全 文 ：个烯氢信号; 4154 ( 2H, brs, 6-2H )。13CNMR ( 75
MHz, C5D5N ) : D1212 ( C-18, C-29 ) , 1910 ( C-21 ) ,
1913( C-27) , 2010( C-26) , 2114( C-11) , 2117( C-19) ,
2315( C-28) , 2416( C-15) , 2616( C-23) , 2816( C-16) ,
2916( C-25) , 3012( C-2) , 3110 ( C-8) , 3413( C-22) ,
3615( C-20) , 3714( C-10) , 3717( C-1) , 4013( C-12) ,
4018( C-7) , 4219( C-13) , 4611 ( C-24) , 5511 ( C-9) ,
5615( C-1, C-17) , 6716( C-6) , 7318( C-3) , 13010( C-
4) , 14712( C-5)。与文献[ 9]中, 3B, 6B-豆甾-4-烯-3,
6-二醇的波谱数据对照,基本一致, 故鉴定化合物Ô
为 3B, 6B-豆甾-4-烯-3, 6-二醇。
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灰毛泡根部的化学成分
刘 戎1, 2, 丁立生1,陈能煜2,王明奎1 X
( 11 中国科学院成都生物研究所, 四川 成都 610041; 21 兰州大学 化学系,甘肃 兰州 730000)
摘 要:目的 研究灰毛泡根部甲醇提取物的化学成分。方法 用乙酸乙酯萃取, 正相和反相硅胶( MCI , Rp-18)
柱色谱分离,并通过波谱技术( 13CNMR, DEPT , 1HNMR, FABMS)及标准样品对照鉴定结构。结果 分离鉴定了
10 个化合物,分别为 2A, 19A-二羟基-3-羰基乌索-12-烯-28-酸( Ñ )、2-羰基坡曼酸( Ò )、覆盆子酸( Ó )、蔷薇酸( Ô)、
2A, 3A, 19A-三羟基齐墩果-12-烯-28-酸( Õ )、2, 3- O-异丙叉蔷薇酸( Ö )、坡曼酸( × )、2A, 3B-二羟基羽扇豆烷-20( 29)-
烯-28-酸( Ø )、儿茶素( Ù )和胡萝卜苷( Ú )。结论 这是首次报道该植物的化学成分。
关键词:灰毛泡; 化学成分;三萜
中图分类号: R2841 1 文献标识码: A 文章编号 : 0253 2670( 2003) 05 0394 03
Chemical constituents from root of Rubus irenaeus
LIU Rong1, 2, DING L-i sheng1, CHEN Neng-yu2, WANG Ming-kui1
( 11 Chengdu Institute of Biology , CAS, Chengdu 610041, China; 21 Department
of Chemistry , L anzhou Universit y, L anzhou 730000, China)
Abstract: Object T o invest ig ate the chemical const ituents f rom the methanol ex tract of the root of Rubus
irenaeus Focke1 Methods EtOAc ex tract ion, normal and reverse phase silica gel column chromatography w ere
used for isolat ion1 Spectroscopic methods ( 13CNMR, 1HNMR, DEPT, 2DNMR, and FAB-M S) and compar-i
son w ith authentic samples were used for identif icat ion1 Results Ten compounds w ere isoated and characterized
as 2A, 19A-dihydroxy-l 3-oxo-urs-12-en-28-oic acid ( Ñ ) , 2-oxo-pomolic acid ( Ò) , fupenzic acid ( Ó) , euscaph-
