全 文 ：中,以峰面积( Y )为纵坐标,龙胆苦苷浓度( X )为横
座标, 绘制标准曲线, 得到回归方程为: Y = 25
386. 6X - 2 648. 6, r= 0. 999 9,结果表明:龙胆苦苷
在 2. 42～14. 52
g / mL 范围内,进样量与峰面积呈
良好的线性关系。
2. 4　稳定性及精密度试验: 按上述色谱条件,取同
一样品,分别在 0, 0. 5, 2. 0, 4. 0, 5. 0 h 连续进样 5
次,进行测定,记录样品色谱峰峰面积积分值,结果
RSD 为 0. 6%。精密吸取一定浓度的对照品溶液,
连续进样 5 次, 记录对照品对应色谱峰峰面积,
RSD 为 0. 6%。结果显示在此实验条件下样品稳定
性及仪器精密度良好。
2. 5　加样回收率测定:精密称取已知含量的样品约
1 g, 精密加入龙苦苷对照品溶液 1 mL,按样品含量
测定操作, 结果平均回收率为 100. 8% , RSD 为
3. 5%( n= 3)。
2. 6　重复性试验: 取同一批号样品 5份, 按样品测
定项下操作, RSD 为 1. 6%。
2. 7　样品含量测定: 取鼻咽清毒颗粒约20 g,研细、
混匀,取其中约 2 g ,精密称定,准确加入 1 mL 甲醇
使粉末湿润, 然后加 100 mL 乙酸乙酯, 超声 1 h,并
用乙酸乙酯补足失去的量,过滤, 精密量取续滤液
10 mL, 蒸干, 残留物用流动相溶解并定容至 25
mL, 摇匀, 用 0. 45
m 微孔滤膜滤过, 即得。取 20

L 注入高效液相色谱仪中, 用外标一点法计算, 结
果见表 1。
表 1　鼻咽清毒颗粒中龙胆苦苷的含量(mg/ g)
批号 J0601A J0703A I0501A I0572A I0574A
含量 0. 534 0. 716 0. 786 0. 843 0. 668
　　续表 1
批号 I0504A I0523A I0571A I0576A I0575A
含量 0. 623 0. 825 0. 787 0. 787 0. 685
3　讨论
3. 1　检测波长的选择:取适量浓度的龙胆苦苷对照
品溶液,进行紫外扫描,得最大吸收波长为 270 nm。
3. 2　流动相的选择: 本实验通过采用甲醇-水的不
同比例以及不同量的冰醋酸为流动相进行试验, 确
定流动相为甲醇-水-乙酸( 28∶72∶0. 47) , 样品峰
能得到了较好的分离。
3. 3　温度的选择:由于本品的药物组成多,成分复
杂,不同成分受温度的影响不同,通过试验确定该实
验的温度为 29 ℃,以确保色谱的一致。
3. 4　样品的处理:龙胆苦苷是环烯醚萜类物质, 本
实验通过采用甲醇、正丁醇、乙酸乙酯, 以不同的时
间进行超声处理或回流, 确定本实验的方法简便、分
离度好、准确度高、重现性好, 回收率高,可作为鼻咽
清毒颗粒的质量控制方法。
独尾草多糖的超声提取及含量测定
刘金荣,江发寿,但建明, 王航宇,赵文斌

(石河子大学药学院, 新疆 石河子　832002)
　　独尾草系百合科独尾草属植物, 我国有 4种,新
疆产 3 种[ 1] , 其中粗柄独尾草 E remurus inderiensis
( M . Bieb. ) Regel 和异翅独尾草 E . anisop terus
( Ker. et kir ) Regel是生长在干旱、沙漠地区的特有
种, 是新疆沙漠地区抗旱抗沙的早春植物。独尾草以
根入药,具有祛风除湿、补肾强身之功效 [ 2]。在新疆少
数民族地区称其为西力力(维语译音) ,民间有用其根
焙干磨粉冲服,治疗消化道顽疾。近年来, 我们对粗柄
独尾草进行了研究,发现它除含蒽醌外,还含有大量
的多糖[ 3]。本实验采用超声提取法和苯酚-浓硫酸比
色法对独尾草多糖进行了研究。
1　仪器、材料与试剂
岛津 UV-2401PC 紫外可见分光光度计, DL-
360超声波仪( 35kHz, 浙江象山县石浦海天电子仪
器厂)。
独尾草采自下野地垦区, 经新疆药研所民族药
研究室张彦富研究员鉴定为粗柄独尾草 Er emur us
indriensis ( M . Bieb. ) Regel。葡萄糖对照品(分析
纯)。其它试剂均为分析纯。
2　标准曲线的制备
精密称取干燥至恒重的葡萄糖对照品,配成浓
度为 1. 002
g / mL 的对照品溶液, 精密吸取 0. 10,
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收稿日期: 2001-09-10作者简介:刘金荣( 1954-) ,女,河南淮阳人,副教授,主要从事天然药物的研究和分析。Tel: 0993-2057159
