全 文 ：华北大黄中非 类成分的研究
王爱芹 1 ,李军林 2 ,吴祖泽 2
( 1. 北京中医药学校 中药教研组 ,北京 100053; 2. 军事医学科学院放射医学研究所 ,北京 100850)
摘 要:目的 对华北大黄中非 类成分进行研究。方法 色谱和光谱分析法分离和鉴定化学成分。结果 从 95%
乙醇提取物中分得 13个非 类化合物 ,分别鉴定为: 大黄酚、大黄素甲醚、β-谷甾醇、大黄素、胡萝卜苷、大黄酸、大
黄素甲醚 -8-O-β -D-葡萄糖苷、 rheumin、没食子酸、 d-儿茶素、蔗糖、 1, 6-二没食子酰 -O-β -D-吡喃葡萄糖、 1-O-β-D -没
食子酰吡喃葡萄糖。结论 首次证明华北大黄含有少量大黄酸 ;除大黄酚、大黄素甲醚、大黄素外 ,其他成分均为首
次从该植物中分得。
关键词: 华北大黄 ;非 类成分 ;大黄酸
中图分类号: R284. 1 文献标识码: A 文章编号: 0253 2670( 2003) 08 0685 03
Studies on non-stilbenes in Rheum franzenbachii
W ANG Ai-qin
1
, L I Jun-lin
2
, WU Zu-ze
2
( 1. Depar tment of Chinese Ma teria Medica , Beijing School of TCM , Beijing 100053, China; 2. Institute
of Radia tion Medicine , Academy of M ilitar y Medical Science, Beijing 100085, China )
Abstract: Object To investig ate the non-stibenes f rom the roo t and rhizome o f Rheum f ranzenbachii
Munt. Methods The chemical consti tuents w ere obtained from the 95% alcoho l ex t ract of the radix and
rhizoma of R. f ranzenbachii by co lumn ch romatog raphy and identi fied by spectroscopic analysis and chemi-
cal cha racteristics. Results Thirteen non-stilbenes w ere obtained and identified by spect roscopic analy sis
and chemical cha racteristics as chry sophanol , physcion, β -si tostero l and emodin, dauco sterol, rhein,
physcion-8-O-β-D-g lucopy ranoside, rheumin, g allic acid, d -catechin, sucro se, 1, 6-dig alloy l-O-β-D-g lu-
copy rano se and 1-gal loyl-O-β -D-glucopy rano se. Conclusion All compounds, ex cept chrysophanol,
physcion, emodin, a re obtained from the plant fo r the first time. Meanwhi le the existence o f rhein in R.
f ranzenbachii i s confi rmed though in a li t tle amount.
Key words: Rheum franzenbachi i Munt. ; non-stibenes; rhein
华北大 黄系蓼科大黄 属波叶组 Rheum
