全 文 ：枢抑制作用, 大剂量则可能表现出较弱的中枢兴奋
作用。另一个值得注意的现象是, 除大剂量 (100
m gökg) E 外, PE、ES 和 PES 均使小鼠表现出自主
活动减少的现象, 这似乎与前面拮抗戊巴比妥钠催
眠作用相悖。有文献表明, 动物在受到某些刺激产生
惊厥之前会有一段静止状态的潜伏期[4, 5 ] , 可能本实
验记录自主活动的时间正好落在其中枢兴奋之前的
潜伏期内, 也可能药物中枢兴奋作用强度尚未达到
使动物自主活动增加的程度。而较大剂量的 E、PE
和 ES 与阈下剂量的戊四氮、烟碱和印防己毒素有
协同作用的实验结果一方面支持以上推测, 另一方
面也提示它们的中枢兴奋作用机制可能与多种神经
系统的功能有关, 至少与 r2氨基丁酸 (GABA ) 能神
经及N 胆碱能神经有关。PES 未表现出与以上致惊
剂有协同作用的结果及其在小剂量时表现的与戊巴
比妥钠催眠协同作用的结果均提示 PES 无明显的
中枢兴奋作用, 这与 PE 对中枢的兴奋作用不尽相
同。而 ES 具有和 E 相似的中枢兴奋作用。产生这
种现象的具体原因及它们对中枢神经系统的作用机
制尚待进一步研究。
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何首乌提取物对高胆固醇血症大鼠学习记忆及血脂的影响
赵　玲1, 李雅莉1, 靳洪涛2, 李　林1Ξ
(11 首都医科大学宣武医院 药理研究室、北京脑老化重点实验室, 北京　100053; 21 中国医学科学院
中国协和医科大学药物研究所 新药安全评价中心, 北京　100050)
　　阿尔茨海默病 (A lzheim er’s D isease, AD ) 是
痴呆中最常见的一种, 以记忆、语言和其他认知功能
的进行性障碍为特征。近年来, 越来越多的证据显示
胆固醇在 AD 发病过程中起着直接作用[1 ] , 现代研
究表明, 中药何首乌具有抗氧化、调血脂等作用, 本
室制备的何首乌提取物 (主要含二苯乙烯苷)经前期
研究表明, 具有改善拟 AD 动物模型学习记忆能
力, 促进神经营养因子及受体的表达等作用。本实验
用高胆固醇饲料长期喂养W istar 大鼠, 建立高胆固
醇血症大鼠模型[2 ] , 同时用何首乌提取物对本模型
进行药物干预, 观察其对动物学习记忆功能及血脂
的影响。
1　材料
111　动物及饲料: W istar 大鼠, 雄性, 体重 160～
180 g, SPF 级, 由首都医科大学实验动物中心提供,
许可证号: SYXK21120020047。高胆固醇饲料由 8817% 普通鼠饲料、1% 胆固醇、10% 猪油和013% 胆酸钠组成, 北京九江口饲料厂提供。112　药品与试剂: 何首乌提取物 [含二苯乙烯苷( 2, 3, 5, 4′2tet rahydroxyst ilbene222O 2Β2D 2gluco si2de ) 70% , T SG ], 由本室自行研制提取工艺, 委托中国医药研究开发中心加工, 批号 020823。舒降之片 (辛伐他汀) , 杭州默沙东制药有限公司提供, 批号02120。胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇 (LDL 2C) 测定试剂盒, 由首都医科大学首医临床科技中心提供。113　仪器:M o rris 水迷宫及分析软件, 由中国医学科学院中国协和医科大学药物研究所提供; 400 R低温离心机, 德国 H eraeu s 产品; Selectra2E 全自动生化测定仪, 荷兰威图产品。2　方法211　动物模型的建立及分组给药:W istar 大鼠, 雄性, 随机分为普通饲料对照组 (15 只) 和高胆固醇
·7721·中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 11 期 2004 年 11 月
Ξ 收稿日期: 2004202205
基金项目: 首都二四八重大创新工程项目 (H 010210130113) ; 国家重点基础研究发展计划“973”项目 (G2000057010) ; 北京市中医药重
点学科项目 (2001) ; 北京市自然科学基金资助项目 (7032013) ; 北京市科技新星计划项目 (H 020821390190) ; 首都医学发
展基金项目 (200223002)3 通讯作者　T el: (010) 63013355228816　 (010) 63132779
饲料喂养组 (90 只) , 饲喂 2 周后, 以体重为依据,
将高脂饲料喂养大鼠分为高脂模型组、T SG 3 个剂
量 (0103、0106、0112 gökg) 组和阳性对照药舒降之
( 01002 gökg) 组, 每组 18 只, 继续按前述方法饲
喂, 同时 ig 给药, 对照组和模型组 ig 同体积蒸馏
水, 每天 1 次, 8 周后开始进行行为学实验, 10 周后
禁食 16 h, 股动脉放血, 测血脂水平。
212　大鼠M o rris 水迷宫实验[3 ]
21211　定位航行试验: 试验共历时 4 d, 每天训练 2
次, 所选入池位置分别为站台所对及相邻象限, 将大
鼠于象限边缘 1ö2 弧度处头朝池壁入水, 同时摄像
机开始记录。记录大鼠找到站台的时间 (逃避潜伏
