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Effect of Shaotang‘an Cream on deep second degree scald wound healing of rats skin

烧烫安乳膏对大鼠皮肤深二度烫伤创面愈合的影响



全 文 :中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第10期2005年10月
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烧烫安乳膏对大鼠皮肤深二度烫伤创面愈合的影晌
李梅连1,吴爱萍1,张胜南2
(1.湖南医药工业研究所.湖南长沙410014,2.中南大学湘雅医院烧伤整形科,湖南长沙410001)
摘要:目的探讨烧烫安乳膏对大鼠深二度疆伤的影响。方法采用大鼠深二度烫伤模型,刨面分别外用高、中.
低剂量的烧烫安乳膏.通过伤后不同时间点创面取材.检测烫伤创面羟脯氨酸水平、刨面愈合面积酉分比、愈合时
间及观察组织病理学变化,以基质乳膏作阴性对照.湿润烧伤膏作阳性对照.观察烧捷安乳膏对大鼠深二度烫伤刨
面]雹[合的影响。结果创面外用中、高剂量的烧烫安乳膏可以增加刨面羟脯氯酸水平,促进内芽组织生长.促进创
面局部成纤维细胞生长圈子一且(FGF—p.)的表达,缩短愈合时间I作用与湿润烧伤膏相当。结论烧烫安乳膏可增
强胶原合成,促进上皮细胞增殖.加速烫伤刨面愈合。
关键词:烫伤‘创面愈合f烧烫安乳膏f羟脯氨醢}成纤维细胞生长园子
中雷分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编母t0253—2670(2005)i0—1527—03
EffectofShaotang
7
anCreamondeepseconddegreescaldwoundhealingofratskin
LIMei—lianl,WUAi—ping。,ZHANGSheng—nan2
(1,HunaaMediCalIndustryInstitute.Changsha4】0014-China;2.DepartmentofBurnsandPlas ics
oftheFirstAffiliatedHospital,CentralSou hUniversity,Changsha410001,China)
Keywords:scald;woundhealing;Shaotang’anCream;hydroxyproline{fibroblastgrowthfactor
(FGF)
烧烫安乳膏来源于民间秘方,经科学组方研制而
成。其主要组成有紫草、大黄、白芨等,是一种新开发
的刨面用药。本实验在大鼠皮肤深二度烫伤创面外用
该药,通过对创面组织羟脯氨酸检铡及创面愈合面积
百分比、愈合时间、病理形态学的观察,研究不同剂量
的烧烫安乳膏对烫伤剖面愈合的促进作用。
收稿日期;2005—02—22
1材料与方法
1.1药品、试剂与仪器:烧烫安乳膏(湖南医药工业
研究所,批号021203)。湿润烧伤膏(北京光明中医
烧伤疮疡研究所汕头经济特区美宝制药厂,批号
020701)。考马斯亮蓝及羟脯氨酸测试盒(南京建成
生物工程研究所),成纤维细胞生长因子一&(FGF一
1
2
3
4
5
[
[
[
[
[





万方数据
-1528· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第lo期2005年10月
B,)单克隆抗体、抗体稀释液、DAB显色剂及即用型
SABC试剂盒均为武汉博士德生物工程有限公司产
品。荧光显微镜(日本),751分光光度计(上海分析
仪器总厂),台式高速冷冻离心机(太仓市医疗器械
厂),电热恒温水浴箱(重庆实验设备厂)。
1.2动物模型制备及分组:SD大鼠,体重200~
250g(中南大学实验动物部提供),3%戊巴比妥钠