f ranzenbachii Munt. 的干燥根与根茎 ,为常见 4种
“山大黄”中的一种 ,该植物资源在河北围场极其丰
富。为充分利用该植物资源 ,作者对其化学成分进行
了较系统地研究。前文报道了从其 95%乙醇渗漉液
中分离鉴定了 6种 类成分 [1 ] ,本文则报道进一步
研究获得的非 类成分 ,这对充分合理地利用该植
物资源奠定理论基础。从华北大黄的 95%乙醇渗漉
液中 ,分得 13个非 类成分 ,经化学和谱学方法对
其结构进行了鉴定 ,分别是: 大黄酚 (Ⅰ )、大黄素甲
醚 (Ⅱ )、β-谷甾醇 (Ⅲ )、大黄素 (Ⅳ )、胡萝卜苷 (Ⅴ )、
大黄酸 (Ⅵ )、大黄素甲醚 -8-O-β -D-葡萄糖苷 (Ⅶ )、
rheumin (Ⅷ )、没食子酸 (Ⅸ )、 d-儿茶素 (Ⅹ )、蔗糖
(Ⅺ )、 1, 6-二没食子酰-O-β -D-吡喃葡萄糖 (ⅩⅡ )、 1-
O-β -D-没食子酰吡喃葡萄糖 (ⅩⅢ )。
1 实验材料、药品与仪器
华北大黄: 1999年 7月采于河北围场 ,经河北
围场药材公司乔百成股长鉴定为 R. f ranzenbachii
Munt.。
X4型数字显示双目镜微熔点测定仪 (未校正 ) ;
Varian INOVA 500型核磁共振仪 ( TM S为内标 ) ;
V G Zabspec高分辨磁质谱仪 ; PE243B型旋光仪。薄
层色谱及柱色谱用硅胶系青岛海洋化工厂产品 ,
Sephadex G-25, Sephadex L H-20系 Pharmacia产
品 , AB-8型大孔吸附树脂系南开大学化工厂产品。
2 提取和分离
·685·中草药 Chinese T raditional and Herbal Drug s 第 34卷第 8期 2003年 8月
收稿日期: 2002-11-21作者简介:王爱芹 ( 1963- ) ,女 ,山东人 ,讲师 ,医学硕士 ,研究方向为天然药物 ,撰写并发表专业学术研究论文 20余篇 ,参与编著专业书籍 2部。
华北大黄 4 kg ,粉碎 , 95%乙醇渗漉 ,收集渗漉
液约 200 L。减压浓缩至适量 ,加水分散 ,冷置 ,滤出
白色不溶物 305 g (为 类成分 )。滤液依次用氯仿、
乙酸乙酯、正丁醇抽提 ,得氯部位 31. 6 g ,乙酸乙酯
部位 241 g ,正丁醇部位 587 g ,水部位 306 g。
氯仿部分溶于适量氯仿 , 40～ 60目粗孔粒硅胶
拌样 ,硅胶 ( 100～ 200目 )色谱柱分离 ,石油醚、石油
醚 -乙酸乙酯梯度洗脱 ,得Ⅰ + Ⅱ ,Ⅲ ,Ⅳ ,Ⅴ。Ⅰ + Ⅱ
按前文方法 [2 ]分离得到Ⅰ和Ⅱ。
乙酸乙酯部分 91 g,甲醇溶解 , 60～ 100目粗孔
粒硅胶拌样 ,硅胶 ( 100～ 200目 )色谱柱分离 ,乙酸
乙酯、乙酸乙酯 -乙醇梯度洗脱 ,得Ⅵ + Ⅶ ,Ⅷ ,Ⅸ ,
Ⅹ 。Ⅵ + Ⅶ 经 Sephadex LH-20色谱柱 ,甲醇洗脱分
离 ,得单体Ⅶ 和Ⅵ 。
正丁醇部分 587 g ,经反复硅胶柱色谱分去 类
成分后洗脱液 ,合并 ,浓缩至稠膏 ,加适量水搅拌 ,过
滤 ,滤液经 Sephadex G-25色谱柱 ,水洗脱 ,分别得
Ⅺ ,ⅩⅡ ,ⅩⅢ。
水部分经 AB-8型大孔吸附树脂 ,水洗脱 ,薄层
跟踪 ,甲醇重结晶得Ⅺ及具有甜味的多糖混合物 (洗
脱液适当浓缩后 ,可被 95%乙醇沉淀 , Mo lisch反应
阳性 )。
3 结构鉴定
化合物Ⅰ : 黄色片状结晶 (乙酸乙酯 ) , mp 196
℃～ 197℃ ,与大黄酚对照品混合熔点不下降 ,共薄
层色谱 Rf值一致 ,故确定为大黄酚。
化合物Ⅱ : 黄色片状结晶 (乙酸乙酯 ) , mp 206
℃～ 208℃ ,与大黄素甲醚对照品混合熔点不下降 ,
共薄层色谱 Rf值一致 ,故确定为大黄素甲醚。
化合物Ⅲ : 无色片状结晶 (石油醚 ) , mp 137
℃～ 138℃ ,与 β -谷甾醇对照品混合熔点不下降 ,共
