全 文 ：中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第12期2005年12月·1883·
HPLC—ELSD法测定玉米须中p一谷甾醇
李钦“2，田智勇1，贾天柱2，许启泰1
(1．河南大学药学院，河南开封475001}2t辽宁中医学院，辽宁沈阳110032)
玉米须最早药用记载见于《滇南本草》，为禾本
科植物玉蜀黍ZeamaysL．的干燥花柱和柱头。为
《中国药典》1977年版收载品种o]。能够利尿消肿，
降血压。临床用于肾炎水肿，小便不利，湿热黄疽，高
血压症。口一谷甾醇为玉米须的主要有效成分之
一[2~“，实验证明p谷甾醇具有明显的降胆固醇、止
咳、抗癌、抗炎等药理作用。
目前国内外报道的分析p谷甾醇的方法有毛地
黄皂苷法、薄层扫描法、气相色谱法、高效液相色谱一
紫外检测法、HPLC—ELSD法““]。本研究采用蒸发
光散射检测器(ELSD)测定玉米须中p谷甾醇，与
以上方法比较具有对样品不必进行处理就可以直接
提取进样，能克服紫外检测甾醇时系统不稳定的困
难。在选定的色谱条件下，供试溶液中p一谷甾醇与相
邻组分分离度良好。经方法学考察，方法的重现性、
稳定性、精密度、回收率试验均符合有关规定，可用
于该药材的质量控制。
1仪器、试药与实验样品
仪器：13本岛津Lc一2010A液相色谱仪，
Class—VP工作站，SEDEx一75型蒸发光散射检测
器。B一谷甾醇对照品(中国药品生物制品鉴定所，批
号：0851—9601)经HPLC—ELSD归一法测定，质量分
数为98．3％，甲醇为色谱纯。玉米须(采自山东、河南
等地)。经河南大学生药学教研室张保国教授鉴定为
禾本科植物玉蜀黍ZeamaysL．的干燥花柱和柱头。
2方法和结果
2．1色谱条件：色谱柱：ShimpackCLC—ODS(250
mm×4．6mm)。流动相为：甲醇；体积流量：0．6
mL／min；ELSD检测器漂移管温度：40℃；载气流
速：3．5×105Pa。在此色谱条件下，p一谷甾醇峰的保
留时间约为4．2min，与共存的其他成分分离良好，
见图l，以口一谷甾醇峰计算色谱柱的理论板数为
2 443。
2．2对照品溶液制备：精密称取p一谷甾醇对照品适
量，加甲醇溶解，制成0．435mg／mL的溶液，作为对
门1——a。门呵—Zz。
t／rain
C
．JL，。．．．．．．．．．一r-T _r_—r__1-1
0 4 8 12 1620
A一口-各甾醇对照品B样品液C甲醇裕荆
Ae sltosterolB—testolutionCmethanol
圉1玉米须HPLC图谱
Fig-1HPLCchromatogramofcornsilk
照品溶液。
2．3供试品溶液制备：取玉米须粉末(过一号筛)约
3g(同时另取本品粗粉按照《中国药典}2005年版
一部附录ⅨH第一法测定水分)，精密称定，置索氏
提取器中，加入氯仿150mL，放置过夜，加热回流4
h，提取液浓缩至近干，残渣用甲醇使溶解，转移置
50mL量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜
(0．45“m)滤过，即得。
2．4线性范围考察：精密称取干燥至恒重的p一谷甾
醇对照品4．35mg，置10rnL量瓶中，加甲醇溶解并
稀释至刻度，摇匀，制成0．435mg／mL的溶液。分别
精密吸取2、5、10、15、20、25p-L溶液，注入液相色谱
仪中，测定色谱峰面积，以进样量的自然对数为横坐
标，峰面积的自然对数为纵坐标，绘制标准曲线，回
归方程为：Y：1．30783X+13．30917，r一
0．9992。表明8一谷甾醇对照品进样量在0．870～
10．875pg线性关系良好。
2．5精密度试验：取供试品溶液10pI。，在上述色
谱条件下连续进样6次，分别测定p谷甾醇峰面积，
结果8一谷甾醇峰面积自然对数RSD一1．16％，表明
仪器精密度良好。
2．6重现性试验：取同一批样品(山东临沭县)粉末
约3g，5份，精密称定，分别依法进行测定，得平均
值为6．97mg／g，RSD=1．93％。
鉴鍪晶眢：篙蓄吴擎薯学研究基金项目(xK03YBYxl64)