ip麻醉(30mg/kg),脱毛,次日同方法麻醉,背部
置于90C水中烫15S,面积约lo%总体表面积
(TBSA),造成深二度烫伤模型(经病理证实)“]。烫
伤后立即ip乳酸林格氏液5mL。大鼠造模后分笼
饲养,自由进食饮水。烫伤大鼠随机分成5组,每组
50只。烧烫安乳膏高、中、低剂量(每日用量分别为
2.0、1.0、0.5g生药)组,创面外用烧烫安乳膏,厚
度3.o~5.0mm,每日换药2次。阴性对照组创面
外用基质乳膏.阳性对照组创面外用湿润烧伤膏,厚
度均为3.o~5.0mm,每日换药2次。用药期间各
组创面若有感染,均给予抗生素治疗。分别于烫伤后
4、8、12、l6d取创面组织标本,每组每个时间点各
处死10只大鼠;每组各取10只大鼠观察创面愈合
时间和测定创面愈合面积百分比。创面标本于
一80c存放,病理标本固定于10%甲醛液中。
1.3检测指标及方法
1.3.1创面愈合时间和刨面愈合率:每组10只大
鼠,每天观察创面愈合情况,以完全上皮覆盖作为创
面愈合时间的确定依据。每组于伤后4、8、12、16d
采用透明胶片描记加称重法测定局部刨面面积,按
下列公式计算:
剖面愈合面积百分比一(原始创面面积一未愈合创面面
积)/原始创面面积×loo%”
1.3.2烫伤创面羟脯氨酸测定:取创面组织标本,
采用化学比色法测定羟脯氨酸水平,具体操作按测
试盒说明书进行。
伤后12d创面局部FGF一既的表达,通过其表达水
平的高低来评价创面愈合能力‘“。
1.3.4病理组织学检查:标本常规石蜡包埋切片,
行HE染色,进行光镜组织学观察。
1,4统计学分析:实验所得数据均以;土s表示,用
t检验比较组间差异:
2结果
2.1烫伤刨面愈合时间比较:结果见表1。提示高、
中剂量烧烫安乳膏具有缩短创面愈合时间的作用;
而且高剂量组与湿润烧伤膏组作用相当。
2.2烫伤创面愈合面积百分比的变化:中、高剂量
烧烫安乳膏组及湿润烧伤膏组创面愈合面积百分比
在烫伤后第4、8、12、16天均显著高于阴性对照组。
且烧烫安乳膏高剂量组与湿润烧伤膏组作用相当
(见表1)。
2.3烫伤创面羟脯氨酸水平的变化:烧烫安乳膏高、
中剂量组创面组织羟脯氨酸水平在伤后第8、12天均
显著高于阴性对照组(见表2)。提示烧烫安乳膏组成
纤维细胞增生,胶原合成增加,刨面愈合加强。
2.4免疫组化检测结果:用免疫组织化学的方法检
测了伤后12d创面局部的FGF一目的表达情况,结
果见表2,发现烧烫安乳膏中、高刺量组(特别是高
剂量组)及湿润烧伤膏组FGF一&的表达明显强于
阴性对照组,提示烧烫安乳膏促进创面愈合。
2.5创面大体观察及病理形态学观察:烫伤后,4d
内各组创面均红润。烧烫安乳膏中、高剂量组及湿润
烧伤膏组刨面内有白色分泌物,3d后创面色泽转
浅红。随着给药时间的延续,烧烫安乳膏中、高剂量
组及湿润烧伤膏组创面较阴性对照组及烧烫安乳膏
低剂量组刨面显著缩小。烧烫安乳膏组创面均无感
染,阴性对照组部分创面后期红肿,刨面痂下积脓。
约6~8d,烧烫安乳膏中、高剂量组及湿润烧伤膏
组创面渐渐与皮面平整,而阴性组对照组及烧烫安
1·3·3免疫组化分析:应用免疫组化的方法,检测 乳膏低剂量组刨面凹于皮面。14~16d。烧烫安乳膏
衰1烧鼹安乳膏对毙伤夫鼠创面愈合时间和创面愈合面积的影响(;士j,n=10)
Table1 EffectofShaotang7 Creamonwoundhealingtimeandareaofscaldedrats(#±j,m一10)
与阴性对照组比较:。P’P<0.05一r<0015negativecontrolgroup
万方数据
中草药Chine.Ke’Fradition81andHerbalDrugs第36眷第10期2005年10胃· 529·
阴性对_|!ll
烧鞭安乳膏 o.5
1.o
2 o
湿润烧伤膏
1.87士o.29
1.95士o,12
1.92士o.23
2.05士o.46
1 98士o.33
2.1Z士o.29
2.ol士o.49