薄层色谱 Rf值一致 ; EI-M S m /z: 414 [M ]+ ,故确
定为 β-谷甾醇。
化合物Ⅳ: 黄色片状结晶 (无水乙酯 ) , mp 255
℃～ 257℃ ,与大黄素对照品混合熔点不下降 ,共薄
层色谱 Rf值一致 ,故确定为大黄素。
化合物Ⅴ : 白色粉末 (甲醇 ) , mp 287℃～ 290
℃ , Libermann-Burchard反应阳性 , Molisch反应阳
性。与胡萝卜苷对照品混合熔点不下降 ,共薄层色谱
Rf值一致 ; FAB-M S m /z: 577 [M+ 1 ]+ , 415 [M+
1- g lucosy l ]
+
,故确定为胡萝卜苷。
化合物Ⅵ :黄色颗粒 (乙酸乙酯 ) , mp > 300℃ ,
Bor nt ragar反应红色。 EI-M S, 1HNMR, 13 CNM R数
据与文献报道值基本一致 [ 5] ,与大黄酸对照品共薄
层色谱 Rf值一致 ,故确定为大黄酸 ( rhein)。以往文
献认为“华北大黄一般不含大黄酸” [4, 5 ] ,而该研究结
果证实其中含大黄酸 ,这为以往文献再版修订为“华
北大黄含有少量大黄酸”提供了科学依据。
化合物Ⅶ : 黄色颗粒 (丙酮 -水 ) , mp 245℃～
247℃ , Bornt rag ar反应红色。 1 HNMR, 13 CNMR数
据与河套大黄中获得的化合物Ⅷ 基本一致 [6 ] ,故确
定为大黄素甲醚 -8-O-β -D-吡喃葡萄糖苷。
化合物Ⅷ : 淡黄绿色针状结晶 (丙酮 -水 ) , mp
234℃～ 236℃。 1HNM R, 13 CNM R数据与河套大黄
中获得的化合物Ⅳ基本一致 [7 ] ,故确定为 rheumin。
化合物Ⅸ :无色针状结晶 (无水乙醇 ) , mp 235
℃～ 238℃ , FeCl3反应深蓝色。 经与没食子酸样品
对照 ,混合熔点不下降。 1 HNMR, 13 CNMR数据与河
套大黄中获得的化合物Ⅲ基本一致 [ 7] ,故确定为没
食子酸。
化合物Ⅹ : 无色针状结晶 (丙酮-水 ) , mp 174
℃～ 175℃ , [α]20D+ 70. 8°( c, 1. 00 g /100 mL, ace-
tone) FeCl3反应绿色 ,香草醛 -盐酸反应红色。 EI-
M S数据与文献报道值 [8 ] , 1HNMR, 13 CNM R数据与
文献报道值基本一致 [9, 10 ] ,故确定为 d-儿茶素。
化合物Ⅺ: 无色方晶 (甲醇 ) , mp 168℃～ 171
℃ , M olisch反应阳性 , Fehling反应阴性。 13 CNMR
数据与文献值基本一致 [11 ] ,纸色谱与蔗糖对照品 Rf
值相同 ,故确定为蔗糖。
化合物ⅩⅡ : 无色针状结晶 (水 ) , mp 227℃～
229℃ , Molisch反应阳性 , FeCl3反应呈蓝黑色 ,薄
层酸水解检出葡萄糖和没食子酸。 1HNM R,
13
CNM R数据与文献报道值基本一致 [12 ] ,故确定为
1, 6-二没食子酰 -O-β -D-吡喃葡萄糖。
化合物ⅩⅢ :无色长片状结晶 (水 ) , mp 197℃～
199℃ , Molisch反应阳性 , FeCl3反应呈蓝色 ,薄层
酸水解检出葡萄糖和没食子酸。1 HNM R与文献报道
值基本一致 [ 13 ] ,故确定为 1-没食子酰 -O-β -D-吡喃
葡萄糖。
致谢:河北围场药材公司乔百成提供并鉴定了
华北大黄原料 ;军事医学科学院分析测试中心代测
核磁共振谱 ( 1HNM R, 13 CNM R, HMBC)、质谱及旋
光度。
References:
[1 ] Wang A Q, Li J L, Wu Z Z. Studies on the s tilbenes of
Huabei Rhuba rb ( Rheum f ranzenbach ii ) [ J] . Ch in Tradi t
Herb Drugs (中草药 ) , 2001, 32( 10): 878-880.