ic acid ( Ô) , 2A, 3A, 19A-trihydroxy-l olean-12-en-28-oic acid ( Õ ) , 2, 3- O-isopropylidenyl euscaphic acid
( Ö ) , pomolic acid ( × ) , 2A, 3B-dihydroxy-l lup-20( 29)-en-28-oic acid ( Ø ) , catechin ( Ù ) and daucosterol
#394# 中草药 Chinese T raditional and Herbal Drugs 第 34 卷第 5 期 2003年 5月
X 收稿日期: 2002-08- 26基金项目:四川省青年科技基金会资助作者简介:刘 戎( 1976- ) ,女,理学硕士,现在华南农业大学动物医学系药理研究室工作(邮编: 510642)。
* 通讯作者 T el: ( 028) 5229227 Fax: ( 028)5222753 E-mail: mkw ang@ cib1 ac1cn
( Ú ) 1 Conclusion These compounds w ere obtained from this plant for the first t ime1
Key words: Rubus ir enaeus Focke; chemical const ituent ; t riterpenoid
灰毛泡 Rubus irenaeus Focke 又名地王泡藤,
为蔷薇科悬钩子属植物, 主要分布在江苏、浙江、江
西、福建、湖北、湖南、广东、广西、四川、贵州等省, 其
根和叶具有理气止痛、散毒生肌等功效[ 1]。迄今尚
未见对该植物的化学成分报道。我们首次对其根部
甲醇提取物的乙酸乙酯萃取部分进行了研究。采用
MCI、硅胶、反相硅胶等柱色谱进行分离, 利用
1HNMR, 13CNMR, 2DNMR, FAB-MS 等技术, 并结
合标准品对照, 鉴定了 10 个化合物,它们均为首次
从该植物中分离得到。
1 植物来源及仪器
植物样品采自重庆市南川金佛山, 由重庆市药
物种植研究所刘正宇副研究员鉴定。NMR谱用
Bruker AC-300 和 Avance DMX-500 仪测定, TM S
为内标,除化合物 Ø用 CD3OD作溶剂外, 其余均用
C5D5N为溶剂;质谱用 VG公司 AZB-HS 型质谱仪
测定。薄层色谱及柱色谱材料用青岛海洋化工厂生
产的硅胶 GF-254, 200~ 300 目和 170~ 200 目硅
胶。LiChroprep Rp-18分离柱为 Merck 产品, MCI
树脂为三菱化工产品。
2 提取及分离
灰毛泡根部( 518 kg)粉碎后用工业甲醇室温浸
提3 次, 共 21 d。减压浓缩提取液, 合并后得总浸
膏。将浸膏悬浮于水中,超声波助溶,滤去不溶物,
用乙酸乙酯萃取 3 次, 得乙酸乙酯浸膏部分 157 g。
乙酸乙酯部分过 MCI 树脂柱, 用甲醇-水体系
( 30% , 50% , 80% ) , 甲醇-丙酮梯度洗脱, 得到 3 部
分:第 1部分多为鞣质类化合物; 第 2部分( 50% ~
80%甲醇部分)主要为三萜类化合物;第 3部分为甲
醇洗脱及丙酮冲柱部分。将第 2部分分为 7段, 其
中A, B, D, G 4 段进一步进行了分离。A 段上硅胶
柱, 用氯仿-甲醇梯度洗脱, 然后用环己烷-丙酮和
Rp-18分离柱(甲醇-水体系)反复纯化得化合物 Ó
和Ø。B段上硅胶柱, 用石油醚-丙酮 ( 7B1)反复纯
化得化合物Ò~ Õ。D段上硅胶柱, 用氯仿-乙醇梯
度洗脱,再用 Rp-18分离柱, 以 80%甲醇-水及甲醇
洗脱得 Ñ, Ò和 × 。G段上硅胶柱,用氯仿-乙醇( 50
B1)开始梯度洗脱, 再用氯仿-异丙醇反复分离, 经
Rp-18分离柱纯化得化合物Ô, Ö , Ù和Ú。
3 结构鉴定
化合物 Ñ和 Ò为混合物,白色粉末。TLC 展开
后用 5%H 2SO4-乙醇溶液显色为蓝色, FAB-MS 准
分子离子峰 509[ M + Na] + 示其两个化合物的相对
分子质量均为 486。结合13CNMR和 1HNMR谱, 推
测其分子式为 C30H46O5。13CNMR谱中, 部分碳重
叠或成对出现, 表明可能为一对混合物。在双键区
有 4 个信号: D12712, 13918, 12710, 13918,提示化合
物Ñ , Ò为两个 12-烯-乌苏烷型三萜的混合物[ 2]。