作者简介z李钦(1965)，男，河南中牟人，教授，博士。Tel：(0378)5956970E—mail：liqin@henu·edu．cn
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第12期2005年12月
2．7稳定性试验：取同一份供试品溶液分别在配制后0、2⋯468h进样测定，测得}谷甾醇峰面积自
然对数的RSD为1．85％，表明供试品溶液在8h内
稳定。
2．8回收率试验：取同一批样品(山东临沫县)粉末
约1．5g，5份，精密称定，精密加入口一谷甾醇对照
品溶液(o．435mg／mL)25．0mL，按样品测定项下
方法操作，测定，结果平均回收率98．2％，RSD为
1．10％。
2．9不同产地玉米须中牟谷甾醇的测定：分别精密
吸取上述对照品溶液2．10L，供试品溶液5～20
肚，注入高效液相色谱仪，测定峰面积，以外标二点
法对数方程求出p谷甾醇的量。结果表明，不同产地
玉米须中B一谷甾醇的差异较大，见表1。
表1不同产地玉米须中}谷甾醇“=3)
Table1 B—Sitosterolinc rdsilkofZ．maysfrom
differenthabitats(”=3)
3讨论
3．1 色谱条件的选择：选择色谱柱是保证分离测定
的首要条件，本实验对比了大连依利特HyperODS
C]8柱(250mm×4．6mitt)，日本岛津Shim—pack
VPODS柱(250mm×4．6mm)，发现Shim—pack
VP—ODS柱在本实验条件下p谷甾醇与其他组分
的分离情况良好，结果见图1。通过比较，选用甲醇
作为流动相既简单又能保证p谷甾醇与其他组分的
有效分离。
3．2供试品溶液制备方法的选择
3．2．1提取溶剂选择：根据B一谷甾醇的化学性质，
本试验分别用氯仿和石油醚为提取溶媒回流提取4
h，以p谷笛醇提取量为指标加以考察。结果表明，
氯仿提取效率较高，故选用氯仿为提取溶剂。
3．2．2回流提取时间考察：用氯仿为提取溶剂，对
不同回流时间进行了考察，结果提示，回流提取3
h，p谷甾醇的提取率较低，回流提取4、5h，口一谷甾
醇的提取率相近，为节约提取时间，故确立回流提取
时间为4h。
3．3本实验采用HPLC—ELSD法，测定玉米须中
p一谷甾醇的量，操作在常温下进行，样品不需要衍生
化处理，本方法灵敏度高，操作简便、快速，可广泛应
用于p一谷甾醇的测定，为玉米须中p谷甾醇的测定
提供了可靠的方法。结果可按外标两点法对数方程
计算。并对方法进行验证，标准曲线在0．870～
10．875mg／mL进样量的自然对数与峰面积的自然
对数线性关系良好。
3．4近年来研究表明，植物甾醇是一类具有生理活
性的物质，广泛地运用于医药、食品、化妆品等行业，
尤其是p谷甾醇，经实验证明其具有明显的降胆固
醇、消炎、抗癌、退热等疗效。因此甾醇的分离精制及
分析测定也受到研究者的普遍重视““。动物实验表
明，玉米须的乙醇提取物具有抗肿瘤作用，对骨癌细
胞SGC的体外抑制率为90．70％“⋯，p谷甾醇为玉
米须的有效物质之一。进一步研究玉米须p谷甾醇与
抗肿瘤的关系，对玉米须的开发利用具有重要意义。
3．5实验结果表明：不同产地玉米须中p谷甾醇的
量差异显著，河南省中牟县与山东省临沐县产的玉
米须中争谷甾醇的量较高，河南省新密市与西平县
产的玉米须中p一谷甾醇的量较低，可能与品种、采收
时间、产地等因素有关。
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万方数据
HPLC-ELSD法测定玉米须中β-谷甾醇
作者： 李钦， 田智勇， 贾天柱， 许启泰
作者单位： 李钦(河南大学药学院,河南,开封,475001;辽宁中医学院,辽宁,沈阳,110032)， 田智勇,许
启泰(河南大学药学院,河南,开封,475001)， 贾天柱(辽宁中医学院,辽宁,沈阳,110032)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(12)
被引用次数： 4次

参考文献(11条)
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