0. 20, 0. 40, 0. 60, 0. 80, 1. 00 mL, 分别加入 6 mL 苯
酚溶液和 30 mL 浓硫酸, 30 ℃恒温 30 m in后, 冷却
至室温, 定容到 50 mL, 在 490 nm 处测定吸光度
( A ) ,以不加样为空白。以浓度( C)对 A 回归,得方
程 A = 3. 525×10- 2 C+ 0. 013 36, r= 0. 999 5。样品
在 4. 00～12. 00
g/ mL 的范围内线性良好。
3　独尾草的提取和精制
取独尾草粉末 100 g ,经石油醚( 60 ℃～90 ℃)
500 mL 回流脱脂 2次,每次 1 h。再用 80%乙醇回
流提取2次,每次2 h,除去单糖和低聚糖。将药渣加
500 mL 水90℃水浴提取2次,合并提取液。旋转薄
膜蒸发仪上减压浓缩至 150 mL,加适量活性炭脱色
2次, 过滤,滤液加 5倍量 95%乙醇, 放置过夜, 抽滤
后的沉淀以 100 mL 水溶解重复醇沉一次。沉淀以
95%乙醇、无水乙醇、丙酮、乙醚依次洗涤, 60 ℃干
燥,即得独尾草多糖。
4　换算因素的测定
精密称取独尾草多糖 20. 00 mg ,置 100 mL 容
量瓶中,加少量水溶解并稀释至刻度, 摇匀作贮备
液。精密吸取贮备液 2. 00 mL,照标准曲线制备项下
的方法测定吸光度, 按下式计算换算因素,测得 f=
3. 829 4。
f= W / CD
W 为多糖重量 (
g ) ; C 为多糖中葡萄糖的浓度 (
g/
mL ) ; D为多糖的稀释因素。
5　回收率测定
精密称取样品粉末 0. 15 g, 加入一定量的独尾
草多糖,按样品液制备和含量测定方法操作,计算回
收率, 结果平均回收率为 100. 4%。RSD = 1. 56%
( n= 3)。
6　独尾草多糖含量测定
6. 1　常规方法:取独尾草粉末 0. 300 5 g ,置索氏提
取器中,加 80%乙醇 100 mL,回流提取 2 h,残渣用
80%乙醇洗至无色, 继续用水 100 mL 回流 2 h,反
复洗,然后置 250 mL 容量瓶中定容备用。精密吸取
各供试液 3. 0 mL,照标准曲线制备项下的方法测定
吸光度。按下式计算多糖含量,测得独尾草多糖含量
为 4. 33%。
多糖含量%= CDf/W×100
C 为供试液葡萄糖浓度(
g / mL ) , D 为供试品溶液的稀
释因素, f为换算因素 , W 为供试品重量(
g )。
6. 2　超声方法:称取经烘干处理的独尾草 0. 516 9
g 置 250 mL 锥形瓶中, 加 80%的乙醇120 mL 于超
声波仪上提取 2次, 每次 1 h。过滤, 滤渣加水 70 mL
于超声波仪上提取 40 min 后过滤, 合并两次提取
液, 然后定容于 250 mL 容量瓶中, 从中精密吸取
10. 0 mL, 照标准曲线制备项下的方法测定吸光度。
按 6. 1法计算多糖含量为 6. 36%。
7　讨论
用 80%乙醇提取目的是除去原料中的单糖、低
聚糖、苷类及蒽醌苷类成分。超声提取时间较长, 可
以保证除尽干扰物质。因独尾草中含大量的蒽醌类
成分,提取液颜色较深,用活性炭多次脱色处理。用
紫外可见分光光度法测定多糖含量,具有简便快速、
灵敏度高、重现性好的优点。
超声法提取多糖有较大的优势,提取时间短,勿须
加热,提取量多。另外超声波破碎过程是一个物理过
程,浸提过程中无化学反应,被浸提的生物活性物质在
短时间内保持不变, 生物活性不减,同时提高了破碎速
度,缩短了破碎时间,可极大地提高提取效率[ 4]。
植物多糖广泛存在于自然界,是许多天然药物
中的有效成分,具有抗衰老、抗溃疡与抗炎症、抗肿
瘤、降血糖、降血脂等多种生物活性[ 5]。独尾草多糖
的结构和生物活性以及作用机制还有待于进一步的
研究和探讨。
参考文献:
[1]　新疆植物志编辑委员会 . 新疆植物志(第六卷) [ M ] . 新疆:新
疆科技卫生出版社, 1996.
[ 2]　云南药材公司 . 云南中药资源名录 [ M ] . 北京:科学出版社,
1993.
[ 3]　刘金荣,江发寿,唐　辉 . 新疆沙生植物独尾草的化学成分研
究[ J] . 石河子大学学报, 2001, 5(增刊) : 38.
[4]　赵　兵,王玉春,欧阳藩,等 . 超声波在植物提取中的应用 [ J] .
中草药, 1999, 30( 9) :附 1-3.
[5]　田庚元,冯宇澄,林　颖 . 植物多糖的研究进展[ J ] . 中国中药
杂志, 1995, 20( 7) : 441.
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