全 文 ：清宫长春丹对小鼠游泳耐力及抗氧化酶活性的影响
佟继铭 1 ,刘翠哲 1 ,计福全 2 ,董海荣 2
( 1. 承德医学院中药研究所 ,河北 承德　 067000; 2. 承德中药集团 ,河北 承德　 067000)
　　长春丹 ( CCD)依据清宫秘方研制而成 ,由人
参、当归、白芍、牛膝、麦冬、五味子、熟地及山药等 24
味中药组成。具有补肾益精、强筋壮骨、延缓衰老之功
效。 现代药理研究表明长春丹组方中的人参、当归等
均含有多种抗氧化物质 ,人参具有抗应激作用 ,可提
高小鼠耐疲劳、耐缺氧和耐高温能力以及抗脂质过氧
化作用 [1, 2 ] ;当归有抗红细胞膜脂质过氧化作用 ,降低
丙二醛 ( MDA) 的含量 ,对抗 MDA的直接溶血作
用 ,当归中的阿魏酸钠可显著拮抗 O2÷和 H2O2对红
细胞的氧化作用 ,使膜脂质过氧化产物 MDA减少。
白芍、麦冬、熟地等具有抗疲劳、抗缺氧和调节机体免
疫力、改善肺功能、活跃细胞代谢、中枢兴奋和提高运
动能力的作用。 据报道 ,长春丹可明显降低脂质过氧
化物 ( LPO )、低密度脂蛋白 ( LDL-C) ,提高高密度
脂蛋白 HDL-C和 HDL /TC[ 3]。但未见有关长春丹
抗疲劳和抗氧化作用方面实验研究的报道 ,本实验旨
在探讨长春丹对小鼠机体耐力和抗氧化酶活性的影
响 ,为其临床应用提供实验依据。
1　材料
1. 1　药品与试剂:清宫长春丹 ,承德中药集团生产 ,
批号 980512;维生素 E,天津中新药业集团有限公
司第六中药厂生产 ,批号 000561。 MDA,超氧化物
歧化酶 ( SO D)及谷胱甘肽过氧化物酶 ( GSH-Px )
测定试剂盒 ,北京邦定泰克生物技术公司生产。
1. 2　动物: 昆明种小鼠 , 8周龄 ,雄性 ,体重 ( 25±
2) g ,河北医科大学实验动物中心提供 ,合格证号
04056。
2　实验方法
2. 1　对小鼠游泳耐力的影响: 昆明种小鼠 75只 ,
随机分为生理盐水组、长春丹 0. 25, 0. 5, 1. 0 g /kg
组 ,维生素 E 30 mg /kg组 ,每组 15只。 ig给药 ,每
天 1次 ,给药体积 20 mL /kg ,生理盐水组 ig等体积
生理盐水。连续给药 21 d。 在给药第 15和 16天 ,
对小鼠进行 2次游泳训练 ,水温 ( 32± 1)℃ ,水深
50 cm ,每次 20 min。第 22天小鼠尾根部负重 (按体
重 4% 负重 ) 在上述条件下游泳 ,记录小鼠力竭游
泳时间 (从小鼠被投入水至其头部沉入水中 10 s
不能浮出水面的时间 )。
2. 2　对乳酸 ( LA) , MDA含量及 SOD, GSH-Px
活性的影响:立即取出力竭小鼠 ,用脱脂棉擦干身体
上的水 ,休息 30 min,去眼球取血 ,分离血清 , 4℃
保存备用。颈椎脱臼处死小鼠 ,迅速取心脏和肝脏 ,
用冰生理盐水冲洗 ,除去残存血液 ,分别在冰浴下 ,
在组织研磨器中 ,与预冷的 PBS缓冲液 ( 1. 0 g湿
组织+ 9. 0 mL缓冲液 )研磨成组织匀浆。冷冻离心
( 2℃～ 4℃ ) ,分离上清液 , - 20℃ 冰箱保存备用。
采用邻苯三酚自氧化法测定 SOD活性 ; DTN B法
测定 GSH-Px活性 ;对羟基联苯比色法测定 LA含
量 ; TBA比色法测定 MDA含量。 分别测定血清中
LA含量 ,血清、心和肝组织 MDA的含量及 SO D
和 GSH-Px的活性 ,并计算血 LA指数。
血 LA指数= 血 LA含量 ( mmol /L) /游泳时间 ( min)
2. 3　统计学分析: 实验数据用 x± s表示 ,组间比较
进行 t检验。
3　结果
3. 1　对小鼠游泳耐力的影响: 长春丹 0. 5, 1. 0 g /
kg组小鼠的力竭游泳时间明显延长 ,与生理盐水组
比较差异显著 (P < 0. 05, 0. 01) ,结果见表 1。
表 1　长春丹对小鼠游泳时间的影响 ( x± s, n= 15)
Table 1　 Ef fect of CCD on swimming duration
of mice (x± s , n= 15)
组　别 剂　量
/ ( g· kg- 1 )