在1HNMR谱中 D0187~ 1176区域有多个甲基单峰,
也提示该混合物为五环三萜,其中两个甲基峰是双
锋,进一步说明了化合物Ñ和Ò是19位有羟基的乌
苏烷型三萜。在低场区有D21611, 21018两个信号,
对照文献,分别为 Ñ的 3 位羰基碳信号[ 3]和 Ò的 2
位羰基碳信号[ 4] , 在 D60~ 80区域的 D8311, 7213,
6914 3 个羟基碳信号, 说明 Ñ的位连 A-羟基[ 3] Ñ,
Ò的 19 位连 A-羟基, 及 Ò 连 的 3B-羟基[ 4]。
D180130, 18012为二者的 28 位羧基碳信号。与文
献的碳谱、氢谱数据对照, 鉴定化合物 Ñ的结构为
2A, 19A-二羟基-3-羰基-乌索-12-烯-28-酸[ 3] , Ò为
3B, 19A-二羟基-2-羰基-乌索-12-烯-28-酸, 即 2-羰基
坡曼酸[ 4]。
化合物 Ó: 白色粉末, 紫外灯下显荧光, TLC展
开后用 5% H 2SO4-乙醇溶液显色为蓝色。根据
FAB-M S [ M + H ]
+ 在 485 的准分子离子峰和
13CNMR谱推测其分子式为 C30H44O5。碳谱在双键
区的4个信号D14613( C) , 14310( CH ) , 12915( CH) ,
12716( CH) , D20111的羰基碳信号, D18017 的羧基
碳信号和 D7217的 19 位羟基碳信号推测该化合物
应为 12-烯-19-羟基乌苏烷型三萜。根据分子式与
不饱和度,化合物 Ó应有 5 个氧,即除 19 位羟基外
还应有一个羟基, 但在 D60~ 80区域只出现 C-19的
信号, 而又根据双键区信号 D12915 ( CH ) , 14613
( C) ,羟基则必须连在双键碳上。由于 C, D和 E 环
与化合物 Ò的化学位移基本一致, 因此烯醇式结构
可能在 1, 2位碳上, 并由于羰基与相邻烯醇形成了
共轭体系而使得此结构可稳定存在。对照文献[ 5] ,
可确定化合物Ó的结构为 2, 19A-二羟基乌索-3-氧-
1, 12-烯-28-酸。
化合物Ô和Õ为混合物, 白色粉末, T LC 展开
后 5%H 2SO4-乙醇溶液显色为蓝色。根据 FAB-MS
m/ z 511{ [ M + Na]
+
}的准分子离子峰及13CNMR
和 DEPT 推测它们的分子式均为 C30H 48O5。氢谱
#395#中草药 Chinese T raditional and Herbal Drugs 第 34 卷第 5 期 2003年 5月
中在 D0180~ 1161区域的多个尖锐单峰为三萜类的
特征信号。碳谱峰部分重叠或成对出现, 表明可能
为一对混合物。在双键区 D12718, 13918, 14417(还
有一信号被溶剂峰吡啶掩盖) ,提示Ô和Õ的 2位碳
的D值(D6519)一致, 所以碳信号重合而丰度较高。
因此化合物Ô的结构被确定为 2A, 3A, 19A-三羟基乌
苏-12-烯-28-酸即蔷薇酸;化合物Õ的结构为 2A, 3A,
19A-三羟基齐墩果-12-烯-28-酸,这是我们最近从乌
泡子根中分离鉴定的 1个新化合物[ 6]。
化合物 Ö : 白色粉末。13CNMR谱的双键区信
号D12719, 14010提示可能为 12-烯乌苏烷型三萜。
D8311, 7217, 7211 3 个峰为 3 个连羟基的碳信号,
D10711, 2913, 2912提示其有一个缩酮结构信号, Ö
可能是 2A, 3A缩酮化产物。经与文献对照[ 7] , 碳谱
数据相吻合, 因此化合物 Ö 鉴定为 2A, 3A-缩丙酮-
19A-羟基乌索-12-烯-28-酸即 2, 3- O-异丙叉蔷薇酸。
化合物 × 为白色粉末。其 13CNMR谱与 3B,
19A-二羟基乌索-12-烯-28-酸即坡曼酸的数据[ 2]吻
合。
化合物 Ø为无色针状晶体。TLC 展开后 5%
H2SO4-乙醇显色为紫红色。13CNMR DEPT 谱显示该
化合物中还含有另外一个微量成分。主要成分氢谱
在 D4175和 4164有两个宽单峰, 提示可能为环外烯
质子信号; 且在 D1174 处有一宽单峰碳谱中, D1915
( CH3) , 15210( C) , 11012( CH2)为异丙烯基特征峰[ 8]。
综合以上,主要成分化合物Ø可能为一羽扇豆烷型三
萜。在D61~ 85区域,有D8414, 6917两个连羟基碳信