期) 和游泳路径。如大鼠在 120 s 内未找到站台者,
潜伏期记为 120 s。
21212　空间探索试验: 第 5 天上午撤除平台将大鼠
从任选的非平台象限, 面向池壁放入水中, 记录 2
m in 内大鼠在池中的游泳路径。然后, 分析大鼠在平
台象限游泳路径长度占总路径长度的百分比。
213　血清总胆固醇 (TC) 的测定: 按国产试剂法,
取 10 ΛL 血清加 110 mL 试剂 (批号 030801) , 37 ℃ 反应 10 m in, 以试剂空白校零, 520 nm 波长处测定吸光度 (A ) 值。计算 TC 水平。TC (mmo löL ) = A 标本öA 标准×标准浓度214　血清 LDL 2C 的测定: 按国产试剂法, 取 4 ΛL血清加 300 ΛL 试剂 (批号 030509) , 37 ℃ 反应 5m in, 加 100 ΛL 试剂, 37 ℃ 保温 5 m in, 以试剂空白校零, 600 nm 波长处测定A 值, 计算LDL 2C 水平。LDL 2C (mmo löL ) = A 标本öA 标准×标准浓度215　统计学方法: 各组数据均采用 SPSS 统计软件包处理, 以 x ±s 表示, 组间比较采用 t 检验。3　结果311　对高胆固醇血症大鼠M o rris 水迷宫游出时间及游出距离的影响:M o rris 水迷宫实验反映了动物的空间学习记忆能力。定位航行试验中, 模型组大鼠的逃避潜伏期和游出距离较正常组明显延长; 空间探索试验中, 模型组大鼠在平台象限游泳路径长度占总路径长度的百分比也较正常组明显缩短; 表明高胆固醇血症可引起动物的学习记忆障碍, 各给药组可明显改善模型大鼠的学习记忆能力。, 结果见表1、图 1。
表 1　TSG 对高胆固醇血症大鼠M orr is 水迷宫实验的影响 (x±s)
Table 1　Effect of TSG on M orr is water maze test in hypercholesterolem ic rats (x±s)
组别
剂　量ö(g·kg- 1) 动物ö只 逃避潜伏期ös第 2 天 第 3 天　　 第 4 天　　 平均值　 游出距离öcm第 2 天　　 第 3 天　　 第 4 天　　 平均值　　
正常 　　- 13 41116±201143 13177±131933 3 20152±201293 27198±361013 3 1 010183±4481163 417177±4581363 539142±514119 732106± 9031103 3
模型 　　- 18 65142±34153 32124±22135 38128±22115 45131±44105 1 540198±802191 863149±575128 949109±594158 1 117185±1 062162
TSG 　0103 17 30140±271523 3 20192±15162 18130±171573 3 23121±291243 3 796189±7141883 3 617138±398179 474122±4651863 635173± 7561153 3
0106 17 34191±171873 3 21187±19183 9118± 71723 3 21198±271943 3 904129±3861283 3 581165±499147 235154±2011843 3 573193± 6851773 3
0112 17 55150±32161 23161±18146 12158± 91353 3 30156±361403 3 1 375100±781118 629100±483173 302135±1951843 3 768178± 8941803
舒降之 01002 17 34168±241313 3 23172±19188 17179±241423 27138±321343 3 877177±5261233 3 581197±423122 397124±5401513 3 660194± 7201503 3
　　　与模型组比较: 3 P < 0105　3 3 P < 0101
　　　3 P < 0105　3 3 P < 0101 vs model group
与模型组比较: 3 P < 01053 P < 0105 vs model group
图 1　TSG 对高胆固醇血症大鼠空间探索试验的影响
F ig. 1　Effects of TSG on spatia l probe test
in hypercholesterolem ia rats
312　对高胆固醇血症大鼠血脂的影响: 高脂大鼠血
清 TC、LDL 2C 较正常大鼠明显升高, T SG 各剂量
组均能明显降低 TC 和 LDL 2C, 见表 2。 表 2　TSG 对高胆固醇血症大鼠血脂的影响 (x±s)Table 2　Effects of TSG on blood l ip ids of hyper-cholesterolem ic rats (x±s)组别 剂　量ö(g·kg- 1) 动物ö只 TCö(mmo l·L - 1) LDL 2Cö(mmo l·L - 1)正常 　　- 13 2181±01213 3 0143±01073 3模型 　　- 17 6164±0127 1142±0108T SG 　　0103 15 5194±0143 1120±01120106 14 5177±01193 1119±010630112 14 5165±01313 1113±01103舒降之 01002 17 5178±01253 1116±01083　　与模型组比较: 3 P < 0105　3 3 P < 0101　　3 P < 0105　3 3 P < 0101 vs model group4　讨论　　AD 是一种以学习记忆功能障碍为主症的神经系统退行性疾病, 其典型的病理改变为老年斑