游泳时间
/min
延长百分率
/%
NS - 　　 65. 25± 13. 26 -
长春丹 0. 25 75. 32± 13. 54 15. 6
0. 50 99. 48± 24. 36* 46. 8
1. 00 110. 89± 23. 23* * 47. 0
维生素 E 0. 03 97. 85± 4. 27* 34. 7
　　与 NS组比较: * P < 0. 05　* * P < 0. 01
　　* P < 0. 05　* * P < 0. 01 vs N S g rou p
·941·中草药　 Chinese T raditional and Herba l D rugs　第 34卷第 10期 2003年 10月
收稿日期: 2003-01-12作者简介: 佟继铭 ( 1951— ) ,女 ,满族 ,河北省青龙满族自治县人 ,教授 ,硕士生导师 ,现任承德医学院中药研究所 (河北省中药研究与开发重点实验室 )药理毒理研究室主任 ,研究方向为心血管药理、中药新药研究与开发。
Tel: ( 0314) 2064592-8257　 E-mail: tongjiming@ 163. com
3. 2　对小鼠血清中 LA含量及血 LA指数的影响:
长春丹 0. 5, 1. 0 g /kg组小鼠力竭游泳后血清中 LA
含量和血 LA指数均低于生理盐水组 ,结果见表 2。
表 2　长春丹对力竭游泳小鼠血清中
LA含量的影响 ( x± s , n= 15)
Table 2　 Ef fect of CCD on LA content in serum of mice
af ter exhaustive swimming ( x± s , n= 15)
组　别 剂　量
/( g· kg- 1)
LA
/( mmol· L- 1 )
LA指数
/( mmol· L- 1· min- 1 )
N S - 　 12. 36± 2. 13 　 0. 189± 0. 03
长春丹 0. 25 12. 13± 2. 41 0. 161± 0. 03
0. 50 9. 67± 1. 98* 0. 097± 0. 02
1. 00 8. 87± 1. 94* 0. 080± 0. 02
维生素 E 0. 03 11. 37± 1. 86* 0. 116± 0. 03
　　与 N S组比较: * P < 0. 05
　　* P < 0. 05 vs NS g roup
3. 3　对 MDA含量和 SOD和 GSH-Px活性的影
响:长春丹 0. 5, 1. 0 g /kg组小鼠血清、心和肝组织
中 MDA的含量明显降低 , SOD和 GSH-Px的活性
升高。与生理盐水组比较差异有显著性 (P < 0. 05) ,
结果见表 3～ 5。
表 3　长春丹对小鼠血清中 MDA含量 , SOD
和 GSH-Px活性的影响 (x± s, n= 15)
Table 3　 Ef fect of CCD on MDA content, SOD and GSH-
Px activities in serum of mice (x± s, n= 15)
组　别 剂　量
/( g· kg- 1 )
MDA
/( nmol· mL- 1)
SOD
/( U· mL- 1)
GSH-Px
/( U· mL- 1)
N S - 9. 71± 3. 1 178. 2±31. 4 　 26. 8± 11. 7
长春丹 0. 25 8. 78± 2. 2 231. 5±33. 5 27. 8± 12. 5
0. 50 6. 76± 1. 7* 268. 7±26. 2* 34. 5± 8. 7*
1. 00 6. 45± 1. 8* 276. 5±31. 1* * 34. 9± 13. 7*
维生素 E 0. 03 7. 07± 2. 3* 265. 9±23. 2* * 34. 6± 12. 3*
　　与 N S组比较: * P < 0. 05　* * P < 0. 01
　　* P < 0. 05　* * P < 0. 01 vs NS group
表 4　长春丹对小鼠心脏组织中 MDA含量 , SOD
和 GSH-Px活性的影响 (x± s, n= 15)
