,统计差异未显示显著
性 ,可能是动物数较少之故。
表 4　湖北贝母不同部位镇咳作用 ( x± s , n= 10)
Table 4　 Antitussive ef fect of dif f erent f ractions
inF . hupehensis (x± s, n= 10)
组　别 剂　量
/( g· kg- 1 )
咳嗽潜伏期
/s
咳嗽次数
/ (次· 3 min- 1 )
生理盐水 　　 - 37. 83± 21. 71 66. 17± 18. 43
福尔可定 　　 0. 040 52. 83± 14. 65 22. 83± 7. 81* *
A 2 42. 33± 6. 74 50. 83± 25. 18
B 2 35. 50± 10. 52 41. 00± 20. 71*
C 2 53. 50± 15. 57 35. 50± 13. 11* *
D 2 57. 33± 25. 84 21. 17± 15. 05* * *
E 2 40. 00± 15. 70 42. 17± 35. 02
F 2 69. 00± 28. 54 18. 33± 23. 23* *
G 2 73. 00± 28. 25 16. 25± 7. 37* * *
　　与生理盐水组比较: * P < 0. 05　* * P < 0. 01　* * * P < 0. 001
　　* P < 0. 05　* * P < 0. 01　* * * P < 0. 001 vs N S g rou p
表 5　湖北贝母不同部位祛痰作用 ( x± s , n= 10)
Table 5　 Expectorant ef fect of dif ferent f ractions
inF . hupehensis (x± s, n= 10)
组　别 剂量 / ( g· k g- 1 ) A值
生理盐水 　　　　 - 　　 0. 152± 0. 07
愈创木酚甘油醚 　　　　 0. 1 0. 351± 0. 16*
A 2 0. 203± 0. 09
B 2 0. 199± 0. 14
C 2 0. 214± 0. 09
D 2 0. 195± 0. 10
E 2 0. 177± 0. 10
F 2 0. 224± 0. 09
G 2 0. 192± 0. 07
　　与生理盐水组比较: * P < 0. 05
　　* P < 0. 05 vs NS g roup
表 6　湖北贝母不同部位平喘作用 (x± s , n= 6)
Table 6　 Antiasthmatic ef fect of dif ferent f ract ions
inF . hupehensis (x± s , n= 6)
组　别 剂　量
/( g· kg- 1 )
引喘潜伏期 /s
用药前 用药后 差值 /s
生理盐水 　 - 48. 75± 8. 88 47. 75± 7. 27 - 1. 00± 4. 83
盐酸麻黄碱 　 0. 02 46. 33± 5. 13 52. 67± 3. 51 6. 30± 2. 08
A 2 40. 67± 4. 16 50. 00± 4. 36 9. 33± 0. 58*
B 2 40. 33± 9. 07 51. 67±14. 22 8. 00± 11. 79
C 2 50. 67± 3. 79 82. 67±51. 47 32. 00± 47. 76
D 2 46. 00±10. 15 53. 00± 9. 54 7. 00± 15. 62
E 2 48. 33± 5. 51 56. 67± 5. 03 8. 34± 9. 29
F 2 44. 00± 7. 81 55. 67± 7. 23 11. 67± 15. 04
G 2 40. 33± 3. 21 58. 00±13. 74 17. 67± 15. 14
　　与生理盐水组比较: * P < 0. 05
　　* P < 0. 05 vs N S g roup
4　讨论
　　根据不同溶剂提取物的镇咳、祛痰、平喘活性 ,
得出 50% 乙醇是最好的提取溶剂。综合分析不同
部位的镇咳、祛痰、平喘活性实验结果 ,样品 C (主
要含生物碱 )效果较好 ,这与文献关于贝母呼吸系
统活性在生物碱部位的报道一致。 据此笔者将对样
品 C作进一步分离 ,直至单体并探索生物活性。
References:
[1 ]　 Xiong W , Gu o X L, He J L, et al . Preliminary ph amacologi-
cal s tudies on Fr itil la ria h upehensis Hsiao et K. C. Hisa [ J].
Ch in Tra dit Herb Drugs (中草药 ) , 1986, 17( 3): 19-22.
[2 ]　 Yao L N, Sun HQ, Qi Y D, et al . Respi ratory s ystem phar-
macological activit ies of the crude alkaloids of Fri til lar ia h u-
pehensis Hsiao et K. C. Hisa, F rit illaria ebeiensis G. D. Yu
et G. Q. Ji and Fri til lar ia ebeiensi s var. purp urea G. D. Yu et
P. Li [ J] . Acta Univ Med Tongj i (同济医科大学学报 ) ,
1993, 22( 1): 47.
[3 ]　 Sun H Q, Yao L N , Ch en D Z, et al . Pharmacological s tud-
ies on the crude alkaloids of th ree Beimus [ J] . Pharmacol
Clin Ch in Mater Med (中药药理与临床 ) , 1993, 9 ( Suppl ):
42.
[4 ]　 Xu S Y. Methodology in Phamacolog ical E xperiments (药理
实验方法学 ) [M ]. 2nd ed. Bei jing: People s Medical Pub-
lis hing House, 1994.
[5 ]　 Li Y K. Methodolog y in Phamacological Experimen ts on Chi-
nese Materia Medica (中药药理实验方法学 ) [M ] . Shang-
hai: Shanghai Science and Tech nology Publish ers , 1991.
党参、黄芪对实验性心肌缺血大鼠心电图影响的比较
张晓丹 ,佟　欣 ,刘　琳 ,朱英淑
(哈尔滨商业大学 药学院 ,黑龙江 哈尔滨　 150076)
摘　要:目的　比较党参与黄芪提取物对实验性心肌缺血大鼠的保护作用。方法　采用垂体后叶素 ( Pit)法建立心
肌缺血动物模型 ,以Ⅱ导联心电图 T波和 S-T段位移及心率的变化为指标 ,观察党参和黄芪对实验性心肌缺血大
·1018· 中草药　 Chinese T raditional and Herba l D rugs　第 34卷第 11期 2003年 11月
收稿日期: 2003-01-27作者简介: 张晓丹 ( 1958— ) ,女 ,哈尔滨人 ,教授 ,医学硕士 ,主要从事药理学研究。 Tel: ( 0451) 84838207