号,低场 D17918为 28位羧基碳信号,碳谱数据与 2A,
3B-二羟基羽扇豆烷-20( 29)-烯-28-酸吻合[ 2, 9]。化合
物Ñ~ Ø的13CNMR谱数据见表 1。
表 1 化合物Ñ ~ Ø的13CNMR谱数据
Table 1 13CNMR data of compounds Ñ - Ø
碳位 Ñ Ò Ó Ô Õ Ö × Ø
1 4918 5314 12915 4217 4214 4310 3911 4812
2 6914 21018 14613 6519 6519 7211 2812 6917
3 21611 8311 20111 7912 7912 8311 7813 8414
4 4719 4514 4417 3817 3817 3518 3915 3916
5 5713 5412 5412 4817 4816 5014 5610 5618
6 1912 1818 1913 1814 1814 1819 1910 1915
7 3218 3218 3313 3315 3313 3313 3317 3514
8 4013 4118 3814 4014 4010 4014 4014 4015
9 4710 4710 4314 4714 4714 4712 4719 5119
10 3715 4313 4019 3816 3813 3814 3714 3916
11 2412 2318 2410 2319 2410 2415 2411 2219
12 12712 12710 12716 12718 - 12719 12811 2618
13 13918 13918 14013 13918 14417 14010 14010 3916
14 4210 4118 4214 4214 4217 4214 4212 4316
15 2910 2911 2913 2913 2819 2817 2914 3018
16 2616 2610 2614 2612 2416 2614 2615 3313
17 4718 4718 4814 4810 4518 4813 4813 5713
碳位 Ñ Ò Ó Ô Õ Ö × Ø
18 5415 5415 5418 5414 4416 5416 5417 4813
19 7213 7213 7217 7215 8110 7217 7218 5014
20 4119 4210 4215 4212 3515 4212 4214 15210
21 2617 2617 2710 2617 2910 2614 2712 3117
22 3811 3715 3816 3815 3311 3815 3714 3811
23 2419 2911 2718 2913 2819 2817 2819 2912
24 2412 1710 2214 2211 2210 2410 1619 1712
25 1710 1614 2010 1613 1614 1515 1517 1616
26 1614 1710 1716 1711 1714 1711 1713 1914
27 2413 2413 2417 2416 2811 2410 2418 1511
28 18013 18013 18017 18017 18015 18017 18016 17918
29 2617 2617 2710 2619 2817 2711 2710 11010
30 1610 1516 1618 1616 2414 1618 1616 1915
1c 10711
2c 2913
3c 2912
化合物Ù : 褐色膨松固体。13CNMRD: 8011( C-
2) , 6710( C-3) , 2917( C-4) , 15816( C-5) , 9617( C-6) ,
15817( C-7) , 9518( C-8) , 15716( C-9) , 10012( C-10) ,
13212( C-1c) , 11614( C-2c) , 14618( C-3c) , 14619( C-
4c) , 11611( C-5c) , 11914( C-6c)。与文献对照, 确定
为儿茶素[ 10]。
化合物 Ú为白色末, 与胡萝卜苷标样多种展开
系统的正、反相硅胶 TLC对照, Rf值一致, 确定该
化合物为胡萝卜苷。
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