全 文 ：精取 5. 0 mL,甲醇定容至 10 mL,按上述色谱条件 ,
分别进样 20, 15, 10, 5, 2. 5μL,由数据处理机计算
各峰面积 ,以峰面积与对照品浓度进行线性回归 ,得
回归方程: Y= 4. 791× 10- 5X , r= 0. 999 9。
1. 5. 4　含量测定:分别精密吸取样品液 20μL,按上
述色谱条件测定 ,按外标二点法计算浓度。
1. 6　洗脱曲线的绘制:根据 1. 5. 4测定的结果计算
出每 5毫升洗脱液中延胡索乙素的含量 ,绘制 3种
型号树脂的洗脱曲线 ,见图 1。
图 1　 3种型号树脂的洗脱曲线
2　结果
根据测定结果分别计算出从 3种型号树脂上洗
脱下来的延胡索乙素占总生药 量 , D-101为
0. 069% , WLD-Ⅲ 为 0. 072% , DA-201为 0. 053%。
从洗脱曲线图上可以看出 , D-101和 W LD-Ⅲ洗脱
效果较好。不同之处是若洗脱下 0. 069%的延胡索乙
素 , D-101型树脂用乙醇 75 mL,而 WLD-Ⅲ型树脂
用乙醇 55 mL,再加乙醇可继续洗脱至 0. 072% 。因
此 ,两种树脂都可以参考 ,以 WLD-Ⅲ为佳。 吸附的
生药量为树脂的 1倍 ,用两倍树脂量的 95%乙醇能
基本洗脱完全。
3　讨论
3. 1　本实验采用大孔吸附树脂吸附样品后 ,先用
40%乙醇洗脱是为了除去干扰成分 ,便于 HPLC测
定 ,结果分离度好且保护了色谱柱。但是 , 40%乙醇
有可能洗脱下其它生物碱 ,因此 ,在实际生产中可根
据需要对这一步骤进行取舍。
3. 2　延胡索乙素在空气中不稳定 ,易受阳光照射或
温度的影响 ,脱氢氧化为结构稳定的巴马汀 [2 ]。在实
验操作中应尽量避免受热。
3. 3　经大孔吸附树脂提取分离的延胡索生物碱 ,成
品体积小 ,相对含量高 ,产品质量稳定 ,具有良好的
生理活性。
参考文献:
[1 ]　原永芳 ,李修禄 ,柳正良 ,等 . 超临界流体萃取及高效液相色谱
法分析延胡索中延胡索乙素的含量 [ J ] . 药学学报 , 1996, 31
( 4): 282-286.
[2 ]　周玲英 ,吴　晓 . 薄层扫描测定调经止痛胶囊延胡索乙素含量
[ J ]. 中成药 , 2000, 22( 3): 194-195.
HPLC法测定海洋胃药中胡椒碱的含量
戚宝婵 1 ,郭汉文 1 ,陈发奎 2
( 1. 辽宁省药品检验所 ,辽宁 沈阳　 110023; 2. 沈阳药科大学中药学院 ,辽宁 沈阳　 110016)
中图分类号: R286. 02　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670( 2002) 01 0038 02
　　海洋胃药由海星、陈皮、黄芪、胡椒等 9味中药
组成 ,为国家中药保护品种。 中华人民共和国药典
2000年版一部胡椒项下也有高效液相色谱法测定
胡椒碱的含量 ,但其采用内标法测定 ,需加内标物 ,
不适合成方制剂。 本文采用外标法测定海洋胃药中
胡椒碱的含量 ,操作简便、快速、重复性好 ,为控制产
品质量提供了依据。
1　仪器与试剂
日本岛津 LC-10A高效液相色谱仪 , Class-vp色
谱工作站 ;胡椒碱对照品购自中国药品生物制品检定
所 ,批号为 0775-9702,纯度为 98. 9% ;海洋胃药由大
连海洋药业有限公司提供 ,批号为 20000410。
2　方法与结果
2. 1　提取条件的选择: 以无水乙醇为提取溶剂 ,采
用超声提取 ,并对不同提取时间的样品含量进行了
考察 ,根据考察结果确定超声时间为 40 min。
2. 2　供试品溶液的制备: 取本品 10片 ,除去包衣 ,
研细 ,精密称取 0. 6 g ,置 50 mL棕色量瓶中 ,加无水
·38· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 1期