[2 ] Li J L, Li J S, Wan A Q. Th e isolation m ethod for prepara-
tion of ch rysophanol and physcion [ J]. P rimary J Chin
Mater Med (基层中药杂志 ) , 1996, 10( 2): 43-44.
·686· 中草药 Chinese T raditional and Herbal Drug s 第 34卷第 8期 2003年 8月
[3 ] Yang X W , Zh ao J, Li J X, et al . Studies on rhubarbⅠ . A
new malon ylanth raquinone g lycosid e f rom th e rhizom es of
Qinling Rhubarb ( Rheum qinl ingense) [ J ]. Ch in Trad it Herb
Drugs (中草药 ) , 1998, 29( 5): 289-293.
[4 ] Wu Z Y. Compend ium of New China ( X inhua ) Herbal (新华
本草纲要 ) [M ] . 1st ed. Shanghai: Shanghai Science and
Tech nology Pub li sh ers , 1990.
[5 ] Xie Z W . The Discussion on the Var iety of Ch inese Medicinal
Material s (中药材品种论述 ) [M ]. 2nd ed. Shangh ai:
Shanghai Science and Tech nology Publis hers, 1994.
[6 ] Li J L, Li J S, Wang A Q, et al . S tudies on th e an-
th raquinon es of Hotao Rhubarb (Rheum hotaoense) [ J ]. Chin
Trad it Herb Drugs (中草药 ) , 2000, 31( 5): 321-323.
[7 ] Li J L, Li J S, Wang A Q, et al . Studies on the non-an-
th raquinon es of Hotao Rhubarb (Rheum hotaoense) [ J ]. Chin
Trad it Herb Drugs (中草药 ) , 1998, 29( 11): 721-723.
[8 ] Informat ion Center of Chines e Herbal Medicine, State Ph ar-
maceu tical Adminis tration of China. Handbook of Active
Constituents in Phytomed icine (植物药有效成分手册 ) [M ].
Bei jing: People s M edical Publi shing House, 1986.
[9 ] Nonaka G, Minami M , Nishioka I. Studies on Rhubarb
( Rhei Rhizoma ) Ⅲ Sti lb ene g lycosid es [ J ]. Chem Pharm
Bul l , 1977, 25( 9): 2300-2305.
[10 ] Nonaka G, Ezaki E, Nayashi K, et al . Flavanol g lucosides
f rom Rhubarb and Rhaphiolep is umbel late [ J ]. Phytochem -
ist ry , 1983, 22( 7): 1659-1661.
[11 ] Chen D C. The Carbon-13 NMR and Its Appl ica tion in Chi-
nese Herbal Chemist ry (碳谱及其在中草药化学中的应用 )
[M ] . 1st ed. Bei jing: People s M edical Publis hing House,
1991.
[12 ] Nonaka G, Nishioka I. Tannins and related com pounds Ⅹ
[ J] . Chem Pharm Bul l , 1983, 31( 5): 1652-1658.
[13 ] Kashiw ada Y, Nonak G, Nishioka I. Tan nins and related
compounds ⅩⅩⅢ [ J] . Chem Pharm Bul l , 1984, 32 ( 9 ):
3461-3470.
