全 文 ：3. 1 高尤-13水溶性多糖含量为 10. 16% ,其水溶
性多糖由阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖
等组成,葡萄糖含量较高, 有一定的阿拉伯糖、甘露
糖和半乳糖, 少量木糖。
3. 2 将单糖转化成多羟基醇时,用四氢硼钠还原,
在实际操作中可使四氢硼钠微过量,再用冰乙酸分
解过量的四氢硼钠,否则会干扰酰化过程。
3. 3 为了便于 GC 分析, 将多元醇酰化, 制成易挥
发、对热稳定的衍生物。这个过程是多元醇与乙酸酐
的反应,该反应的好坏取决于反应条件,最重要的条
件之一是催化剂的使用,本实验使用 1-甲基咪唑。
3. 4 实验用苯酚现用现配,标准曲线用苯酚的浓度
与测定样品时用苯酚的浓度必须一致, 否则糖含量
测不准确。
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RP-HPLC法测定总藤黄酸中藤黄酸的含量
柳文媛,冯 锋* ,尤启冬* * ,张正行X
(中国药科大学 药物分析教研室,江苏 南京 210009)
藤黄系藤黄科植物藤黄 Garcinia hanbury i
Hook. f . 所分泌出的干燥树脂, 性寒, 味酸、辛、涩,
有毒, 具破血散结、解毒、止血、杀虫之功效, 用于治
疗瘰疠、痈疸、疖肿等顽疾[ 1]。藤黄的抗癌作用为我
国药理和临床工作者最早发现。江西省曾将藤黄制
剂用于肿瘤的临床治疗,证实对多种癌症有效, 并证
明其主要的有效成分为藤黄酸( g ambogic acid) [ 2, 3]。
国内曾组织区域性协作研究, 发现并经多次实验证
明藤黄具有抗癌作用[ 4]。近年来,有关研究仍偶尔可
见,但未进行系统化、规范化试验。总藤黄酸为本校
首次制得,药理学研究表明,总藤黄酸对小鼠腹水型
肝癌、艾氏腹水癌、肉瘤 180( S180 ) , S37 , Walk256、人
肝癌 Bel-7402, SMMC-7721、宫颈癌 U14, Hela 细
胞株等有显著的抑杀作用。
藤黄酸类化合物的分析方法文献报道有薄层扫
描法[ 5] , HPLC-U V 法[ 6, 7]。本实验首次采用甲醇-
0. 1% H3PO4 ( 9∶1)为流动相, 且该流动相组成简
单,色谱峰形好,可用于总藤黄酸及其制剂中藤黄酸
的分析。
1 仪器与试剂
岛津 LC-6A 液相色谱仪,岛津 LC-6A 积分仪,
Allt ima C18色谱柱( 4. 6 mm×150 mm) , 甲醇、磷酸
均为分析纯,藤黄酸对照品自制( 98%)。
2 方法和结果
2. 1 对照液制备:取藤黄酸对照品 10 mg, 精密称
定, 置 25 mL 量瓶中, 加甲醇至刻度, 精密取该液
1. 0 mL 置 25 mL 量瓶中,加流动相至刻度, 即得。
2. 2 供试液制备:取总藤黄酸 10 mg ,精密称定, 置
25 mL 量瓶中,加甲醇至刻度,精密取该液 1. 0 mL
置 25 mL 量瓶中,加流动相至刻度, 即得。
2. 3 色谱条件: 甲醇-0. 1% H3PO 4 ( 9∶1)为流动
相,检测波长为 360 nm ,温度为室温, 理论塔板数按
藤黄酸计算应不低于 4 000。
2. 4 方法学考察
2. 4. 1 标准曲线和线性范围:取藤黄酸对照品 10
mg, 精密称定,置10 mL 量瓶中,加甲醇使溶解并稀
释至刻度, 精密吸取 0. 1, 0. 2, 0. 3, 0. 4, 0. 5, 0. 6
mL,置 25 mL 量瓶中, 流动相稀释至刻度, 吸取各
对照品溶液 20 LL, 注入液相色谱仪, 测定峰面积,
以峰面积 Y 为纵坐标,对照品溶液浓度 X 为横坐标
进行线性回归, 得回归方程Y= 30 153X- 647. 91
( r= 0. 999 8) ,线性范围为4. 0～24. 3 Lg/ mL。
2. 4. 2 精密度试验: 取上述对照品溶液( 16 Lg /
mL ) , 重复进样 5 次, 测定藤黄酸峰面积, 计算得
·706· 中草药 Chinese T raditional and Herbal D rug s 第 34 卷第 8 期 2003年 8月
X 收稿日期: 2002-04-08
* 中国药科大学天然药物化学教研室 * * 中国药科大学药物化学教研室
RSD= 0. 89%。
2. 4. 3 加样回收率: 取总藤黄酸 10 mg ,精密称定,
置 25 mL 量瓶, 加甲醇至刻度,精密取该液 0. 5 mL
置 25 mL 量瓶, 按照高 ( 120%)、中 ( 100% )、低
( 80%)分别添加藤黄酸对照品, 加流动相至刻度,按
上述色谱条件测定,计算即得。结果 3水平平均回收
率为 97. 2%, RSD= 1. 5%。
2. 4. 4 重现性试验: 取本品一批( 20001015) ,按上
述方法平行测定 6次, 计算藤黄酸含量,结果藤黄酸
含量为 867 mg/ g , RSD= 0. 5%。
2. 4. 5 稳定性试验: 取含量测定样品溶液, 隔 4 h
进样测定藤黄酸峰面积, 连续考察 24 h,结果溶液
在 12 h 内稳定 RSD= 1. 0%。
2. 5 样品的测定:照上述方法分析制备供试品溶液
与对照品溶液,各取 20 LL 分别注入液相色谱仪,测
定峰面积, 以外标法计算样品中藤黄酸的含量, 3个
批号样品的含量测定结果见表 1,色谱图见图 1。
表 1 样品的含量测定结果( n= 5)
Table 1 Results of content of samples ( n= 5)
批 号 藤黄酸/ (m g·g- 1)
20001015 860
20001021 871
20001027 841
3 讨论
3. 1 藤黄酸的紫外吸收图谱显示最大吸收为 290
nm 和 360 nm ,但考虑到 360 nm 处溶剂的干扰小,
故选择 360 nm 为测定波长。
3. 2 稳定性试验表明藤黄酸在甲醇中不稳定, 甲醇
溶液中回流 4 h,藤黄酸含量下降约 10%,其降解或
异构化产物正在进一步研究中。
3. 3 将藤黄酸置 60℃放置 10 d,含量下降 6% ,故
应置阴凉处保存。
图 1 藤黄酸对照品( A)和总藤黄酸(B)色谱图
Fig. 1 HPLC chromatograms of gambogic
acid ( A) and total gambogic acid ( B)
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China Pharm Univ (中国药科大学学报) , 1999, 30( 3) : 202-
205.
三七化痔丸的质量标准研究
黎炳华,丘文珍X
(广州中一药业有限公司,广东 广州 510140)
三七化痔丸是由盐肤木、三七、千里光等数味中
药组成的成方制剂, 具有清热解毒、止血止痛等功
效。为了更好地控制其质量,本实验对原千里光的薄
层鉴别进行了改良, 增加了盐肤木、三七的薄层鉴
别,并采用薄层扫描法对制剂中的人参皂苷 Rg1进
行含量测定[ 1]。
1 材料、仪器与试剂
三七化痔丸为本公司产品, 人参皂苷 Rg1对照
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X 收稿日期: 2002-10-31