收稿日期: 2001-04-09作者简介:戚宝婵 ( 1963-) ,女 ,山东省济宁市人 ,副主任药师 , 1986年毕业于沈阳药科大学 ,主要从事中药检验及质量标准研究 ,发表科研论文 8篇。 Tel: 024-25854645
乙醇 40 mL,超声处理 40 min,放冷 ,加无水乙醇至
刻度 ,摇匀 ,滤过 ,弃去初滤液 ,收集续滤液 ,即得。
2. 3　色谱 条件: 色 谱柱为 Kromasi l ODS柱
( 200 mm× 4. 6 mm , 5μm) ,检测波长为 343 nm;流
动相为甲醇-水 ( 62∶ 38) ,手动进样 ,进样量 20μL,
流速 1 mL /min。在此条件下胡椒碱与其他成分达到
基线分离。
2. 4　线性关系考察: 精密称取胡椒碱对照品
10. 32 mg ,置 100 mL棕色量瓶中 ,加无水乙醇溶解
并稀释至刻度 ,摇匀 ;分别精密吸取上述溶液 0. 50,
1. 0, 2. 0, 3. 0, 4. 0 m L置 10 mL棕色量瓶中 ,加无水
乙醇溶解并稀释至刻度 ,摇匀 ;按上述条件测定 ,以
浓度为横坐标 ,峰面积值为纵坐标 ,绘制标准曲线 ,
经计算回归方程为 A= 6. 47× 106C- 38 105. 3, r=
0. 999 3,由此可见 ,胡椒碱在 0. 103 2～ 0. 825 6μg
范围内线性关系良好。
2. 5　稳定性试验:取供试品溶液按上述条件分别在
0, 1, 2, 3, 4 h进样 , RSD为 1. 28% ,结果表明 ,供试
品溶液在 4 h内稳定。
2. 6　重复性试验:取同一批号样品按含量测定方法
重复测定 5次 ,其含量均值为 0. 984 mg /g , RSD为
1. 06%。结果表明本方法重复性良好。
2. 7　精密度考察:取供试品溶液按上述条件连续进
样 5次 ,RSD为 1. 73% ,结果表明方法精密度良好。
2. 8　 回收 率试 验: 精密 称取 样品 (含量 为
0. 984 mg /g ) 5份 ,每份为 0. 3 g ,分别精密加入对照
品溶液 (浓度为 0. 103 2 mg /mL) 3. 0 mL,按含量测
定方法测定 ,计算回收率 ,平均回收率为 98. 29% ,
RSD= 1. 5% (n= 5)。
2. 9　空白干扰试验:按样品处方工艺制成不含胡椒
的阴性对照液 ,用与样品相同的色谱条件测定 ,在与
胡椒碱相同保留时间处无干扰峰 ,见图 1。
A-对照品　 B-样品　 C-阴性
图 1　海洋胃药的 HPLC图
2. 10　样品测定:按含量测定方法共测定了 3批样
品 ,每片含量分别为 0. 400, 0. 339, 0. 300 mg。
3　讨论
3. 1　由于海洋胃药由 9种中药组成 ,干扰成分较
多 ,为了使胡椒碱与其他成分达到有效的分离 ,我们
通过反复调整流动相的比例 ,最终确定甲醇-水
( 62∶ 38)为流动相 ,使胡椒碱与其他成分达到基线
分离。
3. 2　胡椒碱见光不稳定 ,逐步分解变化 ,操作时应
尽量避光 ,样品应保存在棕色瓶中 ,样品进样应在进
样前吸取。
3. 3　本方法简便、可靠 ,可作为含胡椒的其他制剂
的含量测定的参考。
影响红豆杉树皮中紫杉醇含量的若干因素
张　鸿 1 ,杨明惠 2
( 1. 深圳大学科技研究院 ,广东 深圳　 518060;　 2. 云南大理师范高等专科学校 ,云南 大理 )
中国分类号: R286. 02　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670( 2002) 1 0039 03
　　天然来源的紫杉醇资源极为有限 [1 ] ,在工业生
产中 ,针对宝贵的资源 ,何时采集、怎样保管仍急需
科学的方法。本文就采集季节、阳光照射、保管方式
及存放时间等因素对原材料中紫杉醇含量的影响进
·39·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 1期
收稿日期:　 2001-05-31