Table 4　 Ef fect of CCD on MDA content, SOD and GSH-
Px activities in heart of mice (x± s, n= 15)
组　别 剂　量
/( g· kg- 1 )
MDA
/( nmol· mL- 1)
SOD
/( U· mL- 1)
GSH-Px
/( U· mL- 1)
N S - 57. 4± 13. 6 79. 4± 18. 3 　 36. 8± 11. 7
长春丹 0. 25 50. 1± 13. 6 85. 5± 16. 8 41. 3± 12. 5
0. 50 47. 1± 11. 1* 101. 8± 21. 3 46. 5± 12. 4*
1. 00 43. 5± 14. 5* 119. 1± 21. 9* 51. 5± 19. 4* *
维生素 E 0. 03 41. 5± 13. 8* 107. 6± 24. 7* 50. 1± 18. 2* *
　　与 N S组比较: * P < 0. 05　* * P < 0. 01
　　* P < 0. 05　* * P < 0. 01 vs NS group
4　讨论
　　 LA是糖酵解产物 ,在安静条件下 LA维持在
表 5　长春丹对小鼠肝脏中 MDA含量 , SOD
和 GSH-Px活性的影响 ( x± s , n= 15)
Table 5　 Effect of CCD on MDA content, SOD and GSH-
Px activities in liver of mice (x± s, n= 15)
组　别 剂　量
/( g· kg- 1 )
M DA
/( nmol· mL- 1)
SOD
/ (U· mL- 1 )
GSH-Px
/ ( U· mL- 1 )
N S - 62. 8± 12. 3 1 126. 6± 166. 7 139. 9±23. 1
长春丹 0. 25 59. 5± 12. 7 1 269. 4± 220. 5 143. 2±29. 9
0. 50 54. 3± 7. 9* 1 348. 5± 188. 4* 151. 2±30. 5*
1. 00 52. 1± 9. 5* 1 387. 2± 242. 5* 169. 5±26. 7*
维生素 E 0. 03 54. 2± 10. 9* 1 394. 3± 218. 4* 173. 6±27. 7*
　　与 N S组比较: * P < 0. 05
　　* P < 0. 05 vs N S g roup
一定的水平 ,运动时 ,机体相对缺氧 ,骨骼肌无氧酵
解代谢过程增强 ,随着运动强度的增大和持续时间
的延长 ,血液中 LA的水平升高 ,使机体疲劳乏力。
LA指数表示在相同的运动时间条件下体内 LA的
恢复能力 , LA指数小 ,说明血液中 LA的恢复能力
强、疲劳消除快。本研究结果表明 ,长春丹可明显延
长小鼠力竭游泳时间 ,降低小鼠血清中 LA含量 ,提
示其有一定加速清除 LA的能力和抗疲劳作用。
长时间剧烈运动促使活性氧的产生 ,体内脂质
过氧化增强 ,脂质过氧化的最重要产物是 MDA,其
可使膜蛋白质和酶分子聚合、交联造成代谢和功能
形态的改变 ,使机体产生运动性氧化损伤。 SOD和
GSH-Px 等是机体内存在的抗氧化酶 , SOD能特
异、有效地清除超氧化自由基 O2÷ ; GSH-Px可以有
效的清除过氧化氢 ( H2O2 ) 等活性氧 ,维持体内的
平衡状态 ,从而有效地阻止脂质过氧化 ,防止细胞受
到运动性氧化损伤 [4 ]。 因此测定体内 MDA含量、
SOD和 GSH-Px的活性可间接的了解体内脂质过
氧化反应和抗氧化的能力。本实验结果表明 ,长春丹
可明显降低力竭游泳后小鼠血清、肝脏和心脏中
MDA含量 ,提高 SO D和 GSH-Px 活性 ,且有一定
的剂量依赖关系。提示长春丹可提高体内抗氧化酶
的活性 ,加速活性氧的清除 ,延缓运动疲劳的产生。
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·942· 中草药　 Chinese T raditional and Herba l D rugs　第 34卷第 10期 2003年 10月