2.39士o25’
2.78士o34’。
0.67士o.54。
2.82土o.35
2.52土o.65
3.21士o.26‘
3.76±o.43+‘
3.43土o54++
2.60士0-38
2.66±0.31
2.69土o.47
2.81土o.23
2.71土o29
6,8士2.8
8.0士2.5
14.6士2.9。
1 7 4士1.7‘
17.3士2.o‘
与阴性对j}Il组比较·。尸。P<0.05一P<0.01wnegativecontrolgroup
中、高剂量组及湿润烧伤膏组刨面基本愈合,而阴性
对照组及烧烫安乳膏低剂量组创面愈合时间明显延
迟。组织学观察:伤后第4天,烧烫安乳膏中、高荆量
组及湿润烧伤膏组毛细血管数量增多,管腔较大,成
纤维细胞较多,有一定数量的巨噬细胞。阴性对照组
及烧烫安乳膏低剂量组毛细血管数量较少,而且管
腔较小,成纤维细胞较少,巨噬细胞数目也较少。伤
后第8天,烧烫安乳膏中、高剂量组及湿润烧伤膏组
毛缅血管较多,管腔较大,胶原纤维较少,刨面部分
已有上皮细胞覆盖;而阴性对照组及烧烫安乳膏低
剂量组毛细血管数量较少,且管腔较小,胶原纤维排
列密集。
3讨论
创面愈合过程中胶原代谢的状况可反映创面愈
合的情况,羟脯氨酸在胶原中所占比例相对恒定(大
约12%~15%)“]。测定羟脯氨酸水平可间接反映
胶原水平。本实验结果表明各组羟脯氨酸水平伤后
第4天开始升高,至第12天达到峰值,随后降低。在
伤后第8天和第12天,烧烫安乳膏中、高剂量组及
湿润烧伤膏组创面羟脯氨酸水平明显高于阴性对照
组。提示烧烫安乳膏可促进烧(烫)伤创面胶原的合
成,促进刨面的愈合,这与形态学的变化基本相
一致。
烧(烫)伤铷面修复以刨面完全上皮化作为刨面
愈台的终点,因此表皮细胞分化、增殖和迁移是烧
(烫)伤创面愈合过程中最重要的环节。本实验在病
理切片中观察到伤后烧烫安乳青中、高剂量组及湿
润烧伤膏组烫伤刨面表皮细胞增殖和迁移非常活
跃,明显早于阴性对照组,说明烧烫安乳膏可加速创
面上皮化,促进创面愈合。
烧(烫)伤创面愈合时间和创面愈合面积百分比
是评价创面愈合的综合性指标。在本实验中烧烫安
乳膏可明显提高创面愈合面积百分比,缩短创面愈
合时间,加速创面愈合。
成纤维细胞生长因子(FGFs)无论在体内还是
在体外。都能刺激创面愈合中几乎所有类型的细胞
的增殖。Takenaka等在创面愈合过程中,应用免疫
组化和Westernblot方法,来检测创面成纤维细胞
生长因子受体一l(FGFR一1)水平的高低以反映
FGF的水平,从而谭价刨面愈合的能力o]。本实验
采用免疫组化的方法成功检测到烧烫安乳膏中、高
刺量组及湿润烧伤膏组与阴性对照组创面局部
FGF一且表达有显著差异,特别是烧烫安乳膏高剂量
组FGF—pt表达非常强烈.有力地证实了烧烫安乳膏
促进创面愈合。
本实验采用大鼠皮肤深二度烫伤模型证实了烧
烫安乳膏能够缩小大鼠烫伤创面面积,促进御面愈
合,增加创面愈合面积,从而为烧(鼹)伤的临床治疗
提供了一条崭新而有效的中医药治疗途径。
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烧烫安乳膏对大鼠皮肤深二度烫伤创面愈合的影响
作者: 李梅连, 吴爱萍, 张胜南, LI Mei-lian, WU Ai-ping, ZHANG Sheng-nan
作者单位: 李梅连,吴爱萍,LI Mei-lian,WU Ai-ping(湖南医药工业研究所,湖南,长沙,410014), 张胜
南,ZHANG Sheng-nan(中南大学湘雅医院,烧伤整形科,湖南,长沙,410001)
刊名: 中草药
英文刊名: CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年,卷(期): 2005,36(10)
被引用次数: 4次

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