印楝化学成分研究
尹 锋 ,雷心心 ,楼凤昌
(中国药科大学 ,江苏 南京 210038)
印楝 Azadirachta indica A. Juss. 又名印度
楝 ,为楝科楝属植物。 该植物的种子、树皮和叶的提
取物均已进行了研究 ,发现其中含有很多在农业、医
药及化妆品方面有经济价值的次生产物 ,如含有多
种具杀虫活性的四环三萜类化合物 ,对 200多种农
业害虫有较强的毒杀能力 ,而且对人畜无害 [1 ]。印楝
是一种极好的具有杀农虫功效的药用植物。作者对
其进行了系统的化学成分研究 ,从其中提取物的正
丁醇及水部分分离并鉴定了 7个化合物 ,分别为:槲
皮素 (Ⅰ ) ,异杨梅树皮苷 (Ⅱ ) ,β-谷甾醇 (Ⅲ ) ,豆甾
醇 (Ⅳ ) ,胡萝卜苷 (Ⅴ ) ,柽柳素-3-O-β-D-葡萄糖苷
(Ⅵ )和山柰酚 (Ⅶ )。其中化合物Ⅱ ,Ⅵ 为首次从楝属
植物中分离得到。
1 材料与仪器
印楝样品 2001年采自云南 ,经楼凤昌教授鉴定
为 A. indica A. Juss.。 熔点用双目镜熔点测定仪测
定 (温度计未校正 )。核磁 Bruker ACF-300型核磁
共振仪测定 , TM F为内标。 薄层层析、柱层析硅胶
为青岛海洋化工厂生产 ,高效硅胶 GF254薄层板为
烟台化工研究所生产 ,大孔树脂为天津农药厂生产
的 D-101型 ,所用试剂均为分析纯。
2 提取与分离
取干燥印楝叶 7. 65 kg ,用 95%乙醇回流提取
4 h后 70%乙醇回流提取 2次 ,每次 3 h。 减压回收
乙醇得浸膏。分别用石油醚、醋酸乙酯、正丁醇萃取 ,
得乳化层、石油醚部分、醋酸乙酯部分、正丁醇部分
及水溶液 5部分。正丁醇萃取相 ( 274 g )氯仿-甲醇
梯度洗脱得化合物Ⅲ ,Ⅳ ,Ⅴ。 水部分经反复大孔树
脂柱色谱 ,硅胶柱色谱及 Sephadex LH-20凝胶柱
色谱 ,得到化合物Ⅰ ,Ⅱ ,Ⅵ 和Ⅶ 。
3 鉴定
化合物 Ⅰ : 黄色晶体 , mp 312 ℃～ 316 ℃
( CH3OH) ,盐酸镁粉反应呈阳性。 在薄层层析上将
Ⅰ与槲皮素标准品对照 ,其 Rf值及显色行为 ( AlCl3
显黄色 )完全一致。 13 CNM R数据与文献报道值一
致 [2 ] ,因此推测化合物Ⅰ 为槲皮素。
化合物Ⅱ : 淡黄色粉末 , mp 275℃～ 277℃
( CH3OH) , Mo lish反应阳性 ,盐酸镁粉反应呈阳性。
水解 PC检测出 D-葡萄糖。 1HNMR( 300 M Hz, in
DM SO)δ: 12. 66( 1H, s, C-5-OH) , 10. 85( 1H, s, C-
7-OH) , 9. 17( 2H, s, C-3′, 5′-OH) , 8. 91 ( 1H, s, C-
4′-OH) , 7. 19 ( 2H, s, C-2′, H-6′) , 6. 36 ( 1H, d, J=
·687·中草药 Chinese T raditional and Herbal Drug s 第 34卷第 8期 2003年 8月
收稿日期: 2002-10-24作者简介:尹 锋 ( 1978- ) ,男 ,中国药科大学中药学院天然药物化学专业 2001级在读博士生。 Tel: ( 025) 5322738
* 通讯作者