·8721· 中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 11 期 2004 年 11 月
(SP)、神经原纤维缠结 (N FT ) 及神经元丢失。目前
AD 的确切发病机制尚不清楚, 其病因可能是多源
性的, 包括基因异常、代谢失调、脑血管因素、环境因
素等。近年研究表明, 胆固醇与 Β淀粉样蛋白 (am y2
lo id beta2p ro tein, A Β) 相互作用, 在 AD 的发病机
制中起着重要作用[2 ]。本实验采用长期喂饲高胆固
醇饲料的方法建立了高胆固醇血症大鼠, 发现大鼠
长期喂饲高胆固醇饲料后, 可出现高胆固醇血症和
学习记忆障碍, 表现为在M o rris 水迷宫的定位航行
试验中, 模型组的逃避潜伏期和游出距离较正常组
明显延长, 空间探索试验中, 模型组大鼠在平台象限
游泳路径长度占总路径长度的百分比也较正常组明
显缩短, 血清 TC 和 LDL 2C 升高, 表明高胆固醇血
症可引起动物的学习记忆障碍。
本实验表明, T SG 可明显改善模型大鼠的学习
记忆能力, 降低血清 TC、LDL 2C 水平, 说明 T SG
可改善高胆固醇血症引起的学习记忆障碍, 其作用
机制与降低血清 TC、改善脂质代谢等作用有关。本
研究为 T SG 临床治疗AD 提供了实验依据。
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染料木素对大鼠生殖毒性的实验研究 (Ë )
围产期毒性
许建宁1, 王全凯1, 崔　涛1, 罗玉姝1, 王四旺2Ξ
(11 中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所, 北京　100050; 21 第四军医大学药物研究所, 陕西 西安　710032)
　　染料木素系从豆科植物槐角 S op hora jap on ica
L. 的干燥成熟果实中提取的异黄酮单体成分, 是具
有弱雌激素样作用又非雌激素类化合物, 称之为植
物雌激素。流行病调查、动物实验和临床观察均发
现, 异黄酮通过抑制骨吸收和促进骨形成过程, 维持
骨代谢的动态平衡, 有效地预防骨质疏松[1, 2 ]。鉴于
染料木素是治疗骨质疏松症的有效药物, 为了保证
其安全使用, 本实验对其进行了大鼠的围产期毒性
试验。
1　材料与方法
111　药物: 染料木素由第四军医大学药物研究所提
供, 纯度> 98%。用蒸馏水将其配成混悬液。
112　动物: 三级健康W istar 大鼠, 由中国药品生物
制品检定所实验动物中心提供, 京动许字 (2000) 第
017 号。动物饲养于中国预防医学科学院二级动物
室 (医动字第 0124018 号) , 室内温度为 24～ 26 ℃,
相对湿度为 40%～ 60% ; 喂饲军事医学科学院实验
动物中心提供的清洁级繁殖鼠料[京许字 (2000) 013
号 ]; 动物进入动物室后适应环境 1 周。
113　试验方法[1, 2 ]: 健康W istar 雄、雌性大鼠各 84
只, 体重分别为 280～ 300 g 和 185～ 205 g。大鼠按
1∶1 合笼, 合笼时间不超过 5 d, 以查到阴栓确定为
交配成功, 计为妊娠第 0 天。将孕鼠随机分为 4 组,
溶剂对照组和 3 个给药组, 分别 ig 5 mL ökg 蒸馏水
和 16、160、480 m gökg 染料木素。从妊娠第 15 天至
哺乳第 28 天, 每日 1 次, 连续 ig 给药。仔鼠断乳后,
处死母鼠 (F0 代)。仔鼠 (F1 代) 生长至 28 d 断乳
时, 处死部分动物, 且各组均保留 19 窝, 每窝保留
F1 代雌、雄仔鼠各 2 只 (2 对)。
114　观察指标[1～ 3 ]
11411　观察母鼠每天的饮水、摄食等一般状况, 记
录母鼠妊娠期、哺乳期的体重变化、受孕率、死亡率、
妊娠分娩时间、产仔数、胎仔性别比例、胎仔的外观
畸形等。记录母鼠主要脏器 (心、肺、脾、肝、肾、子
宫)的质量并检查内脏畸形。
11412　观察仔鼠一般生活状况。记录仔鼠出生存活
率、哺乳存活率; 28 d 断乳时部分动物主要脏器
(心、肺、脾、肝、肾、睾丸ö子宫) 的质量并检查内脏
·9721·中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 11 期 2004 年 11 月
Ξ 收稿日期: 2004201208
作者简介: 许建宁 (1968—) , 女, 硕士, 副研究员, 硕士生导师, 主要从事化学物致突变、致癌机制和化学物安全性评价方面的研究及检测
工作, 专长为遗传毒理学。T el: (010) 83132918　E2m ail: Xu jiann ing@yahoo. com